NK細胞培養存在的問題與解決方法
自然殺傷細胞(natural killer cell，NK)是機體重要的免疫細胞，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生。目前，NK細胞培養存在兩種培養方式：1、滋養層細胞（人腫瘤細胞，即人白血病K562細胞）培養方式。首先獲得具有不分裂不增殖但仍保持代謝活性的滋養層細胞。該細胞通過基因工程技術進行改造，再經過鈷60輻照，細胞膜表面穩定表達多種細胞因子，在多種細胞因子協同作用下，外周血單個核細胞中的自然殺傷細胞得到定向激活和擴增。該種培養方式的價格相對便宜，僅有3000元左右。從培養結果來看，細胞收獲量可達到20億/L的水平，NK表型陽性率達到80%-90%左右。2、純因子細胞培養方式。顧名思義就是使用相應的細胞因子來刺激單個核細胞，向NK細胞方向誘導，并配合相應的細胞培養基，使NK細胞大量增殖。純因子細胞培養技術以其安全性高而著稱，其原因在于所使用的細胞因子，都是體內環境原......閱讀全文
NK細胞培養與優化
??因NK細胞是一種比較難培養的細胞。培養過程會涉及很多問題，如：細胞接種密度如何？NK細胞有哪些特性？NK細胞具有哪些形態特征？......? ? ? ?使用的NK細胞培養套裝為無飼養層細胞體外擴增技術，以外周血單個核細胞（PBMC）為起始種子細胞，結合多種細胞因子的誘導和刺激，實現NK細胞體外特
NK細胞體外培養方法之純因子培養
關于NK細胞培養，也許您還在疑惑為什么細胞培養到后期生長緩慢？為什么細胞擴增狀態不理想？培養過程中補液標準判斷的依據是什么？為了解決實驗中遇到的種種問題，減少摸索的苦惱，我們特地為大家精心準備了NK試劑盒教學視頻以及實驗操作要點等，有了這篇干貨，相信大家就能輕松搞定實驗中的疑難雜癥。視頻已備好，快識
培養基NK細胞的制備研究
?NK細胞的制備方法，即通過聯合細胞因子和飼養細胞的刺激作用，提高NK細胞的增殖速度和純度。本發明的主要特點是：NCR3LG1和m?IL-15同時轉染到K562細胞，m?IL-15可以調節NK細胞的活化和增殖，而NCR3LG1作為NK細胞表面主要的活化受體之一NKp30的配體，可以有效的刺激NK細胞
NK細胞滋養層培養技術，前路何在？
NK細胞培養吸引了眾多目光。培養技術一直有兩種：一種是便宜的滋養層培養技術，一種是昂貴的純因子培養技術。兩種培養技術各有粉絲，原本相安無事，但在生物谷舉辦的2017（第八屆）細胞治療國際研討會上，北京一家專注于無血清培養基研發與生產的公司打破了其中的平衡，推出了3000+的純因子培養方案，
NK細胞培養一直存在兩種培養方式。
一種是滋養層細胞培養方式，首先獲得具有不分裂不增殖但仍保持代謝活性的滋養層細胞。該細胞通過基因工程技術進行改造，再經過鈷60輻照，細胞膜表面穩定表達多種細胞因子，在多種細胞因子協同作用下，外周血單個核細胞中的自然殺傷細胞得到定向激活和擴增，該種培養方式的價格相對便宜，僅有3000元左右。從培養結果來
NK細胞培養存在的問題與解決方法
自然殺傷細胞(natural killer cell，NK)是機體重要的免疫細胞，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生。目前，NK細胞培養存在兩種培養方式：1、滋養層細胞（人腫瘤細胞，即人白血病K562細胞）培養方式。首先獲得具有不分裂不增殖但
NK細胞的來源
?? NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般變人直接從骨髓中衍生，其安育成熟信賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC5-10%，淋巴結和骨髓中也
關于NK細胞活性測定(NK)的基本介紹
自然殺傷(NK)細胞是一群異質性多功能的免疫細胞，是與特異性免疫應答無關的自然毒殺傷細胞。它對體內多種細胞，特別是T、B淋巴細胞有調節作用。它所介導的裂解細胞作用不受主要組織相溶性復合體的限制。自然殺傷細胞不僅對癌細胞，對病毒、胞內寄生菌和老化變異細胞也具有極強的清除作用。NK細胞起殺傷作用不需
采用試劑盒因子法體外培養NK細胞的方法
Nk細胞又稱自然殺傷細胞，是人體內抗癌活性最強的免疫細胞之一，它在骨髓中發育成熟后，主要存在于外周血、肝臟、腹膜腔和胎盤中，在遇到腫瘤病變細胞時就會把它們殺死，同時也會刺激身體產生抗腫瘤的免疫反應，所以被醫學界稱為“抗癌的第一道防線”。NK細胞主要分布于外周血，占外周血淋巴細胞總數的5-10％，無需
