病毒透射電鏡載網與支持膜的選擇
病毒是一類體積微小呈亞顯微的、胞內專性寄生的非細胞生物,大小范圍為僅20-200nm。因此,若要了解病毒的形態結構等信息,必須借助電鏡觀察。為此,電鏡技術在病毒學研究中是不可缺少的重要手段。來源:《病毒學檢驗》載網的準備與支持膜的制備實驗方法原理因為電子的能量很弱,電子束不能透過玻璃,故用于透射電鏡觀察的標本不能置于載玻片上,尤論是病毒的懸滴標本或者病毒細胞培養物的超薄切片標本都要置于一層極薄的支持膜上。支持膜的厚度一般以 10~15nm 為宜。支持膜附在一個用銅或銖制成的載網上,載網的直徑為 3mm 。實驗材料銅網試劑、試劑盒聚乙烯醇縮甲醛(Formvar) 或火棉膠實驗步驟1. 載網的準備 載網大多數用銅片經特殊的方法腐蝕而成,故又稱銅網。因其網孔的多少可以分為: 400 目、 200 目、 100 目、 50 目或單孔銅網。銅網可在專業用品商店購到。如果用于細胞化學或免疫細胞化學的標本,則最好用錦網,因為銅網會產生化學反應......閱讀全文
病毒透射電鏡載網與支持膜的選擇
實驗方法原理 因為電子的能量很弱,電子束不能透過玻璃,故用于透射電鏡觀察的標本不能置于載玻片上,尤論是病毒的懸滴標本或者病毒細胞培養物的超薄切片標本都要置于一層極薄的支持膜上。支持膜的厚度一般以 10~15nm 為宜。支持膜附在一個用銅或銖制成的載網上,載網的直徑為 3mm 。實驗材料 銅網試劑
病毒透射電鏡載網與支持膜的選擇
病毒是一類體積微小呈亞顯微的、胞內專性寄生的非細胞生物,大小范圍為僅20-200nm。因此,若要了解病毒的形態結構等信息,必須借助電鏡觀察。為此,電鏡技術在病毒學研究中是不可缺少的重要手段。來源:《病毒學檢驗》載網的準備與支持膜的制備實驗方法原理因為電子的能量很弱,電子束不能透過玻璃,故用于透射電鏡
病毒透射電鏡載網與支持膜的選擇
實驗方法原理因為電子的能量很弱,電子束不能透過玻璃,故用于透射電鏡觀察的標本不能置于載玻片上,尤論是病毒的懸滴標本或者病毒細胞培養物的超薄切片標本都要置于一層極薄的支持膜上。支持膜的厚度一般以 10~15nm 為宜。支持膜附在一個用銅或銖制成的載網上,載網的直徑為 3mm 。實驗材料銅網試劑、試劑盒
TEM的載網選擇
由上述介紹的載網膜的結構及特點,可根據樣品的特征選擇合適的載網膜,匯總如表1所示,需要說明的是一些特殊情況:1) 用能譜分析銅元素時,不能選用銅載網,要選用鎳、鉬等其他材質的載網膜,同理分析碳元素時,要用氮化硅膜。2)在做高分子、生物樣品切片后需要染色時要用裸網或微柵,因為染色劑通常會染方華膜。3)
透射電子顯微鏡觀察前準備實驗——轉移支持膜至載網
試劑、試劑盒無菌水儀器、耗材瓷漏斗載網(銅網)支持膜乳膠管止水夾無菌鑷子濾紙紅外線燈大頭針(選用)平皿實驗步驟常用方法有二:法一:1. 將洗凈的網放入瓷漏斗中,漏斗下套上乳膠管,用止水夾控制水流,緩緩向漏斗內加入無菌水,其量約高 1 cm;2. 用無菌鑷子尖輕輕排除銅網上的氣泡,并將其均勻地擺在漏斗
電鏡載網
中文名稱載網英文名稱grid定 義載持電鏡切片標本的金屬網。直徑一般3 mm。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
載網的定義
中文名稱載網英文名稱grid定 義載持電鏡切片標本的金屬網。直徑一般3 mm。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
TEM的載網
載網透射電鏡用載網均為直徑為3mm、厚度為10-30μm的圓片,適用于所有廠家的各種型號的透射電鏡,其主要作用是負載樣品且在透射電鏡觀察時電子束能透過樣品,因此基本為網格結構,表面未負載膜的載網稱為“裸網”,按照不同的分類方法,主要包括:1)按孔的形狀結構:如圖1所示,一般分為圓孔裸網、方孔裸網等,
選擇載氣種類與載氣流速的關系
氣相色譜儀分離條件的選擇包括載氣的種類及流速、載體的性質及粒度、固定液性質、固定液用量、進樣速度、進樣量、氣化溫度和柱溫等方面。一、載氣的種類及流速:在一定的溫度下,塔板高度是載氣流速的函數。對于一定的樣品和色譜柱,有一個最佳載氣流速,此時的塔板高度最小,柱效最高。當要求載氣流速較小時,可選擇分子量
什么是載網?
