同源重組技術原理
同源重組技術原理：基因敲除鼠技術是上世紀80年代中后期基于DNA同源重組的原理發展起來的，Capecchi和Smithies在1987年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），這一技術稱為"基因打靶"（gene targeting）或"基因敲除"（gene knockout），利用這種ES的顯微注射就可以制作出基因敲出小鼠（KO Mice: knockout mice）;由于這一工作，Capecchi和Smithies于2007年與Evans分享了諾貝爾醫學獎。同源重組（homologous recombination）定義：是指發生在姐妹染色單體（sister chromatin) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。在基因敲除小鼠制作......閱讀全文
同源重組技術原理
同源重組技術原理：基因敲除鼠技術是上世紀80年代中后期基于DNA同源重組的原理發展起來的，Capecchi和Smithies在1987年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），這一技術稱為
同源重組法技術介紹
同源重組法：同源重組（homologous recombination）是將外源基因定位導入受體細胞的染色體上，在該座位因有同源序列，通過單一或雙交換，新基因片段替換有缺陷的片段，達到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁組裝一Neo基因，則在同源重組后，因有Neo基因，可在含有新霉素（neomyci
同源重組的原理是什么？
同源重組（Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體（sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化，如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等
非同源重組的概念
非同源重組指的是發生在不含同源序列的DNA序列間的重組。這可能導致染色體易位，有時會導致癌癥。
基于胚胎干細胞的同源重組技術??介紹
基因改造（包括敲除和敲進）小鼠已經成為現代生命科學基礎研究和藥物研發領域不可或缺的實驗動物模型，在生命科學、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用。今天呢，就給大家介紹最傳統最穩定的基因改造技術：基于胚胎干細胞的同源重組技術。Capecchi和Smithies早在在1989年根據同源重組（homo
同源重組的概念和過程
同源重組(Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體(non-sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化,如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
關于同源重組的基本介紹
同源重組（ homologous recombination）是指發生在兩段同源序列之間的DNA片段交換。兩段同源序列既可以完全相同，也可以存在差異，既可以位于兩個DNA分子上，也可以位于一個DNA分子中。真核生物的同源染色體交換及姐妹染色單體交換、細菌的轉導和轉化、噬菌體的重組都屬于同源重組。
DNA－同源重組的關鍵分子機制
蛋白質與植物基因研究國家重點實驗室研究團隊揭示 DNA 同源重組的關鍵分子機制 作為三大DNA代謝途徑（DNA 復制、重組、損傷修復）之一，DNA同源重組（Homologous Recombination）是生命體的基本生物事件。它在細胞生長、減數分裂、配子形成、物種進化、DNA雙鏈斷裂修復、
關于同源重組的Holliday模型介紹
Holliday于1964年提m Holliday模型，將同源重組分為四個階段。 1．同源序列配對。 2．形成Holliday結構，即兩段同源序列的單股同源DNA的同一磷酸二酯鍵被水解，同源末端交換，連接，形成Holliday結構（HoIJiday structure，又稱Holliday連
關于同源重組的基本內容介紹
我們可以看到，同源重組一般都在染色體內仍按DNA序列的原來排列次序。但是在所謂位點特異性重組（site-specific recombination）中，DNA節段的相對位置發生了移動，從而得到不同的結果─DNA序列發生重排。位點特異性重組不依賴于DNA順序的同源性（雖然亦可有很短的同源序列），
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不在自
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
【干貨】拯救你受傷的DNA-NHEJ與HR生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極
RNA為模板－首次實現植物同源重組修復
中國農業科學院作物科學研究所作物轉基因技術與應用創新團隊與美國加州大學圣地亞哥分校合作,使用核糖核苷酸（RNA）作為同源重組修復（HDR）的模板，成功獲得后代無轉基因成分的抗ALS抑制劑類除草劑水稻植株。這是在植物中首次成功利用RNA作為脫氧核糖核酸（DNA）同源重組修復模板。相關研究論文北京時
關于同源重組的雙股斷裂修復模型介紹
雙股斷裂修復模型（ double-strand break repaii。mnodel）也將同源重組分為四個階段。 1、同源序列配對。 2、形成3’端突出結構，即配對同源序列之一的DNA雙鏈水解，并由5’外切核酸酶水解，形成3'端突出結構（即3’黏端）（①~②） 3、形成Holli
