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【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術,并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題.【實驗原理】DNA 分子有線狀的,還有一些非線狀的,如復制叉和重組DNA 結構.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/中性雙向凝膠電泳和中性/堿性雙向凝膠電泳技術.它們的工作原理如下：中性/中性雙向凝膠電泳：非線狀的DNA 分子在瓊脂糖凝膠中的泳動行為和線狀DNA 分子相比是不規則的.并且這種行為隨著瓊脂糖濃度或電壓增加而加劇.而這正是中性/中性雙向凝膠電泳的工作原理：在第一向中,樣品在瓊脂糖凝膠中以低瓊脂 糖濃度、低電壓的條件進行電泳,則DNA 分子主要根據其分子量大小被分離.在第二向中,則采用高濃度瓊脂糖凝膠和較高電壓條件,DNA 分子的分離則主要根據其形狀.中性/堿性雙向凝膠電泳：此方法適合用來分析DNA 復制中間體.這些中間體......閱讀全文
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術，并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題。【實驗原理】DNA 分子有線狀的，還有一些非線狀的，如復制叉和重組DNA 結構。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/中性
【概述】帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年，由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早發現。
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測，對于不同的目的，應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性，所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
電泳儀的這些常識你知道嗎？*節 電泳原理第二節 常用電泳方法第三節 常用電泳儀的基本結構及技術指標 第四節 常用電泳儀簡介第五節 毛細管電泳第六節 電泳儀的
ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 實驗方法原理 雙向電泳（two-dime
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒尿素去污劑儀器、耗材
試劑、試劑盒 尿素去污劑儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠實驗步驟 一、第一向1. 等電聚焦凝膠的準備雙向電泳通常用聚丙烯酰胺凝膠作介質，但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非離子或兩性離子去污劑。為了增加樣品的可溶性，可加 0.5% CHAPS。在第一向電泳中，最重要的是用載體兩性電解
試劑、試劑盒尿素去污劑還原劑載體兩性電解質儀器、耗材IPG 凝膠實驗步驟一、第一向1. 固相 pH 梯度凝膠或凝膠條的準備固相 pH 梯度凝膠的灌注及聚合方法請參閱 固相 pH 梯度等電聚焦 有關章節，如需要可切成 3~5 mm 寬的膠條在 -20℃ 保存一年。為避免繁瑣和復雜的灌膠和切膠條程序和保
一、 實驗目的通過本實驗學習PCR反應的基本原理，掌握PCR的基本操作技術以及瓊脂糖凝膠電泳技術。二、 實驗原理PCR用于擴增位于兩端已知序列之間的DNA區段，即通過引物延伸而進行的重復雙向DNA合成。基本原理及過程如下：PCR循環過程中有三種不同的事件發生：（1）模板變性；（2）引物退火；（3）熱
陳華 ，劉樹滔 ，溫騰 ，原山武 ，久保田英博 ，饒平凡(1．福州大學生物工程研究所，福建福州350002；2．日本ATI''''O公司技術開發部，東京113—8425)摘要：對第一向為載體兩性電解質pH梯度等電聚焦雙向電泳(Iso—DALT)中若干影響分離效果的實驗
本方案使用核酸酶 BAL31(從海洋細菌 Alteromonas espejiana BAL31 中純化）在克隆的 DNA 片段中產生單向或雙向缺失。BAL31 是一個復合酶，它以非同步的方式消化雙鏈靶 DNA。因此與諸如外切核酸酶Ⅲ這類的加工酶相比，BAL31 產生的缺失更具有不均一性（請見方案
試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸放射性化合物酚儀器、耗材 熱循環儀水浴箱瓊脂糖凝膠電泳所需的試劑與設備實驗步驟 第1階段：RNA和DNA的分離一次雙向消減，需要總量為2ug的基因組DNA或cDNA。大多數分離RNA和基因組DNA的方法都適用于本實驗（Sambrooketal
試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑 酶和酶緩沖液 核酸和寡核苷酸 放射性化合物 酚
二、透析和超濾1.透析（Dialysis）：就是利用蛋白質分子不能通過半透膜（Semipermeable membrane）而小分子可以自由透過的性質，使蛋白質與小分子物質分開。作用：脫鹽、無機離子和小分子物質等。透析膜：動物膜、羊皮紙、火棉膠、賽璐玢或其他材料等。2.超濾（ultrafiltrat
