瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響電泳速度及分離效果。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳,其優點如下。(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。(2)瓊脂糖凝膠結構均勻,含水量大(約占98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,分辨率高,重復性好。(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。(4)電泳后區帶易染色,樣品極易洗脫,便于定量測定。制成干膜可長期保存。目前,常用瓊脂糖作為電泳支持物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相......閱讀全文
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與
瓊脂糖膠和PAGE膠制備方法
一、瓊脂糖凝膠的特點????天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫
PAGE膠制備方法
實驗概要SDS-PAGE是對蛋白質進行量化,比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。SDS是一種去垢劑,可與蛋白質的疏水部分相結合,破壞其折疊結構,并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣品介質和凝膠中
PAGE膠制備方法
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巰基乙醇,1ml 1%溴酚藍,0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周,或在-20℃保存數月。2. 凝膠貯液:在通風櫥中,稱取丙烯酰胺30g,甲叉雙丙烯
PAGE膠制備方法實驗
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巰基乙醇,1ml 1%溴酚藍,0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周,或在-20℃保存數月。2. 凝膠貯液:在通風櫥中,稱取丙烯酰胺30g,甲叉雙丙烯
SDSPAGE膠制備
一. 實驗原理: SDS-PAGE是對蛋白質進行量化,比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可重復的方法。該法是依據混合蛋白的分子量不同來進行分離的。 SDS是一種去垢劑,可與蛋白質的疏水部分相結合,破壞其折疊結構,并使其廣泛存在于一個廣泛均一的溶液中。SDS蛋白質復合物的長度與其分子量成正比。在樣
SDSPAGE膠的干燥
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形,但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量,因此,應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態,使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70)(2)電泳后的凝膠用
SDSPAGE膠的干燥方法
凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman 3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形,但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量,因此,應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態,使其真空壓力波動極少。(1)試劑與配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70)(2)電泳后的凝膠用
如何配制sdspage梯度膠
操作步驟( 1 )在制板支架上置一專用有機玻璃槽,將固定好的玻璃板下部插入槽內,中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂,冷凝后封閉膠腔底部。( 2 )用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。( 3 ) 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只,加凝膠貯液①
SDSPAGE梯度膠怎么配置
操作步驟( 1 )在制板支架上置一專用有機玻璃槽,將固定好的玻璃板下部插入槽內,中部用兩個文具夾固定在支架豎板上。在槽內倒入已充分溶化的瓊脂,冷凝后封閉膠腔底部。( 2 )用直徑約 2mm 的聚乙烯管連接好梯度混合器、恒流泵、凝膠模。( 3 ) 30% 膠液的配制取 50ml 燒杯一只,加凝膠貯液①
SDSPAGE凝膠-自配?配膠試劑盒?預制膠?
蛋白質印跡的發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克(George Stark)。在尼爾·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化學》(Analytical Biochemistry)中首次被稱為Western Blot。蛋白免疫印跡( Western Blot)
怎么配置1%瓊脂糖膠
1、制備1%瓊脂糖凝膠(大膠用70ml,小膠用50ml):稱取0.7 g(0.5 g)瓊脂糖置于錐形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小燒杯.微波爐加熱煮沸3次至瓊脂糖全部融化,搖勻,即成1.0%瓊脂糖凝膠液。2、膠板制備:取電泳槽內的有機玻璃內槽(制膠槽)洗干凈,晾干,放入制膠玻
怎么配置1%瓊脂糖膠
1、制備1%瓊脂糖凝膠(大膠用70ml,小膠用50ml):稱取0.7 g(0.5 g)瓊脂糖置于錐形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小燒杯.微波爐加熱煮沸3次至瓊脂糖全部融化,搖勻,即成1.0%瓊脂糖凝膠液。2、膠板制備:取電泳槽內的有機玻璃內槽(制膠槽)洗干凈,晾干,放入制膠玻
電泳跑膠SDSPAGE的定義