Bdf1通過與RPA促進同源重組修復原理揭曉
表觀遺傳調控DNA同源重組機制獲揭示 Bdf1偶聯H4乙酰化修飾和DNA重組修復過程 武漢大學供圖 近日，《尖端科學》在線發表了武漢大學生命科學學院遺傳學系、細胞穩態湖北省重點實驗室教授陳學峰課題組的最新研究成果。該研究揭示了酵母溴結構域家族蛋白Bdf1及其人類同源蛋白TAF1在促進DNA
遺傳發育所在同源重組機制研究中取得進展
減數分裂是維持生物體染色體數恒定，導致遺傳重組產生的基礎。減數分裂缺陷是導致不孕、不育和出生障礙的主要原因。絕大多數減數分裂基因在不同物種中有著高度保守的功能。HEI10基因最初在人類體細胞中分離，并證明有調控細胞周期的功能。在小鼠中的研究表明，HEI10基因的突變會導致減數分裂異常并最終導致不
通過自殺質粒同源重組構建細菌突變株
自殺性質粒載體：一般用于基因突變。將突變的目的基因克隆到自殺性質粒載體上，通過接合等使其進入宿主，由于在宿主菌中不存在復制基因啟始所需的復制蛋白（如Pi蛋白等），其無法復制，在外界選擇性壓力的作用下,自殺性質粒載體所攜帶的突變基因就與宿主染色體上的野生型發生基因發生二次同源重組，產生了帶有突變的突變
專訪張博：兩篇Nature子刊技術論文開創同源重組新方法
2011年在我們還不是十分熟悉它的名字的時候，它被評為了當年Nature Methods雜志的年度技術，2012年在這種技術已成功應用于人類體外培養細胞、酵母、線蟲、斑馬魚、植物、大小鼠等多個領域之后，它又入選了Science十大科學突破。這就是TALEN (Transcription
研究揭示植物調控同源重組修復的新機制
近日，華中農業大學生命科學技術學院教授嚴順平團隊在國際學術期刊PNAS在線發表成果。該研究不僅揭示了植物調控同源重組修復的新機制，也為利用同源重組修復機制提高植物基因打靶效率提供了新思路。同時，該研究還首次揭示了植物調控SOG1蛋白穩定性的機制，具有重要的科學意義。所有生物都需要把正確的遺傳信息（D
遺傳發育所解析同源重組保障的新機制
減數分裂過程中，性母細胞會主動產生DNA雙鏈斷裂（double-strand break, DSB），起始同源重組。同源重組正常發生在同源DNA之間，若在非同源DNA之間發生重組，則會導致后代基因組的紊亂。為此，生物體進化出了一套完善的體系，避免在序列相似的非同源DNA之間發生重組。但是目前對該
重組PCR技術的定義和原理介紹
1.定義：使兩個不相鄰的DNA片段重組在一起的PCR稱為重組PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年報道了由PCR擴增的兩個DNA片段通過重組合后再經延伸而制備出新的DNA分子。2. 其基本原理：將突變堿基，插入或缺失片段，或一種物質的幾個基因片段均設計在引物中，先分段對
生態中心在同源重組分子機制研究方面取得進展
近日，中國科學院生態環境研究中心研究員汪海林團隊在同源重組分子機制研究方面取得進展，相關研究成果以Flanking strand separation activity of RecA nucleoprotein filaments in DNA strand exchange reaction
DNA重組技術
連接反應的策略?? 可以采用幾種策略來進行外源ＤＮＡ片段和質粒載體的連接。對此，可依據外源ＤＮＡ片段未的性質，以及質粒載體與外源ＤＮＡ上限制酸切位點的性質來作出選擇。（一）外源ＤＮＡ片段未的性質帶有各種未的外源ＤＮＡ的克隆方法見下表：────────────────────────────────
從同源重組到堿基編輯器－看基因編輯72變
基因編輯尤其是“基因魔剪”CRISPR的新聞報道幾乎每天都能見到。僅在3月份，就有兩篇引起廣泛關注的重磅成果，其一，曾與張峰合作開創“基因魔剪”CRISPR的科技大牛劉如謙（David Liu），利用基因編輯技術研發出給細胞活動拍照的“細胞記錄儀”（CAMERA）。正如黑匣子能記錄事故發生時的
酶促重組等溫擴增技術（ERA）的反應原理
1、重組酶首先與上下游引物結合,尋找同源雙鏈DNA,一旦定位發生鏈交換2、同時SSB蛋白與親本鏈綁定,阻止其與其脫離的模板鏈發生相互作用3、DNA聚合酶從上下游引物的3”端啟動合成,形成兩條雙鏈DNA,如此循環重復擴增
遺傳發育所在水稻同源重組起始研究中取得新進展
同源染色體重組是減數分裂的重要事件，同源染色體間的物質交換促進遺傳多樣性的發生；重組產生的交叉結可以將同源染色體緊密連接在一起，保證同源染色體準確地和紡錘體連接并且確保同源染色體均等分向細胞兩極。減數分裂重組起始于DNA雙鏈斷裂(double-strand breaks, DSBs)的產生。目前
程祝寬研究組在同源重組研究中取得新進展
同源重組不僅是物種遺傳多樣性產生的源泉，它的產生還使得同源染色體在中期I以二價體形式排列在赤道板上，保證了后期I同源染色體間的正確分離。同源重組的位點在細胞學上又稱為交叉結。減數分裂過程中，交叉結的數目是被嚴格控制的，在性母細胞主動產生的眾多DNA雙鏈斷裂（double-strand break
遺傳發育所揭示減數分裂同源重組保障新機制
減數分裂過程中，性母細胞主動產生大量DNA雙鏈斷裂（double-strand break, DSB），以起始同源重組，形成交叉結，確保同源染色體均等分離。但是，同源重組并不是唯一DSB修復方式，其他非精確修復途徑如非同源末端連接（non-homologous end joining, NHEJ
我國學者使用RNA模板首次在植物中實現同源重組修復
近日，中國農業科學院作物科學研究所作物轉基因技術與應用創新團隊與美國加州大學圣地亞哥分校合作,使用RNA作為同源重組修復（HDR）的模板，并分別利用核酶自切割和具有RNA/DNA雙重切割能力的CRISPR/Cpf1基因編輯系統，成功獲得后代無轉基因成分的抗ALS抑制劑類除草劑水稻植株。該研究是在