常用的免疫組化技術方法介紹
根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。 目前常用的幾種免疫組化技術www.biovol.net方法有以下幾種: (1)免疫熒光方法:是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗中應用較廣。 (2)免疫酶標方法:免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細......閱讀全文
常用的免疫組化技術方法介紹
根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。 目前常用的幾種免疫組化技術w
常用的免疫組化技術方法
根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。目前常用的幾種免疫組化技術www.biovo
常用免疫組化方法
目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹1)免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可
常用免疫組化染色方法
常用免疫組化染色方法,真空負壓免疫熒光染色法染細胞培養片。1. 將細胞爬于載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數次,徹底洗去蛋白液。2.純丙酮固定5-10分鐘。3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。4.加入選用的第一抗體孵育真空負壓處理15分鐘。5.PBS洗3次,每次2分鐘。6.加入熒光抗體孵育真空負壓處理
免疫組化的概念和常用方法
概念和常用方法介紹1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學(immunohistochemistry)技術或免疫細胞化學(immunocytochemistry)技術。2、原理根據抗原抗體反應和化學顯色原
免疫組化實驗中常用染色方法
根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。
免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法
一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性
常用的破乳技術介紹
①加鹽;②使用加熱 - 冷卻萃取容器;③通過玻璃棉塞過濾乳化液樣品;④通過相過濾紙過濾乳化液樣品;⑤通過離心作用;⑥加進少量的不同的有機溶劑。
常用的無損檢測技術介紹
①射線照相檢查。當穿透被測物體的每個部分時,通過利用強度衰減的差異,使用X射線或γ射線檢測被測物體的缺陷。如果吸收的光線投射到X射線膠片上,則在顯影之后,可以獲得顯示物體厚度變化和內部缺陷的照片。如果使用熒光屏而不是膠片,則可以直接觀察被檢物體的內部狀況。 ②超聲波測試。利用對象本身或缺陷的聲
常用的滅菌方法介紹
常用的滅菌方法可分為物理的和化學的兩類:即:物理方法如干熱(烘燒和灼燒)、濕熱(常壓或高壓蒸煮)、射線處理(紫外線、超聲波、微波)、過濾、清洗和大量無菌水沖洗等措施;化學方法是使用升汞、甲醛、過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇水、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學藥品處理。這些方法和藥劑要根據工作中的不同材料
常用的脫氣方法介紹
1.抽真空脫氣法:此法可使用真空泵,降壓至0.05~0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發生變化,從而影響到實驗的重現性,因此多用于單溶劑體系的簡單分析。2.吹氦脫氣法:利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60 mL/min流速通入流動相儲液
常用顯帶技術介紹
1.G帶這是目前使用最廣泛的一種帶型,操作簡單,帶紋清晰,標本可長期保存,重復性好。其方法是將染色體標本經胰蛋白酶、NaOH、檸檬酸鹽或尿素等試劑處理后,再經吉姆薩染色,顯示的深淺交替的橫紋便是G帶。染色體的G帶在普通光學顯微鏡下即可觀察。2.Q帶是指染色體標本經氮芥喹吖因等熒光染料處理后顯示的帶。
常用采樣方法介紹
1、三層五點法:按堆形和面積大小采用分區設點,或按食品堆高度采用分層采樣、分區設點,每區面積不超過50m2,各設中心四角共五點;區數在兩個以上的兩區界線上的兩個點為共有點。將樣品分為上、中、下三層,在各層的四角和中間各取等量樣本混合后,再取檢驗所需樣本。2、刮涂法:在酒精燈火焰下燃燒滅菌的小刀(放涼
常用層析方法介紹
◆吸附層析吸附劑的吸附力強弱,是由能否有效地接受或供給電子,或提供和接受活潑氫來決定。被吸附物的化學結構如與吸附劑有相似的電子特性,吸附就更牢固。常用吸附劑的吸附力的強弱順序為:活性炭、氧化鋁、硅膠、氧化鎂、碳酸鈣、磷酸鈣、石膏、纖維素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最強。吸附劑在使用前須先用加熱脫水
常用濃縮方法介紹
在一些實驗中,一些被測物經分離、凈化后,樣液的量比較多,被測定成分含量極其微小。例如痕量測定實驗,在測定前需要濃縮樣液,提高濃度,這樣能提高分析的靈敏度。但是存在于這些被測物中的污染物存在性質不穩定,易氧化分解,濃縮過程一定應注意防止氧化分解,尤其是在濃縮至近干的時候,極易發生氧化、分解,這時需要在
常用小型實驗動物灌胃給藥技術方法介紹
隨著生命科學技術的發展,動物實驗已成為醫學實驗研究的基本方法。根據實驗研究目的、實驗動物的種類及藥物劑型、劑量的不同,要求對實驗動物實施不同的給藥方法。尤其對于藥物的毒理、藥效的研究和藥物劑量的確定,經口灌胃給藥方法是一種重要的途徑。在國內文獻上卻很少見到具體的描述。在此,作者將在實踐中摸索出的一套
免疫組化方法免疫膠體金技術
免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩定地吸附蛋白,對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位,甚至定量研究。由于膠
免疫組化技術的原理、分類和優點介紹
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半
細胞化學技術常用顯示方法
1.?金屬沉淀法:利用金屬化合物在反應過程中生成有色沉淀,借以辨認所檢查的物質或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后,反應產物最終生成CoS 或PbS有色沉淀,而顯示出酶活性。2. 偶氮偶聯法:酚類化合物與偶氮染料結合后可以形成耐曬染料。3. Schiff 反應:細胞中的醛基可使Schiff 試劑中的無
免疫組化實驗中常用的抗體是什么?