一次雙向消減，需要總量為 2ug 的基因組 DNA 或 cDNA。大多數分離 RNA 和基因組DNA 的方法都適用于本實驗（Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試
實驗方法原理在 SDS 電泳中，由于 SDS 和還原試劑使蛋白質變性而失去生物活性，所以電泳后的檢測方法不如常規聚丙烯酰胺凝膠電泳和等電聚焦電泳多，一般為考馬斯亮藍染色和銀染色，其次為熒光方法和轉移后檢測。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液磷酸緩沖液貯液咪唑緩沖液貯液過硫酸銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯
2．2 還原樣品中巰基的影響圖2、圖3分別為肝細胞樣品和牛奶樣品加還原劑后加與不加巰基保護劑的電泳結果比較．與圖2(a)、圖2(b)比較，圖2(c)斑點數量明顯減少，還出現一些假斑點．與圖3(a)比較，圖3(b)點2和3消失，也出現4和5兩個假斑點．斑點減少是因為加還原劑打開二硫鍵后形成的巰基若未及
雙向電泳操作步驟 第一向凝膠 第二向凝膠 組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備 實驗方法原理
五 對流免疫電泳 【 實驗原理 】 當抗原和抗體在瓊脂介質中電泳時 ，抗體的 PI 比較高，在適當的 pH 值下，抗體帶正電荷而抗原帶負電荷，故在電場中抗體向陰極方向移動而抗原向陽極運動，直至相遇后形成沉淀線，其原理與雙向免疫擴散相同，但具有方法簡便，快速及一次電泳可以檢測多個樣品等特
實驗概要本實驗介紹了雙向電泳的詳細實驗過程。實驗原理2-DE的第一向電泳等電聚焦是基于等電點不同而將蛋白粗步分離，第二向SDS-PAGE是基于蛋白質分子量不同，而將一向分離后的蛋白進一步分離。這樣就可以得到蛋白質等電點和分子量的信息。主要試劑1. BSA2. Bradford液3. DTT4. 0.
A． 實驗過程一 實驗原理： 2-DE的第一向電泳等電聚焦是基于等電點不同而將蛋白粗步分離,第二向SDS-PAGE是基于蛋白質分子量不同,而將一向分離后的蛋白進一步分離.這樣就可以得到蛋白質等電點和分子量的信息.二 實驗步驟：1. 樣品的溶解 取純
三 雙向擴散 【 實驗原理 】 雙向免疫擴散是指抗原和抗體在同一凝膠內部擴散，彼此相遇后形成特 異性的沉淀線。該反應是將抗原和抗體加入同一凝膠中兩個相隔一定間距的小孔內，使兩者進行相互擴散。當抗原和抗體濃度之比相適宜時，彼此相遇形成一白色弧型沉淀線。 【 實驗材料
三 雙向擴散 【 實驗原理 】 雙向免疫擴散是指抗原和抗體在同一凝膠內部擴散，彼此相遇后形成特 異性的沉淀線。該反應是將抗原和抗體加入同一凝膠中兩個相隔一定間距的小孔內，使兩者進行相互擴散。當抗原和抗體濃度之比相適宜時，彼此相遇形成一白色弧型沉淀線。 【 實驗材料
實驗概要本實驗運用雙向電泳技術、計算機圖像分析與大規模數據處理技術以及質譜技術研究了。鈣調素調節的下游效應蛋白的表達模式和活性，通過鑒定這些蛋白、分析它們的表達模式以及它們依賴于Ca2 的與CaM的相互作用，將有助于我們了解鈣-鈣調素信號在時間和空間上的特異性，初步探討了細胞如何通過鈣-鈣調素信號響
實驗概要本實驗介紹了雙向電泳技術，先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到二維分布的蛋白質圖。實驗原理雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
實驗原理2-DE的第一向電泳等電聚焦是基于等電點不同而將蛋白粗步分離，第二向SDS-PAGE是基于蛋白質分子量不同，而將一向分離后的蛋白進一步分離。這樣就可以得到蛋白質等電點和分子量的信息。主要試劑1. BSA2. Bradford液3. DTT 4. 0.05% 的溴酚蘭 5.
電泳儀：電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。電泳分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類：1、自由界面電泳不需支持物，如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。2、區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支
實驗概要本文介紹了雙向電泳原理及操作步驟（第一向等電聚焦和第二向SDS-PAGE電泳）。實驗原理二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術結合了等電聚焦技術（根據蛋白質等電點進行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（根據蛋白質的大小進行分離）。這兩項技術結合形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。通
電泳儀：電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。電泳分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類：1、自由界面電泳不需支持物，如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。2、區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持