固相pH梯度等電聚焦電泳色譜儀比載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳色譜儀具有更高的分辨率,更大的上樣量,其分辨率可達0.001pH,是目前分辨率zui高的電泳儀之一。一、工作原理:蛋白質分子按照自己的pI位置在固相pH梯度中遷移,達到自己的等電點時停止遷移。二、固相pH梯度的介質:固相pH梯度(IPG)的介質是Immobilines試劑,是一些具有弱酸或弱堿性質的丙烯酰胺衍生物,聚合行為與丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺相似。三、固相pH梯度的形成:Immobilines試劑的分子式為CH2 = CH-CO-NH-R,其中R代表羧基或第三氨基,每個分子都有一個單一的酸性或堿性緩沖基團與丙烯酰胺單連。分子一端的雙鍵可在聚合過程中共價鍵合鑲嵌到聚丙烯酰胺介質中,是固相的,即使是在電場中也不會漂移。分子另一端的R基團為弱酸或弱堿性的緩沖基團,利用緩沖體系滴定終點附近一段pH范圍,可形成近似線性分布的pH = 3~10的緩沖體系。通過這種方式形......閱讀全文
(一)醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣 品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術的