簡述NK細胞活性測定(NK)的檢查過程
一、NK細胞活性測定(NK)的檢查過程： 取傳代后24h生長良好的YAC-1細胞(存活率＞95%)按1×106/mL YAC-1細胞懸液加3H-TdR 10uCi進行標記，于37℃、5%CO2培養箱中培養2h，每30min振蕩1次。標記后的細胞用培養液洗滌3次，重懸于培養液中，使細胞濃度為1×
簡述NK細胞活性測定(NK)的臨床意義
一、NK細胞活性測定(NK)的臨床意義： 異常結果：受試樣品組的NK細胞活性顯著高于對照組的NK細胞活性，可判定該項試驗結果陽性。活性升高，常見于病毒感染的早期，Down綜合征，接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強劑治療患者。活性降低，常見于惡性腫瘤、重癥聯合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制
免疫學實驗NK細胞活性測定（NK）介紹
NK細胞活性測定（NK）介紹： 自然殺傷(NK)細胞是一群異質性多功能的免疫細胞，是與特異性免疫應答無關的自然毒殺傷細胞。它對體內多種細胞，特別是T、B淋巴細胞有調節作用。它所介導的裂解細胞作用不受主要組織相溶性復合體的限制。自然殺傷細胞不僅對癌細胞，對病毒、胞內寄生菌和老化變異細胞也具有極強
為什么人們不愿再用滋養層細胞的形式培養NK細胞？
NK細胞培養一直存在兩種培養方式。一種是滋養層細胞培養方式，首先獲得具有不分裂不增殖但仍保持代謝活性的滋養層細胞。該細胞通過基因工程技術進行改造，再經過鈷60輻照，細胞膜表面穩定表達多種細胞因子，在多種細胞因子協同作用下，外周血單個核細胞中的自然殺傷細胞得到定向激活和擴增，該種培養方式的價格相對便宜
NK細胞有什么作用？
NK細胞是天然免疫系統中一類十分重要的淋巴細胞，由于其殺傷作用是自發的，無需有抗體存在或預先加以致敏，因此將其命名為自然殺傷細胞。它通過其細胞毒活性和產生淋巴因子，在機體抗感染、抗腫瘤、免疫調節和造血調控等方面發揮重要的免疫功能。 NK細胞和殺傷T細胞在清除病原生物感染靶細胞方面有著相似的功能
NK細胞計數的簡介
自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）具有本身的形態、表型及功能特征。NK細胞的確切來源還不十分清楚，一般認為直接從骨髓中衍生，其發育成熟依賴于骨髓的微環境。它分布廣泛，在外周血及脾臟中較多，淋巴結和骨髓次之。NK細胞絕大部分為大顆粒淋巴細胞，免疫表型為 CD3+、CD4+
NK細胞活性測定實驗
實驗方法原理 用放射性核素標記靶細胞，當靶細胞受到破壞時，放射性核素被釋放出來，通過測定釋放或殘留在未被破壞細胞內的放射性核素放射活性，即可計算和推測殺傷細胞的細胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本實驗采用51Cr釋放法檢測人NK細胞活性。實驗材料 靶細胞試劑、試
癌癥中的NK細胞
NK細胞在防御實體瘤及其擴散方面發揮著核心作用。研究表明，外周血中的NK活性與總體癌癥風險的降低有關，腫瘤浸潤性NK細胞是多種惡性腫瘤的陽性預后標志物。盡管NK細胞對于浸潤腫瘤組織和消除實體瘤的能力較差，但NK細胞可能位于間質外圍，募集樹突狀細胞，這些細胞隨后遷移到次級淋巴器官，在那里它們加速反應性
自然殺傷細胞NK細胞的細胞功能
自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早，在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞（包括部分細胞系）、病毒
自然殺傷細胞NK細胞的細胞表型
與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈 （P75,CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一種穩定表達在
關于NK細胞的細胞表型介紹
與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈 （P75,CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。 一種穩
