核酸基因分子探針
從化學和生物學的意義上理解,探針是一種已知特異性的分子,它帶有合適的標記物供反應后檢測。探針和靶的相互反應如抗原-抗體、血凝素-碳水化合物、親合素-生物素、受體和配體,以及核酸與其互補核酸間的雜交等反應均屬此類。用核酸探針與待檢標本中核酸雜交,形成雜交體,再用呈色反應顯示。此方法用于疾病的診斷,稱為分子雜交基因診斷。此法開始用于遺傳性疾病的診斷如血紅蛋白病的診斷、先天性遺傳病的產前診斷。近來,已發展為診斷外源性病原體如病毒、細菌、原蟲等的方法;內源性病變基因研究如癌基因檢測、基因突變、基因缺失或變異引起的疾病的基因診斷;人類基因識別及其生理功能和衰老有關研究;在法醫檢測中有關性別鑒別和DNA指紋譜的鑒定。基因探針的研究引起了人們高度重視,在探針的制備技術上有重大突破。可將核酸分子探針檢測比喻為在柴草堆中去找一根針的神奇技術。據美國華爾街分析家預言:“在生物技術市場中,下一個突破和具有吸引力的是基因探針”。它的巨大的開發潛力和經濟......閱讀全文
核酸基因分子探針
從化學和生物學的意義上理解,探針是一種已知特異性的分子,它帶有合適的標記物供反應后檢測。探針和靶的相互反應如抗原-抗體、血凝素-碳水化合物、親合素-生物素、受體和配體,以及核酸與其互補核酸間的雜交等反應均屬此類。用核酸探針與待檢標本中核酸雜交,形成雜交體,再用呈色反應顯示。此方法用于疾病的診斷,稱為
核酸分子雜交探針的介紹
若雜交的目的是識別靶DNA中的特異核苷酸序列,這需要牽涉到另一項核酸操作的基本技術─探針(probe)的制備。探針是指帶有某些標記物(如放射性同位素32P,熒光物質異硫氰酸熒光素等)的特異性核酸序列片段。若我們設法使一個核酸序列帶上32P,那么它與靶序列互補形成的雜交雙鏈,就會帶有放射性。以適當
分子雜交技術的核酸探針標記法
核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA
核酸探針標記
實驗概要核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。實驗原理分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因
分子雜交基因探針的類型介紹
分子雜交基因探針根據標記方法不同可粗分為放射性探針和非放射性探針兩大類,根據探針的核酸性質不同又可分為DNA探針,RNA探針,cDNA探針,cRNA探針及寡核苷酸探針等幾類,DNA探針還有單鏈和雙鏈之分。
核糖核酸探針
核糖核酸探針1.室溫下,于1.5ml無菌微量離心管內依次加入:5μl???????????????5×轉錄緩沖液1μg???????????????模板DNA1.2μl?????????????10 mmol/L rATP(終濃度為480μmol/L)1.2μl?????????????10 mmo
核酸探針的分類
核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。
分子雜交基因所用DNA探針應用介紹
DNA探針是最常用的核酸探針,指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針。現已獲得DNA探針數量很多,有細菌、病毒、原蟲、真菌、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的,如細菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針
核酸分子雜交的概念、基本原理、探針及類型
主要內容:一、分子雜交的概念?二、分子雜交基本原理?(一)DNA變性:?1、DNA變性的方法2、增色效應3、溶解曲線4、融解溫度5、影響Tm值的因素。?(二)復性:退火一、分子雜交的概念:?分子雜交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的兩條核酸單鏈(DNA或RNA),
搖核酸的熒光探針
DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA,如為獲得單獨的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜
核酸探針標記的簡介
核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。
分子探針還是分子鐵錘?
