活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（五）
SNAP-tag技術在STED超高分辨率顯微成像中的應用近十年中，顯微成像技術得到了飛躍的發展，填補光學顯微鏡（~200 nm）到電子顯微鏡（~0.1 nm）分辨率缺口，打破光學衍射極限的超高分辨率顯微鏡也越來越趨于成熟化。其中，德國馬普研究所的Stefan Hell教授憑借其研發的受激發射損耗（Stimulatedemission depletion，STED）技術榮獲2014年的諾貝爾化學獎。STED超高分辨率顯微鏡是架構在共聚焦顯微鏡上，因此其成像速度非常快，可以廣泛的應用于活細胞的超高分辨率成像。除了傳統的YFP等熒光蛋白可以用于STED活細胞超高分辨率成像，SNAP-tag和CLIP-tag可以非常簡便的的將AlexaFluo等有機染料引入活細胞，實現活細胞中多色超高分辨率成像。有機染料具有更好的光穩定性，光譜的選擇也更加靈活，配合SNAP-tag和CLIP-tag標記的特異性和穩定性，可以更優秀的服務于長......閱讀全文
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（五）
SNAP-tag技術在STED超高分辨率顯微成像中的應用近十年中，顯微成像技術得到了飛躍的發展，填補光學顯微鏡（~200 nm）到電子顯微鏡（~0.1 nm）分辨率缺口，打破光學衍射極限的超高分辨率顯微鏡也越來越趨于成熟化。其中，德國馬普研究所的Stefan Hell教授憑借其研發的受激發射
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（一）
如何免除活細胞標記中的清洗（washout）步驟？SNAP-tag等標記方法為活細胞顯微成像帶來了革命性的變化，也因此被Nature雜志評為2004年最熱門的科研技術之一。但是傳統的SNAP-tag標記仍然有很大的缺陷。將帶有熒光探針的底物BG加入細胞后需要多次清洗細胞，才能將未結合的BG去除從而消
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（二）
圖5.EGFR在細胞中轉運的實時記錄。（a）示意圖，用于解釋如何利用FAPL探針來實時追蹤EGFR相關的細胞膜轉運過程。（b）COS7細胞中表達的EGFR用DRBG-488標記（綠色），溶酶體用lysosometracker（紅色）標記。（c）對表達SNAP-EGFR–CFP的MDCK細胞進行共聚焦
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（四）
熒光顯微鏡在研究活細胞中蛋白質分子的定位、相互作用及動力學等生命活動中起著不可或缺的作用。將熒光蛋白如綠色熒光蛋白和目的蛋白融合表達，然后利用熒光蛋白發出的特異性熒光來觀察和追蹤目的蛋白分子在科學研究中得到了廣泛的應用。但是熒光蛋白具有量子產量低、成熟速度受限、光譜容易受到環境因素影響及容易形成聚集
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（三）
細胞骨架如微管、微絲等一直是生命科學研究的重點。近期Johnsson等科學家將SiR直接標記于與微管和微絲分別特異性結合的小分子docetaxel和jasplakinolide，即形成SiR-tubulin和SiR-actin，實現了在不對細胞或組織進行任何轉染或基因組修飾的條件下直接進行活細胞成像
活細胞成像要求在成像過程中的知識
活細胞成像要求在成像過程中始終保持鏡臺上細胞的存活.應注愈使用zui小強度的激光，因為激光束造成的光損傷在多次掃描時可以錄加起來。抗氧化劑（如維生素C）加人培養液可減少來自激發的熒光分子產生的權.因為級可引起自由基形成并殺死細胞。對于一些熒光標記實驗.需評價光基礴對標本的影響.一般應進行成像后組織活
突破！研究團隊攻克熒光蛋白和染料在活細胞成像中的局限
近日，我所生物技術研究部分子探針與熒光成像研究組（1818組）徐兆超研究員、苗露副研究員團隊通過調控熒光蛋白與熒光染料之間的熒光共振能量轉移（Fluorescence resonance energy transfer，FRET），提高了熒光蛋白的光穩定性，并基于化學遺傳學策略賦予外源熒光染料遺傳編
活細胞成像系統在實際應用上有哪些功能？
活細胞成像系統是用于活細胞長時間、高清晰度、高靈敏度成像的設備。當用活細胞染料標記細胞內特定生物大分子，或者使用熒光蛋白標記體內特定蛋白時，使用該熒光染料或者熒光分子特定的激發光線激發，通過探測其特用的發射光線即可探測到該生物大分子。活細胞成像系統一方面控制細胞生存的外部環境，提供合適的溫度、適度
