Vero細胞在WAVE反應器中的微載體球轉球放大(三)
圖 3 和圖 4 顯示的是球轉球前后 Vero 細胞在微載體上的生長情況,分別有接種前第一、第三和第五天細胞的形態。圖 4 的上面三張小圖顯示了球轉球實驗 B2B #3 之前來自細胞工廠種子培養的細胞生長形態。這是典型的 Vero 細胞種子培養的生長情況。通常 90%以上的 Vero細胞會在接種 4 小時之內貼到微載體上并在 24 小時內進入對數生長期。從圖 3 和圖 4 中各次球轉球實驗之后 Vero 細胞在微載體上的生長情況,可以看到球轉球實驗之后細胞保持有良好的和種子細胞培養相似的生長形態。圖 3.球轉球實驗 B2B #1和B2B #2后 Vero細胞在微載體上的生長情況圖4.球轉球實驗B2B #3前后 Vero細胞在微載體上的生長情況 在細胞培養袋中進行的高倍率放大 我們通過兩種方式嘗試把球轉球放大工藝的放大倍率提升到十倍。第......閱讀全文
Vero-細胞在-WAVE-反應器中的微載體球轉球放大(三)
圖 3 和圖 4 顯示的是球轉球前后 Vero 細胞在微載體上的生長情況,分別有接種前第一、第三和第五天細胞的形態。圖 4 的上面三張小圖顯示了球轉球實驗 B2B #3 之前來自細胞工廠種子培養的細胞生長形態。這是典型的 Vero 細胞種子培養的生長情況。通常 90%以上的 Vero細胞會在
Vero-細胞在-WAVE-反應器中的微載體球轉球放大(二)
在瓶子內進行球轉球實驗??? 在 WAVETM 反應器內細胞密度達到需要的水平時,Vero 細胞微載體培養懸浮液即被轉移到另外一個透明的瓶子中并移到生物安全柜中。后面的清洗和胰酶消化過程等均在生物安全柜內進行。在微載體沉降下來之后,去除上清。剩下的微載體被轉移到 500 毫升無菌透明的瓶子內
Vero-細胞在-WAVE-反應器中的微載體球轉球放大(一)
Vero 細胞在 WAVE 反應器中的微載體球轉球放大 ?陸麗芳,Christain Kaisermayer, 姚鈺舜,隋禮麗通用電氣醫療集團生命科學部,Fast Trak研發中心,上海?概要 ???? Vero 細胞能被廣泛應用于疫苗的生產。Vero 細胞的培養技術能否成功放大對于該技術能否大
Vero-細胞在-WAVE-反應器中的微載體球轉球放大(五)
相比攪拌罐而言,WAVE 反應器在同一個培養袋中可以有更寬的培養范圍(10-100%工作體積),對于種子擴增和細胞消化的不同反應體積,都可以提供均勻有效的混合,從而實現微載體的原位消化,而無需特定的消化反應器。避免了消化前后微載體的轉移,操作簡單,均勻有效的混合有利于精密控制消化反應的條件,最大
Vero-細胞在-WAVE-反應器中的微載體球轉球放大(四)
B2B? #5 采用第二種方式進行高倍率放大。用 3g/L 的微載體密度培養 Vero 細胞至細胞密度 3.07x106/毫升,培養體積為 3 升。用胰酶把 Vero 細胞從微載體上消化下來。取十分之一的細胞/微載體懸浮液接種到新的 1.5 升的培養體積中,微載體濃度為 6g/L。待細胞密度達到 5
WAVETM-生物反應器中的-Cytodex?-微載體細胞培養工藝(六)
Vero細胞在轉瓶 (Spinner Flask)中無血清條件下的微載體培養 ???? Vero細胞也可以在轉瓶中進行微載體培養。如圖 14 所示,在無血清條件下,WAVE 和轉瓶這兩種培養系統中可以獲得基本相同的最大細胞密度。相比 Cytodex3,Cytodex? 1 具有更大的表面積,
WAVETM-生物反應器中的-Cytodex?-微載體細胞培養工藝(一)
摘要 ??? WAVE? Bioreactor 系統多用于懸浮細胞的培養。然而,用于細胞治療和疫苗生產的多種細胞為貼壁依賴型的,需要一個可貼附的生長表面。在本研究中,Cytodex 微載體被應用在 CellbagTM 生物反應器中以擴增 Madine-Darby Canine Kidney
小“微球”大本領:微球在制劑研究中的應用
制劑的一池春水正悄然被“微球”這種技術吹皺。即便是多種多樣的領域,小小的“微球”都會幫助研究者獲得更好的效果——那些需要緩慢釋放或是維持活性的成分,可以通過制備成微球的方式來達到預期目標——例如醫學上已有藥物的劑型創新,又或是農藥與化肥的用法改革。相比單純地開發新藥或新化合物,創新制劑的優勢非常明顯
高性能微球在多肽藥物分離純化中的應用(三)
