磷酸酶制備實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液抽提緩沖液實驗步驟 一、組織/細胞制備和提取1. 配制下列溶液：(1) 緩沖鹽清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 緩沖液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2) 抽提緩沖液20 mmol/L 的 MOPS，pH 7.5（配成 10 ml）5 mmol/L EDTA5 mmol/L EGTA60 mmol/L 的 β-巰基乙醇 (1:250 原液）10% 甘油加新鮮加入的 1 mmol/L PMSF，PMSF 在異丙醇中制成 100 mmol/L 的儲存液。2. 準備細胞或組織(1) 對于培養細胞① 除去絕大部分的培養基，直接把培養容器（培養皿或培養瓶）放在冰上以冷卻組織培養細胞。② 用 5 ml 冰冷的緩沖鹽洗滌液沖洗培養容器兩次，倒掉洗液，加入 1 ml 洗液用橡皮細胞刮把細胞收集到 1......閱讀全文
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 實驗材料 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液 ? ? ?
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） ? ? ? ? ? ? 實驗材料
磷酸酶制備實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液抽提緩沖液實驗步驟 一、組織/細胞制備和提取1. 配制下列溶液：(1) 緩沖鹽清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 緩沖液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
磷酸酶制備實驗——膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）
試劑、試劑盒提取緩沖液儀器、耗材微型離心機Superose 6 柱子實驗步驟1. 用 1 ml 含有 1% NP-40 去污劑的提取緩沖液提取顆粒部分（按照上面組織/細胞的制備和提取所述方法準備）15 分鐘，用一個小勻漿器固定在微型離心管里勻漿或者通過微量移液器吸頭尖反復吸入和排出懸浮液以確保沉淀分
磷酸酶 a 的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基轉移酶。 酶斷裂多糖的α-1，4-糖苷鍵： （
磷酸酶 a 的測定實驗
實驗方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基轉移酶。 酶斷裂多糖的α-1，4-糖苷鍵： （葡萄糖）n＋Pi?→（葡萄糖）n-1＋葡萄糖-1-P 實驗中反應與葡萄糖磷酸變位酶偶聯： 葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P 并且 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化
堿性磷酸酶染色實驗
實驗方法原理 細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性（PH9.0－9.6）環境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚鈉）水解，產生出a萘酚，然后再與偶氮鹽偶聯，生成不溶性的耐曬染料（最終產物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同）．試劑、試劑盒 磷酸萘酚鈉偶氮鹽丙二醇實驗步驟 一、實驗試劑：底物作用液的配制：α－磷
堿性磷酸酶染色實驗
實驗方法原理細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性（PH9.0－9.6）環境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚鈉）水解，產生出a萘酚，然后再與偶氮鹽偶聯，生成不溶性的耐曬染料（最終產物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同）．試劑、試劑盒磷酸萘酚鈉偶氮鹽丙二醇實驗步驟一、實驗試劑：底物作用液的配制：α－磷酸萘酚
堿性磷酸酶的測定實驗_細菌堿性磷酸酶
實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HCl磷酸硝基苯儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗混合物25℃ 時，于 405 nm 處吸收值降低，ε405＝18.5×103?l/（mol·cm）。
腺苷三磷酸酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ATP → ADP＋Pi 很多 ATP 酶是與膜組分聯系在一起的酶，比如氧化磷