臨床化學檢查方法介紹NK細胞活性測定（NK）介紹
NK細胞活性測定（NK）介紹： 自然殺傷(NK)細胞是一群異質性多功能的免疫細胞，是與特異性免疫應答無關的自然毒殺傷細胞。它對體內多種細胞，特別是T、B淋巴細胞有調節作用。它所介導的裂解細胞作用不受主要組織相溶性復合體的限制。自然殺傷細胞不僅對癌細胞，對病毒、胞內寄生菌和老化變異細胞也具有極強的清
對培養的NK細胞不滿意，是培養基的問題，還是試劑盒...
對培養的NK細胞不滿意，是培養基的問題，還是試劑盒的問題？關于NK細胞培養的問題，不能只認為培養基不好或試劑盒不好，很多客戶在培養過程中遇到接種密度的問題、補液程序的問題、血漿問題以及樣本的問題，所以影響NK細胞培養效果的因素非常之多，那么在細胞培養不太滿意的情況下，我們應該按以下原則進行排查。1、
自然殺傷細胞NK的功能
? （一)自然殺傷活性 由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早，在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞（包括部分細
NK細胞活性測定：LDH法
實驗方法原理活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下，LDH不能透過細胞膜，當細胞受到NK細胞的殺傷后，LDH釋放到細胞外。LDH 可使乳酸鋰脫氫，進而使NAD還原成NADH，后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT 接受H＋被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上
NK細胞活性測定：LDH法
實驗概要活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下，LDH不能透過細胞膜，當細胞受到NK細胞的殺傷后，LDH釋放到細胞外。LDH ?可使乳酸鋰脫氫，進而使NAD還原成NADH，后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT ?接受H＋被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上
LDH法測定NK細胞活性
一、原理活細胞的胞漿內含有LDH。正常情況下，LDH不能透過細胞膜，當細胞受到NK細胞的殺傷后，LDH釋放到細胞外。LDH 可使乳酸鋰脫氫，進而使NAD還原成NADH，后者再經遞氫體吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT 接受H＋被還原成紫紅色甲月贊類化合物。在酶標儀上用4
關于NK細胞的來源介紹
NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般認為直接從骨髓中衍生，其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC 5～10%，淋巴結和骨髓中也
自然殺傷細胞NK的表型
?? 與T細胞、B細胞相比，NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈（P75，CD122)，CD11b/CD18陽性。目前常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1（見表7
自然殺傷細胞NK的活化
?? NK細胞可通過多種途徑被活化，包括膜表面的CD2、CD3分子和多種細胞因子。 1.通過CD3分子的ζ鏈 NK細胞不表達TCR/CD3復合物，但部分NK細胞表達CD3ζ鏈，當用CD16抗體刺激NK細胞活化時，ζ鏈發生酪氨酸磷酸化，引起胞漿內Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進細胞因子合成和A
NK細胞活性檢測實驗步驟
細胞毒檢測技術包括補體依賴細胞毒試驗、NK細胞介導的細胞毒試驗和特異性CTL活性檢測，常用的實驗技術有后兩種。NK細胞（natural killer cell）是在天然免疫系統發揮主要作用的效應細胞，可直接殺傷病毒感染的靶細胞和某些腫瘤細胞。而細胞毒性T淋巴細胞（cytotoxic T lymp