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝膠電泳詳細資料如下:聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構,具有分子篩效應,它有兩種形式,一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠,蛋白質在電泳中保持完整的狀態,蛋白在其中依三種因素分開:蛋白大小,形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由s
電泳跑膠SDSPAGE的定義
聚丙烯酰胺凝膠電泳是網狀結構,具有分子篩效應,它有兩種形式,一種是非變性聚丙烯酰胺凝膠,蛋白質在電泳中保持完整的狀態,蛋白在其中依三種因素分開:蛋白大小,形狀和電荷。而SDS-PAGE僅根據蛋白分子量亞基的不同而分離蛋白。這個技術首先是1967年由shapiro建立,他們發現在樣品介質和丙烯酰胺凝膠
SDSPAGE蛋白電泳配膠不凝固
我分析原因是過硫酸胺失效,過硫酸氨最好是先用現配,如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話,那么用完之后ap要放在4℃保存,一周之后必須新配。另外可以適當的增加temed的量,從5μl提高到8μl并無大礙。如你所說,是不是就是ap失效呢,還有,我強烈建議你復查一邊濃縮膠,分離膠各各buffer的組分是否配制
蛋白質免疫印跡制備分離膠、積層膠
1)所需器材:制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl(PH值8.8)、1.0mol/L的Tris-cl(PH值6.8)、10%SDS(十二烷基磺酸鈉)、10%AP(過硫酸銨)、TEMED(四甲基乙二胺)、移液槍、吸
蛋白質SDSPAGE電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12膠紅線左右可以用12或10跑幾百的很大的用6的膠小蛋白12的10的一般都能跑如果不考慮效率的話...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2,看樣品濃度多少,以及你想用幾次通常我們是定到4微每微,總量100微,用10次如果濃度小的話定到2用5次
蛋白質免疫印跡實驗制備分離膠、積層膠
制備分離膠、積層膠 1)所需器材:制冰機、制膠槽、Teflon梳子、小燒杯、手套、大冰盒、去離子水、30%聚BXXA溶液、1.5mol/L的Tris-cl(PH值8.8)、1.0mol/L的Tris-cl(PH值6.8)、10%SDS(十二烷基磺酸鈉)、10%AP(過硫酸銨)、TEMED(四甲
RNA瓊脂糖變性膠電泳分析
一、原理RNA分子是以單鏈形式存在的,但在局部仍有雙鏈結構形成。由于這種局部雙鏈結構的干擾,使得在非變性凝膠上對RNA分子完整性的鑒定及其分子量大小的檢測,變得不十分可靠。通過加入乙二醛一二甲基亞砜、氫氧化甲基汞、甲醛等變性劑進行變性處理,使其局部雙鏈變為單鏈。再進行電泳,RNA的泳動距離與其片段大
簡介冷膠噴膠機的供膠裝置
組成部份說明:膠桶、泵 膠桶的容量為30L,桶蓋用于安裝活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供應膠水,配有不銹鋼膠管和過濾器過濾器 不銹鋼過濾器具有過濾膠水和消除泵的震動雙重功能調壓器 4:1不銹鋼調壓器能自動控制膠量 I/P自動壓力追蹤閥 根據糊盒機的速度自動調節膠水的壓力與流量技術參數泵的
蛋白膠如何干膠保存
最好有個干膠儀的,直接按照儀器要求做就可以了。如果你要讓膠自然干,需要很長時間,而且膠容易變形破裂。
自動滴膠勻膠機
自動滴膠勻膠機/真空旋轉涂層機 ?型號:MHY-29071MHY-29071產品簡介:主要用于液體,膠體在材料表面薄膜的形成,適用于硅片,晶片,玻璃,陶瓷等制版表面涂覆工藝。可在科研,教育,生產中應用。?MHY-29071主要特點:1可設定存儲26個不同樣片的旋轉涂敷工藝過程。2每個涂敷工藝過程可以
PAGE膠制作好以后常溫下最多可放多久
常溫下一般放個一兩天是沒有問題的,如果泡在buffer放四度,一個星期也沒問題。但是無論如何,都不推薦把膠長時間放置,因為濃縮膠和分離膠的buffer會慢慢分散,最終可能導致濃縮膠失去濃縮效果。電泳時,一般先80V左右濃縮,至樣品壓成一條直線后調大電壓至120V,一般需要再跑40-60min左右才能
瓊脂糖凝膠電泳,做膠加EB目的
在搜搜上找的同一問題的答案:“染色啊。你agarose膠電泳跑DNA,根據大小不同電泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可見光下看不見DNA的。所以加EB也好,SYBR green也好,我們實驗室用的genefinder也好,都是將DNA染色,用特殊的化學分子與DNA結合,并且在特殊波長的激發
瓊脂糖凝膠電泳,做膠加EB目的
染色啊。你agarose膠電泳跑DNA,根據大小不同電泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可見光下看不見DNA的。所以加EB也好,SYBRgreen也好,我們實驗室用的genefinder也好,都是將DNA染色,用特殊的化學分子與DNA結合,并且在特殊波長的激發光下發射熒光,熒光強度與DNA含
云石膠,AB膠,環氧石材干掛膠有什么區別
主要區別是,主要成分不同、主要特點不同、適用性不同,具體如下:一、主要成分不同1、云石膠主要成分:環氧樹脂和不飽和樹脂。2、AB膠主要成分:丙烯酸、環氧、聚氨酯。3、干掛膠主要成分:環氧樹脂、有機填充料、石英粉等。二、主要特點不同1、云石膠云石膠性能的優良主要體現在硬度、韌性、快速固化、拋光性、耐候
云石膠,AB膠,環氧石材干掛膠有什么區別
云石膠的主要成分是不飽和樹脂膠,也是AB膠的一種;AB膠有很多種類,如丙烯酸AB膠,聚氨酯AB膠,環氧AB膠,不飽和樹脂AB膠等,AB膠主要是指膠水用之前是一個樹脂,一個固化劑,用之間是分開存放的,用的時候,把AB組分混合在一起,就會固化,產生膠粘的效果;環氧石材干掛膠的主要成分是環氧樹脂,也是一種
LED貼片膠與滴膠基本知識
1、貼片膠的作用表面黏著膠(SMA, surface mount adhesives)用于波峰I接和回流I接,主要用來將元器件固定在印制板上,一般用點膠或鋼網印刷的方法來分配,以保持元件在印刷電路板(PCB)上的位置,確保在裝配線上傳送過程中元件不會丟失。貼上元器件后放入烘箱或再流焊
冷膠噴膠機的簡介和用途
在糊盒機上使用冷膠噴膠系統替代傳統的滾輪上膠,具有高效、靈活、穩定性好、操作維護簡便等優勢,是快速、高質量生產各種紙盒的必備產品。高壓活塞泵和高壓電子噴槍等具有先進的性能和可靠性,是全自動糊盒機的最佳搭檔。 冷膠噴膠機的用途 科祺冷膠噴膠系統具有高效、靈活、穩定性好、維護簡便等特點,是快速、