「?色譜填料孔徑對多肽分離純化的影響?」?除了體積排阻色譜外,其它色譜分離機理都離不開樣品與色譜填料表面的作用。?色譜填料孔徑大小、分布及比表面積對多肽分離性能也有重大的影響,對于分子量小于1000的多肽樣品,一般選擇孔徑在100? 以下的就可以。?對于大多數分離模式來說有效的比表面積越大,載量越大
炭微球的制備方法(三)
.水熱合成法?水熱合成法是使用密閉壓力容器,一般以水為溶劑,在一定壓力和溫度下,在液相中通過化學反應進斤合成。采用水熱法制備炭微球的原料一般為葡萄糖、淀粉、蔗糖和纖維素等。Wang等以纖維素為原料,400℃水熱處理6h,可制備出粒徑在幾微米的炭微球。Yi等以葡萄糖為碳源,160℃水熱處理6h得到膠體
中空纖維膜過濾技術在病毒類疫苗中的應用(一)
生命科學和生物技術的日新月異對疫苗的發展提供了新的契機:疫苗快速規模化生產、質量標準不斷提高以及新技術的開發應用成為行業的技術發展趨勢。 新型中空纖維膜過濾技術具有溫和低剪切力、容塵量高、操作靈活、壽命長成本低、易于放大等優點,解決了病毒顆粒濃縮時易堵膜和對剪切力敏感易聚集兩大技術難題,提供
WAVETM-生物反應器中的-Cytodex?-微載體細胞培養工藝(五)
MDCK細胞的生長和放大(2% FBS)???? 為了研究在 Cellbag 生物反應器中 MDCK細胞擴增的可放大性,在兩種不同大小的袋子之間比較最大細胞密度和細胞生長速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培養體積采用最大工作體積的40%(即Cellbag-1
WAVETM-生物反應器中的-Cytodex?-微載體細胞培養工藝(二)
用于MDCK和 Vero細胞的生物反應器? WAVE? Bioreactor 系統由一個帶有一次性塑料細胞培養袋的搖動平臺組成,配備CO2 氣體混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD?控制塔用于控制pH、溫度、氧氣和混合。MDCK細胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50?
潮汐反應器技術在以VERO細胞為載體生產日本腦炎病毒(JE..
潮汐反應器技術在以VERO細胞為載體生產日本腦炎病毒(JEV)疫苗領域的應用背景介紹 日本腦炎病毒(JEV)于1934年首次從一例致命的人類病例的大腦中分離出來。雖然有癥狀的日本腦炎很少見,但病死率可高達30%。在那些幸存下來的人當中,30-50%遭受永久性的智力、行為或神經問題。東南亞和西太平洋地
納米微球在平板顯示領域的作用
納米微球在材料界發揮著各種各樣的關鍵作用,在平板顯示領域,粒徑高度均一的微球可作為間隔物支撐在充滿液晶的兩塊玻璃板之間,用于控制液晶盒的厚度;?導電金球和鎳球是連接芯片和面板的關鍵材料,是各項異性導電膜和導電膠的重要組成部分;光擴散微球具有特殊光學性能,可將電光源轉化成面光源的功能,大幅提高LED發
WAVETM-生物反應器中的-Cytodex?-微載體細胞培養工藝(三)
結果和討論 ??? 微載體培養的最佳工作體積和混合速度的確定當我們使用 20%到 80%的Cellbag最大工作體積時,微載體培養可以產生均勻的微載體混合分布(圖 2)。圖 2. 微載體培養的最佳工作體積???? 在工作體積小于 20%的 Cellbag 最大工作體積時,部分微載體有可能粘在 Cel
高性能微球在多肽藥物分離純化中的應用(二)
??01?「?多肽分離純化色譜填料的選擇?」一個理想的多肽藥物分離純化色譜填料必須滿足以下特性:(a)高選擇性,高分離度;(b)柱效高,分辨率高;(c)載量大;單位體積填料處理多肽樣品的能力大(d)化學性能穩定,適用pH范圍寬(1-14);可在線清洗, 耐臟性強,使用壽命長;(e)機械強度大,反壓低
高性能微球在多肽藥物分離純化中的應用(一)
由于多肽藥物結構復雜、穩定性差、濃度低且目標分子與雜質的結構相類似,有的只有一個氨基酸的差別,因此多肽藥物的分離純化一直是多肽藥物生產過程中最具挑戰性的一部分,多肽分離純化也主要依賴于高性能的微球制備色譜填料,其具有分離效果好、分辨率高、重復性好、回收率高等優點,是目前多肽藥物的主要分離純化方法。無
熒光微球分析技術及熒光微球吞噬實驗的操作流程
