DNA合成儀的操作步驟
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因為該溶劑用量較大。 2)將標記好的清潔的收集瓶裝在合成儀上。 3)將要合成的DNA序列輸入合成儀。 4)檢查選擇的合成步驟是否正確。 5)選擇結束方法:TritylOffAuto是儀器的原始狀態,若打算以5,—DMT基團連接純化寡核苷酸,將其轉變為TritylOnAuto結束狀態。 6)選擇結束方法,一般為系統的原始狀態。 7)在每個柱監視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。 8)以代碼代替相應的DNA序列標記每一個收集瓶。 9)打印出每一個柱設置的詳細......閱讀全文
DNA合成儀合成原理
DNA的:即DNA3'端固定于基質上,然后沿3'向5'方向依次添加直至合成所需的DNA片段。不同于應用的DNA合成。合成過程:第一個堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個堿基的5’-OH用二對甲氧三苯甲基DMT保護,堿基上的氨基用保護,然后對3‘-OH用氨基磷酸化合物進行活化。1
DNA合成儀合成原理介紹
DNA合成儀合成原理:DNA的固相合成:即DNA3'端固定于基質上,然后沿3'向5'方向依次添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應用DNA聚合酶的DNA合成。合成過程:第一個堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個堿基的5’-OH用二對甲氧三苯甲基DMT保護,堿基上的氨基用苯
DNA合成儀簡介
設計用于合成結構上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學反應與相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學反應和操作細節隨不同的儀器而改變,最廣泛應用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
DNA合成儀原理
DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應用DNA聚合酶的DNA合成。合成過程個堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個堿基的5’-OH用二對甲氧三苯甲基DMT保護,堿基上的氨基用苯甲酸保護,然后對3‘-OH用
DNA合成儀的發展
當前DNA合成儀的主要生產廠商都致力于機器性能的完善和應用領域的開拓以及率、高產率的儀器的開發與研究。中國臺灣科學委員會“基因醫藥衛生科技研究計劃”中的基因生物技術組已經成功研發**臺高密度復制DNA合成儀,可以同時合成384條不同DNA,每日可合成768條DNA,并可以配合聚合酶連鎖反應裝置,大量
DNA合成儀日常維護
1.瓶塞“O”形環一月檢查一次“O”形環,最少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(tefloninse
DNA合成儀如何分類
DNA合成儀可分為實驗室型,工業型和大規模合成三種主要類型。1,實驗室型:主要指合成通量較小,且單柱合成產物為10-1000nmol的DNA合成儀,一般為合成柱數低于48柱(含)的DNA合成儀,主要適用于化學生物學實驗室,或某些剛起步的商業機構。2, 工業型工業型合成儀,主要指合成通量大,且單柱合成
DNA合成儀的發展
當前DNA合成儀的主要生產廠商都致力于機器性能的完善和應用領域的開拓以及高效率、高產率的儀器的開發與研究。 臺灣科學委員會“基因醫藥衛生科技尖端研究計劃”中的基因生物技術組已經成功研發全世界第一臺高密度復制DNA合成儀,可以同時合成384條不同DNA,每日可合成768條DNA,并可以配合聚合酶
DNA合成儀的合成柱的相關介紹
起始結合在載體(一般為CPG)上的核苷酸是裝在一次性的柱子中,除柱體外,還有2個固定過濾板和2個接頭,所有的部件都由惰性材料制成。固定過濾板是多孑L性聚苯乙烯固定在兩端蓋子中。入口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭,與儀器的公路厄氏接頭配對。柱子是對稱的(沒有頂端和底部、前后之分),可以以任何方
DNA合成儀的日常維護
1.瓶塞“O”形環 一月檢查一次“O”形環,最少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(teflon
DNA合成儀操作方法
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下:1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的
DNA合成儀的日常維護
DNA合成儀 -日常維護 1.瓶塞“O”形環 一月檢查一次“O”形環,zui少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形
DNA合成儀結構和性能
(一)壓力管路及輸送管路每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞,對于亞磷酰胺,1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上,而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時,儲液瓶上部空間由氬氣加壓,液體被推進輸送管,流到其目的地。(二)壓力系統 系統壓力由超純氬(99.
DNA合成儀結構和性能
試劑驅動系統一般地,DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑,也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時,需首先將管路系統電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓,通過合成
DNA合成儀的操作步驟
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所有試
DNA合成儀的試劑驅動系統
一般地,DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑,也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時,需首先將管路系統電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓,通過合成管理軟件
使用DNA合成儀的操作步驟
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所有試
簡介DNA合成儀的日常維護
1.瓶塞“O”形環 一月檢查一次“O”形環,最少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(teflon
關于DNA合成儀的發展簡介
當前DNA合成儀的主要生產廠商都致力于機器性能的完善和應用領域的開拓以及高效率、高產率的儀器的開發與研究。 臺灣科學委員會“基因醫藥衛生科技尖端研究計劃”中的基因生物技術組已經成功研發全世界第一臺高密度復制DNA合成儀,可以同時合成384條不同DNA,每日可合成768條DNA,并可以配合聚合酶
DNA合成儀特點、性能與應用
設計用于合成結構上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學反應與相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學反應和操作細節隨不同的儀器而改變,最廣泛應用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
DNA合成儀的使用方法
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下:1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的試
DNA合成儀的使用方法
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所
全自動DNA合成儀日常維護
1.瓶塞“O”形環??? 一月檢查一次“O”形環,最少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(teflon
DNA合成儀的使用方法
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所有試
自動DNA合成儀的日常維護
1.瓶塞“O”形環一月檢查一次“O”形環,zui少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較,如果在“O”形環上出現白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,進行清洗。更換“O”形環的步驟如下:用止血鉗夾住“O”形環,從槽中取下(或用牙簽鉤下),注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(teflonin
自動DNA合成儀的操作要點
1.合成開始后檢查要點合成開始時,檢查第二個核苷酸脫DMT所產生的橘色,保證一切正常。*個DMT的顏色不能作為提供資料的依據,因為它是載體上裝進的*個核苷的量度。檢查合成柱是否滲漏,滲漏原因可能是由于柱子錯誤或柱子與合成儀上的luer接頭未擰緊所致。檢查監視器上的詳細內容,必要時重新存儲所需參數。2
DNA合成儀的使用方法
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,三氯乙酸(TCA)脫保護溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下: 1)仔細檢查合成儀上所
DNA合成儀的結構和性能
試劑驅動系統 一般地,DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑,也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時,需首先將管路系統電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓,
DNA合成儀的特點與性能
一、按照不同用途,DNA合成儀可分為實驗室型,工業型和大規模合成三種主要類型。 1,實驗室型:主要指合成通量較小,且單柱合成產物為10-1000nmol的DNA合成儀,一般為合成柱數低于48柱(含)的DNA合成儀,主要適用于化學生物學實驗室,或某些剛起步的商業機構。 該類型DNA合成儀品牌較
改變DNA合成儀合成方法后清洗試劑管道
當從一種類型的化學合成方法改變為另一種類型后,清洗自動DNA合成儀上的所有管道是非常重要的。否則就會導致DNA合成失敗。具體方法如下:1)按照正常方法更換所有必要的試劑。2)將用過的合成柱裝在合成儀上每個柱的位置。3)在每一柱位置都輸入合成片段AGCTT序列。4)根據合成方法按照TritylOnMa