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體,單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。
常用的物質分離方法介紹
1、分液:分離兩種不互溶的液體,如分離油和水。2、萃取:加入適當溶劑把混合物中某成分溶解及分離,如庚烷、取水溶液中的碘。3、蒸餾:溶液中分離溶劑和非揮發性溶質,如海水中取得純水。4、分餾:離兩種互溶而沸點差別較大的液體,如液態空氣中分離氧和氮、石油的精煉。5、升華:離兩種固體,其中只有一種可以升華,
基因轉移常用的方法介紹
外源基因的轉移:基因轉移(gene transfer)是將外源基因導入細胞內,其轉移方法較多,常用的要有下列幾類:1)化學法:將正常基因DNA(及其拷貝)與帶電荷物質和磷酸鈣、DEAE-葡萄糖或與若干脂類混合,形成沉淀的DNA微細顆粒,直接傾入培養基中與細胞接觸,由于鈣離子有促進DNA透過細胞有作用
常用RNA標記方法介紹
RNA標記方法:按反應機制分如下四類:直接標記法,加尾標記法,基于逆轉錄反應的標記方法,基于RNA克隆擴增的標記方法。常用于RNA標記的方法按標記物性質分為:放射性同位素標記:32P、35S、3H非放射性標記:半抗原熒光素化學發光物質地高辛地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DI
破乳常用方法介紹
長時間靜置將乳濁液放置過夜,一般可分離成澄清的兩層。水平旋轉搖動分液漏斗當兩液層由于乳化而形成界面不清時,可將分渡漏斗在水平方向上緩慢地旋轉搖動,這樣可以消除界面處的"泡沫"。促進分層。用濾紙過濾對于由于有樹脂狀、粘液狀懸浮物存在而引起的乳化現象,可將分液漏斗中的物料,用質地密致的濾紙,進行減壓過濾
免疫組化技術要點
1. 固定最好用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。 有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。(1)BouinS固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較
蛋白芯片技術的常用載體介紹
常用的材質有玻片、硅、云母及各種膜片等。理想的載體表面是滲透濾膜(如硝酸纖維素膜)或包被了不同試劑(如多聚賴氨酸)的載玻片。外形可制成各種不同的形狀。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技術增強芯片與蛋白質的結合。
常用的基因轉染技術病毒載體介紹
1、逆轉錄病毒載體 逆轉錄病毒為RNA病毒,它們的基因組編碼在一條單鏈RNA上,病毒進入細胞通過逆轉錄作用,病毒RNA即轉變為雙鏈DNA分子,DNA進入細胞核并整合在細胞染色體中,這種整合的病毒稱為原病毒。在原病毒的兩端各有一長末端重復序列(LTR),LTR內側還有為復制所必需的其他順序,包括
檢測環境雌酮的常用方法介紹
檢測環境雌酮的常用方法為儀器分析法,主要包括氣相色譜法、氣質聯用法、液相色譜法、高效液相法等。這些方法雖然靈敏度高, 操作簡便,但需要昂貴的專門設備, 且樣品的前處理操作較繁瑣, 單個樣品的檢測時間很長, 不能快速提供檢測結果, 因此尋找靈敏度高、快速簡便、費用低的檢測方法對樣品粗篩、現場檢測、臨床
常用的電泳分析方法介紹
常用的電泳分析方法主要有:醋酸纖維素薄膜電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳、毛細管電泳。
地高辛標記RNA常用的方法介紹
地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DIG-UTP,以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP為底物通過RNA聚合酶T7、SP6經體外轉錄合成標記RNA。此法多用于RNA探針的制備,一般每20~25個核苷酸可引入一個地高辛分子。5'末端標記法5'末端標記法是通過化學