熒光 微球分析技術屬于化學材料發展結果,可用于細胞表面抗原的檢測、退行性神經病變示蹤物、吞噬功能的檢測、血流分析、敏感性診斷試劑等,本文介紹了熒光微球分析技術以及熒光微球吞噬實驗的操作步驟。熒光微球分析 技術簡介熒光微球分析技術是近年來化學材料科學活躍發展 的產物,各種大小(0.2~10μm)可產生
磁性殼聚糖微球
天然高分子磁性微球的研究是目前的熱點課題, 由于微球表面天然高分子的分子結構具有可設計性, 磁性微球又具有靶向性, 引起了世界科學工作者的極大興趣, 已成為21世紀生命科學和材料學等領域的研究熱點。近年來, 國外學者發表了許多有關天然高分子磁性微球的制備和應用方面的研究論文, 并申請了不少Z
微球介紹及其在各個行業的應用(二)
在血液凈化領域:微球可以替代腎臟用來去除血液有毒物質,治療和延長病人壽命。微球是制造人工腎的關鍵材料。 在計量領域:粒徑高度均一的微球可以作為標準顆粒用于精確測量常規尺子無法計量的納米尺寸的物質,標準顆粒作為計量工具也可用于矯正精密計量儀器。 在醫療診斷領域:功能化微球如磁性微球,多色熒光編碼微球可
微球介紹及其在各個行業的應用(一)
一、 什么是微球? 微球是直徑在納米和微米尺度范圍的球型粒子。球形物體是自然界存在最穩定的物質形態,它是三維幾何空間理想的對稱體,也是單位體積中所有立體形態中面積最小的。自然界大到星球如地球,小到籃球,乒乓球,玻璃珠等都是球體。 地球直徑是1.28萬千米,而籃球直徑是0.25米,1納米等于十
磁性微球的表面改性
磁性微球是有機高分子和無機磁性物質的復合體,它同時兼具有機高分子微球的諸多表面功能性和磁性無機物質的磁響應性。我們要利用其表面功能性,就有必要使磁性微球表面帶上我們所希望的功能基,以提高和擴大其應用范圍。免疫磁性微球(Immunomagnetic Microspheres, IMMS )是表面結
一次性使用固定床生物反應器與微載體攪拌罐的對比
rVSV-ZEBOV疫苗無血清生產:一次性使用固定床生物反應器 vs 微載體攪拌罐摘要?埃博拉病毒病(EVD)是一種致命性疾病,近年來偶發于非洲大陸,并導致嚴重的疫情。rVSV-ZEBOV是一種重組水泡口炎病毒結構,其中的天然病毒糖蛋白替換為埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被認為是預防這種高傳染
細胞球的概述
細胞 英文名:CELL 在文章中簡稱C。細胞并沒有統一的定義,近年來比較普遍的提法是:細胞是生命活動的基本單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成,但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現。一般來說,細菌等絕大部分微生物以及原生動物由一個細胞組成,即單細胞生物;高等植物與高等動物則是多細胞生物。
ATS全自動凍干微球生產系統:開啟微球生產新時代
在當今快速發展的科技浪潮中,微球作為一種關鍵的材料,在眾多領域都有著不可或缺的作用。從體外診斷(IVD)到生物制品、藥物制劑,再到化妝品行業,微球的應用范圍不斷拓展,對生產技術的要求也越來越高。 在傳統生產過程中,微球制備面臨諸多挑戰 ■ 滴珠慢 → 生產效率低,難以大規模應用。 ■?溶液
生物反應器在病毒載體生產中的應用
摘要scale-X 生物反應器是一種新型固定床系統,可用于貼壁和懸浮細胞系的培養。設備單元占地小,而具有相當大的表面積,從而可獲得極高細胞密度。本研究比較了在scale-X hydro生物反應器和標準微載體培養體系中進行的貼壁Vero細胞培養。兩種系統可獲得相似的單位面積細胞濃度。隨后,
關于免疫層析用微球
“微球粒徑怎么選?”“微球沉淀了怎么辦?”“微球偶聯采用兩步法進行?”?……承蒙大家的關照,選擇微球作為標記材料來開發免疫層析產品。今天,小為&小度特意為大家精選了14個在實操過程中,最常見、最具代表性的問題,由于篇幅問題,本次先上7個問答,來看看里面是不是也有你遇到的問題!Q1:在免疫層析實驗中,
熒光微球(Fluorescent-microsphere)介紹
何為熒光微球(Fluorescent microsphere)? HG-98免疫熒光分析儀除了檢測帶有熒光素的試劑外,還常常用于檢測帶有熒光微球的試劑。何為熒光微球?熒光微球: 熒光微球通常是指形狀為球形,直徑在幾納米至幾十微米之間,微球表面或內部負載有熒光物質,在受到一定的能量激發時能夠發出熒