中文名稱載網英文名稱grid定 義載持電鏡切片標本的金屬網。直徑一般3 mm。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
支持膜的概念
中文名稱支持膜英文名稱supporting film定 義敷于電鏡載網上的一層薄膜。能夠耐受電子束的轟擊,用于支持超薄切片。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
電鏡支持膜
中文名稱支持膜英文名稱supporting film定 義敷于電鏡載網上的一層薄膜。能夠耐受電子束的轟擊,用于支持超薄切片。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
氣相色譜法載氣選擇與載氣流速
典型的載氣包括氦氣、氮氣、氬氣、氫氣和空氣。通常,選用何種載氣取決于檢測器的類型。例如,放電離子化檢測器(DID)需要氦氣作為載氣。不過,當對氣體樣品進行分析的時候,載氣有時是根據樣品的母體選擇的,例如,當對氬氣中的混合物進行分析時,最好用氬氣作載氣,因為這樣做可以避免色譜圖中出現氬的峰。安全性與可
氣相色譜法載氣選擇與載氣流速
氣相色譜法載氣選擇與載氣流速典型的載氣包括氦氣、氮氣、氬氣、氫氣和空氣。通常,選用何種載氣取決于檢測器的類型。例如,放電離子化檢測器(DID)需要氦氣作為載氣。不過,當對氣體樣品進行分析的時候,載氣有時是根據樣品的母體選擇的,例如,當對氬氣中的混合物進行分析時,最好用氬氣作載氣,因為這樣做可以避免色
原子吸收石墨爐系統的載氣與載氣流量的選擇
? ??原子吸收光譜儀石墨爐系統的載氣分為倆個部分,一是外氣路,經由石墨管壁外流動,流量固定,稱為屏蔽氣,其作用是保護石墨管表面在被加熱升溫及高溫原子化過程中不與氧氣接觸發生氧化,保護石墨管中的樣品在干燥、灰化、原子化過程中不與大氣接觸發生化學反應;? ??另一路為內氣,從石墨管兩端進入,由管中心進
從樣品制備到實際操作,手把手教你拍出高質量TEM照片
透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)具有很高的分辨率和放大倍數高,廣泛應用于材料科學、地球科學、醫學和生命科學等領域。透射電子顯微鏡結合不同的附件(X射線能譜分析(EDS)、電子能量損失譜(EELS)),可以同時提供形貌、成分、結構信息,它可以揭
病毒透射電鏡病毒標本制備
實驗方法原理 病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料 病毒試劑、試劑盒 稀釋液儀器、耗材 透射電鏡實驗步驟 懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——懸滴標本法
實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱,只能觀察
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗1
懸滴標本法實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
支持膜的應用介紹
中文名稱支持膜英文名稱supporting film定 義敷于電鏡載網上的一層薄膜。能夠耐受電子束的轟擊,用于支持超薄切片。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
TEM載網膜的選擇
載網膜的選擇由上述介紹的載網膜的結構及特點,可根據樣品的特征選擇合適的載網膜,匯總如表1所示,需要說明的是一些特殊情況:1) 用能譜分析銅元素時,不能選用銅載網,要選用鎳、鉬等其他材質的載網膜,同理分析碳元素時,要用氮化硅膜。2)在做高分子、生物樣品切片后需要染色時要用裸網或微柵,因為染色劑通常會染
透射電鏡TEM耗材篇之載網膜
載網膜如上所述,裸網的孔徑在微米級,而透射電鏡觀察的樣品尺度通常在100nm以下,為了確保樣品能負責在載網上,在裸網上面需覆蓋一層厚度為10nm左右的有機膜,稱為支持膜。同時,為了防止載網支持膜和樣品在電子束照射下積累電荷,發生樣品飄移、跳動,甚至出現支持膜破裂等情況,在支持膜上再覆蓋一層導電層,提
氣相色譜分析法載氣選擇與載氣流速
典型的載氣包括氦氣、氮氣、氬氣、氫氣和空氣。通常,選用何種載氣取決于檢測器的類型。例如,放電離子化檢測器(DID)需要氦氣作為載氣。不過,當對氣體樣品進行分析的時候,載氣有時是根據樣品的母體選擇的,例如,當對氬氣中的混合物進行分析時,最好用氬氣作載氣,因為這樣做可以避免色譜圖中出現氬的峰。安全性
透射電鏡TEM耗材篇之載網膜的表面處理
親水性處理直接制備的各種裸網及載網膜通常表面是疏水的,不利于親水性樣品的吸附,而透射電鏡觀察時,很多樣品是親水的,因此需要對裸網及載網膜進行親水性處理,通常用含氧的等離子體進行處理,可用射頻輝光放電的方法產生氧等離子,其原理如圖6所示,空氣在高頻高壓的電場中產生放電,氧氣被電離成氧等離子體,氧等離子
TEM的親水性處理
.親水性處理直接制備的各種裸網及載網膜通常表面是疏水的,不利于親水性樣品的吸附,而透射電鏡觀察時,很多樣品是親水的,因此需要對裸網及載網膜進行親水性處理,通常用含氧的等離子體進行處理,可用射頻輝光放電的方法產生氧等離子,其原理如圖6所示,空氣在高頻高壓的電場中產生放電,氧氣被電離成氧等離子體,氧等離
透射電鏡TEM耗材篇之載網膜二
5)純碳膜:當樣品所用的有機溶劑(氯仿、甲苯等)能夠溶解方華膜時,載網膜中就要去除方華膜,只剩碳膜,稱為純碳膜,碳膜的厚度通常為20nm左右,如圖5所示,在高分辨觀察時背底的影響也比較明顯。6)其他類型支持膜:上述是最常用的幾種載網膜,它們能滿足大部分透射電鏡樣品觀察的需求,但在實際應用中,為滿足一
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要 本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。 實驗原理 標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
TEM樣品經濟有效的防污染方法
BEAMSHOWER是最為經濟有效的防污染方法。它的原理就是通過強光照射樣品后,可把有機物暫時固定在樣品表明,從而減少了污染率。具體步驟如下:①LOWMAG模式,是整個銅網與大熒光屏尺寸想接近;②TEM1-3;③CLAP撤出位置;④將光聚成與整個銅網相一致的大小;⑤可加入ILAP并將光闌孔調出熒光屏
非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1.經典法(1)將被檢病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min離心90min。(4)吸去上清,將離心管口倒置于濾紙上,吸去殘留液體。(5)沉淀物中加少量H2?