嗅鞘細胞分離有傳統分離法:嗅球置于少量ACSF(人工腦脊液)中(4℃冰浴),在解剖顯微鏡下,將位于嗅球最外層的嗅神經層、嗅神經及包被的腦膜輕輕剝下,用ACSF洗2次,組織塊用0.125%胰酶(Sigma)37℃消化20min,經胰酶消化的組織塊再移至完全培養液(DMEM:胎牛血清=9:1美國GIBCO公司)中,用滴管輕輕吹打組織塊使之形成細胞懸液備用。分層消化法:整個嗅球置于0.125%胰酶中,37℃消化15min(不時搖動),取出含有細胞的酶液,終止酶反應。剩余的嗅球再用酶消化,重復以上操作6次,細胞懸液分別收集于6支小試管內備用。直接擠壓法:嗅球置于少量ACSF中,用眼科鑷子直接將嗅球撕爛、擠壓,將剩余的片狀組織塊轉移至另一試管內,用ACSF洗2次,組織塊用0.125%胰酶(Sigma)37℃消化20min,經胰酶消化的組織塊再移至完全培養液中,用滴管輕輕吹打組織塊使之形成細胞懸液。 傳統分離方法一般分為兩大類,一類是......閱讀全文
嗅鞘細胞分離有傳統分離法:嗅球置于少量ACSF(人工腦脊液)中(4℃冰浴),在解剖顯微鏡下,將位于嗅球最外層的嗅神經層、嗅神經及包被的腦膜輕輕剝下,用ACSF洗2次,組織塊用0.125%胰酶(Sigma)37℃消化20min,經胰酶消化的組織塊再移至完全培養液(DMEM:胎牛血清=9:1美國GI
OECs表達膠質纖維酸性蛋白(GFAP),在血管壁形成終足,以及參與形成膠質界膜,此界膜大致勾勒出了嗅神經軸突與嗅球顆粒層嗅小球的交界線,OECs在免疫細胞化學超微結構特征以及與軸突的功能聯系方面與星形膠質細胞存在明顯不同。OECs對神經生長因子受體(P75NGR)Laminin細胞粘附分子L1
純化細胞的方法較多,一般有差速貼壁,化學藥物法,梯度離心法,免疫親和吸附法。以后者純化效果最好,其純度可達99%以上,是目前普遍采用的方法之一。但是此法步驟較為繁瑣,費用高,同時細胞經過反復清洗,活性下降,于是給下一步培養帶來了一定的困難。 主要影響純化的是成纖維細胞,在培養24-48h加入阿
從第一次嗅鞘細胞的生物學文章發表已經有二十余年歷史了。1994年RamonCueto和Nieto-Sampedrol發表了第一篇關于嗅鞘細胞有助于感覺軸突長入脊神經切斷術的文章,在此之前Doucette實驗室發表了嗅鞘細胞移植人腦后存活的文章,Raisman小組發現皮質脊髓束損傷后行嗅鞘細胞移植
嗅鞘細胞(olfactoryensheathingcells,OECs)是在功能上介于施旺細胞和少突膠質細胞之間的一種特殊的膠質細胞,具有神經營養、抑制膠質增生、瘢痕形成、成鞘作用等。為軸突生長提供了適宜的微環境及較強的遷移的特性,使其成為促進中樞神經再生的理想候選細胞之一。 嗅鞘細胞是目前所
嗅鞘細胞是一種嗅神經的支持細胞,它包被神經軸突遷徙入腦,在顱底它和嗅球的僧帽細胞相結合。分布于嗅神經的全長,從嗅上皮基底膜一直到嗅球,主要位于嗅神經的纖維層,至于是否深入到顆粒層仍存在爭議。嗅鞘細胞具有雪旺氏細胞和星形膠質細胞的特性,但總的表現更趨于前者,它有兩個獨特的特征。第一,它不僅存在于外
OECs的培養,由胚胎、新生期、成年大鼠和小鼠的嗅球取材均已見報道。供體組織年齡的不同,培養細胞的性質也有一定的差異。成熟嗅球從外到內可分為以下幾層:嗅神經層、小球層、外叢層、僧帽細胞層、內叢層、粒層、髓層和室管膜層。嗅球成鞘膠質細胞包繞嗅神經元的軸突經外周部分進入中樞神經系統,終止于嗅球的嗅神
實驗材料 L-多聚賴氨酸 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?I型膠原蛋白酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
實驗材料 L-多聚賴氨酸I型膠原蛋白酶HBSSDMEM FBSDMEM BS單克隆抗體第二抗體Sprague-Dawley大鼠 試劑、試劑盒 Leibowitz L-15 培養液70%乙醇 儀器、耗材 培養瓶培養皿蓋玻片Petri培養皿15ml帶蓋聚丙烯錐形管7號彎鑷和直鑷帶蓋圓底聚苯乙稀管彎
實驗材料L-多聚賴氨酸I型膠原蛋白酶HBSSDMEM FBSDMEM BS單克隆抗體第二抗體Sprague-Dawley大鼠試劑、試劑盒Leibowitz L-15 培養液70%乙醇儀器、耗材培養瓶培養皿蓋玻片Petri培養皿15ml帶蓋聚丙烯錐形管7號彎鑷和直鑷帶蓋圓底聚苯乙稀管彎解剖剪手術刀切除