LED光源在熒光顯微成像中的應用簡述（一）
熒光顯微鏡中的LED光源具有便利與綠色環保的優點。這些LED能夠保持研究成分的有效性，特別是對成像和敏感樣品的保存。LED技術在我們的生活中發揮越來越重要的作用。在過去的50年里，該技術的應用已從簡單的電子產品指示燈擴展到替代白熾燈以節約大量能源。LED具有高強度、使用壽命長、可控制性及光譜輸出穩定
LED光源在熒光顯微成像中的應用簡述（二）
目前可以使用的LED芯片的功率與100W汞燈泡中等離子弧產生的輻射相差甚遠。燈泡能夠發射極寬譜段范圍的能量，但在給定的約20nm的譜段范圍內，LED更有優勢甚至超過了汞燈泡在360nm至800nm的大部分區域。LED的過度使用在熒光應用領域非常常見，這使熱量管理變得極為重要。冷卻技術包括珀爾帖（Pe
熒光標記基團的選擇及其在熒光定量PCR中的應用
PCR實驗室產品選擇指南 熒光 ?基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波，可以作為抗體等分子的標記物，實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光素”)的化
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術，該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針，具有可實時監測，高靈敏性，高特異性和高精確性的特點，極大地克服了原有PCR儀技術的不足，擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr；熒光；基因Flu
萘酰亞胺小分子熒光探針在細胞器成像中的應用
小分子熒光探針憑借其非侵入性、高選擇性和實時原位成像的能力，已經為大量的研究提供了技術支持，并極大地促進了細胞生物學、生物化學等領域的研究。作為一種常見的熒光基團，萘酰亞胺（Naphthalimide）被廣泛地應用在細胞器成像和示蹤等領域。 2021年6月3日，美國杜克大學鄭徐軍博士和中國科學
新型高分辨成像技術可觀察活細胞中酶和細胞傳導活性
分析測試百科網訊 一種新型的熒光生物傳感器可以觀察到在活細胞中高度特異性位置發生的酶和細胞信號傳導活性。 這些活動的發生通常在100納米大小，觀察它們目前是困難或不可能的。例如，可見光的衍射極限會阻止光學顯微鏡在小于200至250nm的位置捕獲動態事件。 超分辨率技術如SOFI（stocha
全自動活細胞實時熒光成像系統概述
全自動活細胞實時熒光成像系統是一種用于生物學領域的分析儀器，于2018年12月11日啟用。 1、顯微鏡采用全封閉箱式設計，并可通過機身TFT觸摸屏進行自動進樣，調用預設實驗程序自動進行成像實驗。 2、全自動成像方式，無需任何手動調節即可實現普通明場、斜照明和高襯度浮雕效果PGC成像，并可在熒
顯微成像技術在干細胞研究中的應用
干細胞涉及到個體發育、器官移植、延緩衰老、癌癥治療等方方面面。單個的干細胞是如何分裂、分化成新的細胞、組織或器官呢？在成體中，干細胞又是如何完成細胞修復更新的使命呢？在下面的文章中，我們將介紹如何借助共聚焦、雙光子等顯微成像分析技術一一解決在干細胞研究中的這些問題。激光共聚焦掃描顯微鏡可以精確可控的
Celigo成像分析技術在細胞增殖中的應用
細胞增殖是腫瘤研究的必備實驗之一。最簡單直接的檢測細胞增殖的方法就是在不同時間點進行細胞計數，但是在96孔板甚至384孔板的實驗設置下，這無疑是難以操作的。于是，研究者們更傾向于用間接方法研究細胞增殖，比如基于線粒體內脫氫酶還原能力的MTT, MTS, CCK-8法，還有基于胞內ATP水平的Ce
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用（二）
3 在醫學中的應用3．1 病原體測定PCR技術的問世使病原體檢測能夠快速、方便地進行。由于PCR技術假陽性率太高，只要有微量病原體存在就可得到陽性結果，這并不能作為診斷依據， 只有當一定數量的病原體存在時才有臨床意義。因此，對模板準確定量顯得特別重要，應用熒光技術PCR儀就能夠快速、準確地得到結果。
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用（一）
