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  • 關于免疫熒光技術的方法原理的簡介

    免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。 直接法 將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。 間接法 如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進行反應,用水洗去未反應的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應,使之形成抗原—抗體—抗體復合物,再用水洗去未反應的標記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同。 標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發生......閱讀全文

    免疫熒光技術的技術特點

    免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。

    免疫熒光技術的技術分類

      ⑴ 熒光抗體技術(熒光顯微鏡技術)  抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。  ⑵ 免疫熒光測定技術  抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法  ⑴熒光物質  1)熒光色素  許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作

    免疫熒光技術的技術分類

    ⑴ 熒光抗體技術抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。⑵ 免疫熒光測定抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法⑴熒光物質1)熒光色素許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染

    免疫熒光技術的技術分類

    ⑴ 熒光抗體技術抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。⑵ 免疫熒光測定抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法。

    免疫熒光簡介

      免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。

    免疫熒光技術的實驗方法及其分類

    一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮,檢測產物發出的熒光,熒光強度與Mb濃度呈正比,可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好,線性范圍寬,具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例,首先將特異性抗

    免疫熒光技術的實驗方法及其分類

    一、免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮,檢測產物發出的熒光,熒光強度與Mb濃度呈正比,可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好,線性范圍寬,具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例,首先將特異性抗

    干燥技術的原理簡介

      在一定溫度下,任何含水的濕物料都有一定的蒸氣壓,當此蒸氣壓大于周圍氣體中的水汽分壓時,水分將汽化。汽化所需熱量,或來自周圍熱氣體,或由其他熱源通過輻射、熱傳導提供。含水物料的蒸氣壓與水分在物料中存在的方式有關。物料所含的水分,通常分為非結合水和結合水。非結合水是附著在固體表面和孔隙中的水分,它的

    PCR技術的原理簡介

      DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,加入設計引物,

    免疫酶技術的技術原理簡介

      免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。  目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),

    免疫熒光技術直接法測抗原的檢測原理介紹

      ⑴基本原理  將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。  ⑵試劑與儀器  磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.0

    免疫熒光標記技術的方法分類及技術特點

    根據抗原抗體反應的結合步聚的不同,免疫熒光標記技術可分為直接法、間接法、補體法和雙重免疫熒光法四種。直接法是將熒光素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合,以檢查出相應的抗原成分。間接法是先用特異性抗體與相應的抗原結合,洗去未結合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結合,

    免疫熒光技術的概述

      免疫熒光技術(immune fluorescence)  將免疫學方法(抗原抗體特異結合)與熒光標記技術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。由于熒光素所發的熒光可在熒光顯微鏡下檢出,從而可對抗原進行細胞定位。  免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制

    免疫熒光的技術特點

    該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分

    免疫熒光技術的應用

    一、標本的制作免疫熒光技術在實際應用上主要有直接法和間接法。直接法是在檢測樣品上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清,經洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結果。免疫熒光直接法可清楚地觀察抗原并用于定位標記觀察。間接法是在檢測樣品上滴加已知的細菌特異性抗體,待作用后經洗滌,再加入熒光標記的第二抗體。如研制成的抗沙

    關于免疫熒光技術—熒光抗體染色的基本介紹

      免疫熒光技術(immunofluorescence techniques) 該法是以熒光素,如異硫氰酸熒光素(fluorescence isothiocyanate,FITC)、羅丹明等標記抗體或抗原,以檢測標本中抗原或抗體的方法。免疫熒光技術也包括兩種基本類型,即熒光抗體染色(fluoresc

    免疫熒光原理

    免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。

    免疫熒光原理

      免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。  直接法  將

    關于氨基酸的檢測方法和原理簡介

      1、茚三酮反應(ninhydrin reaction)  試劑:茚三酮(弱酸環境加熱)  顏色:紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色)  原理:檢驗α-氨基酸  2、坂口反應 (Sakaguchi reaction)  試劑:α-萘酚+堿性次溴酸鈉  顏色:紅色  原理:檢驗胍基,精氨酸有此反應  3、

    熒光偏振技術的原理簡介

      將磷酸化底物進行熒光標記,蛋白激酶產生的磷酸化產物不進行熒光標記。讓兩種磷酸化產物與抗絲氨酸抗體(絲氨酸和蘇氨酸是最常見的磷酸化位點,因為其結構末端含有羥基,羥基很活潑,可以與磷酸基團結合)相競爭結合。當反應液中沒有蛋白激酶產生的磷酸化產物時,熒光標記的磷酸化物與抗體相結合形成復合體,由于復合體

    微膠囊技術的原理簡介

      具體來說是指將某一目的物(芯或內相)用各種天然的或合成的高分子化合物連續薄膜(壁或外相)完全包覆起來,而對目的物的原有化學性質絲毫無損,然后逐漸地通過某些外部刺激或緩釋作用使目的物的功能再次在外部呈現出來,或者依靠囊壁的屏蔽作用起到保護芯材的作用,微膠囊的直徑一般為 1~500μm,壁的厚度為

    膜片鉗技術的技術原理簡介

      膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由于電極尖端與細胞膜的高阻封接,在電極尖端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離,因此,此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就代

    常用免疫組織化學方法的原理免疫熒光方法

    是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高

    免疫熒光細胞化學的原理

    免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看

    免疫熒光細胞化學的原理

    免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗體(或抗原),再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅

    免疫熒光電鏡的原理

    根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或

    免疫熒光技術

      免疫熒光技術是標記免疫技術中發展最早的一種.它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記抗體獲得成功。經過幾十年的發展,該技術已相當成熟。  用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的

    免疫熒光技術

    免疫熒光技術1)??直接法1.標本經固定后,PBS洗滌3×3分鐘。2.加熒光素標記的抗體,濕盒內37℃孵育50分鐘。3.PBS洗滌3×3分鐘。4.0.1%伊文氏蘭復染。5.PBS洗3次,蒸餾水洗2次,每次3分鐘,以除去NaCl結晶。6.緩沖甘油封片,鏡檢。?2)??間接法1.標本固定后,PBS洗滌3

    免疫熒光技術

    基本原理  將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l??????????磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):

    免疫熒光技術

    實驗方法原理 直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存在與否及其所在部位。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBS伊文氏蘭儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. 標本經固定后,PBS洗滌3×3 分鐘;2. 加熒光素標記的抗體,濕

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