這一期的《Nat. Chem. Biol.》有一篇題為“The promise and peril of chemical probes”的評論文章,二十幾個作者都是化學生物領頭人,其中包括Stuart Schreiber和Brian Shoichet這樣的大腕。文章回顧了早期分子探針的缺陷并對
基因探針基因探針的基本介紹
基因探針基因探針(probe)就是一段與目的基因或DNA互補的特異核苷酸序列,它可以包括整個基因,也可以僅僅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之轉錄而來的RNA。 1.探針的來源 DNA探針根據其來源有3種:一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe
新型蛋白質分子探針-核酸適配體-治療高度惡性肺腺癌
肺癌是發病率與死亡率最高的惡性腫瘤,而肺腺癌是肺癌的主要病理亞型。以EGFR抑制劑為代表的靶向治療及以PD1/PDL1靶向性抗體為代表的免疫治療極大地改善了肺腺癌病人的生存預后。然而,肺腺癌中惡性程度最高、以細胞快速增殖為主要特征的PP(Proximal-Proliferative)分子亞型肺腺
核酸探針標記的實驗過程
?實驗原理分子生物研究中,zui常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
核酸探針標記的實驗過程
實驗原理分子生物研究中,zui常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將
核酸探針標記的實驗過程
實驗原理分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將
核酸探針的定義和分類
RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。
核酸探針雜交檢測技術介紹
一、核酸探針預雜交預雜交的目的是用非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)將待測核酸分子中的非特異性位點封閉,以避免這些位點與探針的非特異性結合。雜交反應是使單鏈核酸探針與固定在膜上的待測核酸單鏈在一定溫度和條件下進行復性反應的過程。雜交
分子探針為乳腺癌基因描繪“顯像圖”
近日,黑龍江省哈爾濱醫科大學附屬第四醫院核醫學科趙長久、付鵬等人在國家自然科學基金支持下,成功建立了一種快速、準確、及時、無創性地評價乳腺癌小鼠雙微體擴增基因(MDM2)表達程度的影像學方法,使乳腺癌在分子水平發生改變的“早早期”被診斷成為可能。此項成果日前刊發于《美國核醫學》雜志。 有文
球形核酸探針讓腫瘤細胞“發光”
本報合肥5月3日電 記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉:近期該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得突破。相關研究成果日前發表在國際著名化學期刊上,并已申請國家發明ZL。 腫瘤細胞.jpg 癌癥是一種高發病率和高致死率疾病,其共性是細胞不受
球形核酸探針讓腫瘤細胞“發光”
記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉:近期該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得突破。相關研究成果日前發表在國際著名化學期刊上,并已申請國家發明ZL。 腫瘤細胞.jpg 癌癥是一種高發病率和高致死率疾病,其共性是細胞不受控制生長和永生化。由
球形核酸探針讓腫瘤細胞“發光”
?? 記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉:近期該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得突破。相關研究成果日前發表在國際著名化學期刊上,并已申請國家發明ZL。 癌癥是一種高發病率和高致死率疾病,其共性是細胞不受控制生長和永生化。由于腫瘤細胞不受控制生長和
球形核酸探針讓腫瘤細胞“發光”
記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉:近期該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得突破。相關研究成果日前發表在國際著名化學期刊上,并已申請國家發明ZL。 癌癥是一種高發病率和高致死率疾病,其共性是細胞不受控制生長和永生化。由于腫瘤細胞不受控制生長和永生
球形核酸探針讓腫瘤細胞“發光”
本報合肥5月3日電 記者從中科院合肥物質科學研究院獲悉:近期該院智能所智能微納器件研究室張忠平特聘研究員團隊在腫瘤細胞檢測及精準手術導航方面取得突破。相關研究成果日前發表在國際著名化學期刊上,并已申請國家發明ZL。 癌癥是一種高發病率和高致死率疾病,其共性是細胞不受控制生長和永生化。由于腫
核酸探針標記及原位雜交
一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否
核酸探針標記及原位雜交
一、核酸探針標記 核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。 核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大
核酸探針在其他方面的應用
1、檢測抗生素耐藥性核酸探針可直接從標本中測出細菌的耐藥基因。Perine 等用 DNA 探針查出尿路滲出液中的大多數淋球菌含有TEM 型β-內酰胺酶而對青霉素 G 耐藥。2、流行病學調查核酸探針可用于研究醫源性感染中爆發流行時大量的流行菌株間的同源性,結果易于分析和解釋。3、惡性腫瘤最引起人們注意
核酸探針標記及原位雜交2
(二)隨機引物合成法 隨機引物合成雙鏈探針是使寡核苷酸引物與DNA模板結合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探針。合成產物的大小、產量、比活性依賴于反應中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,產物平均長度為400~600個,可以獲得大量的有效探針。反應時對模板的要求不嚴格,用微量制備的質
核酸探針標記及原位雜交1
一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否