?1 概述??????? 熒光定量多聚酶鏈式反應是一種新的核酸定量技術。該技術將熒光能量傳遞技術（fluorescence resonance energy transfer，FRET）應用于常規多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR儀中，從而進行定量檢測。FRE
CIK/DCCIK及其在細胞治療上的應用（五）
5. 高效CIK血樣本采集注意事項 （一）采血前，患者可以飲溫開水、低脂清淡飲食； （二）采血前，不可以進行任何輸液治療； （三）采血前1天，患者不可以進行可能損傷、破壞淋巴細胞的治療和檢查項目，如放療、化療、核醫學檢查等； （四）連續兩個療程治療時，取血和回輸細胞在時間上會有交叉，取血必須在細胞回
PNAS：新型熒光cAMP指示器有助于神經元活細胞成像
環磷酸腺苷(cAMP)是一種胞內信使分子，負責包括神經元在內的許多細胞的功能，促進軸突的生長，維持神經元間的通信。cAMP的分子途徑已得到充分研究，已知它在調節突觸功能中發揮重要作用;然而，能夠精確監測其細胞內活動的指標還有待開發。現在,Naoto Saitoh帶領的研究團隊通過開發一種新型綠色熒光
量子點活細胞成像應用的實驗方案
量子點（Quantum dot, QD）是一種新型熒光納米材料，又稱半導體納米晶，呈近似球形，三維尺寸在2-10nm，具有明顯的量子效應，其物理、光學、電學特性優于傳統有機熒光染料，是新一代熒光標記探針的優質選擇。Chan等將量子點與傳統有機熒光染料進行了光學特性的比較，發現量子點的熒光亮度是傳統熒
徠卡超高分辨顯微技術病毒學相關研究應用（二）
04第四個應用實例，是對病毒基因組復制的觀察。標題為：利用STED超高分辨顯微鏡觀察復制的HSV-1病毒【4】。值得一提的是，本文由中科院昆明動物所周巨民老師課題組與徠卡公司合作完成。病毒基因組復制是單純皰疹病毒 1 (HSV-1) 溶解感染周期的重要事件。目前由于檢測和觀察方法的局限，病毒復制
激光全息成像分析系統在腫瘤新型藥物研究中的應用
前言：目前，隨著新型智能制劑的發展，利用天然生物材料將化學藥物與RNA干擾過程相結合。不僅增加了生物識別的敏感性，而且能提高生物藥物的活性。聚合物膠束作為一種新型的藥物載體，膠束內核能夠顯著增加難溶性藥物的溶解度，降低毒副作用，親水外殼保護藥物免受生理環境的破壞；具有主動和被動靶向作用，改變藥物的體
俄歇電子能譜原理介紹及其在元素成像中的應用
海南大學周陽副教授 海南大學周陽副教授發表主題為“俄歇電子能譜（Auger electron spectroscopy）原理介紹及其在元素成像中的應用”的精彩報告。俄歇電子能譜（AES）是一種表面科學和材料科學的分析技術，可用于獲得元素種類，含量和分布等信息。其原理是：當原子內層電子被激發
葉綠素熒光成像系統在昆蟲作物互作研究中的應用
近日，北京易科泰生態技術有限公司為中科院動物研究所安裝了一套FluorCam封閉式葉綠素熒光成像系統。該系統可用于研究植物的光合結構和光合活動，其成像的功能能夠實現全部葉片和整株植物代謝狀態的可視化，解讀葉片光化學效率的異質性。中科院動物所相關課題組將使用FluorCam葉綠素熒光成像系統和光合儀開
Celigo成像分析技術在細胞殺傷中的應用（一）
2018年的諾貝爾生理學或醫學獎授予了兩位免疫學家，分別是美國的James P Allison和日本的本庶佑教授，以表彰他們的原創發現推動了免疫學研究的進程，促使了癌癥治療領域革命性新藥物的面世。如今炙手可熱的PD-1， CAR-T，TCR-T技術等都要歸功于這一偉大發現及其臨床應用。如果你的工作也
Celigo成像分析技術在細胞殺傷中的應用（二）
這么好的方法當然需要一個強大的檢測儀器來支撐 – Celigo成像細胞定量分析儀：● 明場+四色熒光● 全孔成像，圖片清晰，適用于6-1536孔板● 定量分析全孔細胞數目● 軟件自帶流式設門分析功能● 高速同步成像和分析，15分鐘內完成一塊96孔板的免疫殺傷檢測現在小編就以NK細胞的ADCC（抗體依
STED超高分辨成像
?STED超高分辨成像采用受激發損耗（STED）技術，實現XY最小分辨率≤50nm，Z軸最小分辨率≤130nm。固態長壽命損耗激光器：592nm，660nm，775nm，實現不同染料的超高分辨成像，可見光全光譜覆蓋。STED WHITE 油浸物鏡 (HC PL APO 100x/1.40 OIL)，
超分辨率顯微鏡的各種不同技術對比
對于傳統的光學顯微鏡，光的衍射讓成像分辨率限制在大約250 nm。如今，超分辨率技術可以將此提高10倍以上。這種技術主要通過三種方法實現：單分子定位顯微鏡，包括光敏定位顯微鏡（PALM）和隨機光學重建顯微鏡（STORM）；結構照明顯微鏡（SIM）；以及受激發射損耗顯微鏡（STED）。