哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定
單細胞凝膠電泳實驗可應用于： （1）快速檢測單細胞DNA損傷； (2)遺傳毒性生物監測; (3)確定精子細胞中DNA片段化的程度。實驗方法原理螢光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶，同時在所有的化學發光反應中，它的光產物具有最高的量子效率，檢測靈敏度高。熒光素酶報告基因被廣泛用于miRNA靶基因驗證。熒光素酶報告基因的原理在于miRNA主要通過作用于靶基因的3’UTR起作用，可以將目的基因3’UTR區域構建至pGL3-basic載體中報告基因Luciferase的后面，構建熒光素酶質粒。然后轉染至細胞中，通過比較過表達或者干擾miRNA后，檢測報告基因表達的改變（監測螢光素酶的活性變化）可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用。結合定點突變等方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。實驗材料DNA 轉染的哺乳動物培養細胞試劑、試劑盒細胞裂解緩沖液熒光素......閱讀全文
酶活性定義
酶活性指的是有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性，這種有序性是受多方面因素調節的，一旦破壞了這種有序性，就會導致代謝紊亂，產生疾病，甚至死亡。酶活力受到調節和控制是區別于一般催化劑的重要特征。
酶活性單位
1．酶活性單位 20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位，參考值差別也很大，給臨床
酶活性檢測方法
伴隨著酶制劑工業的不斷發展，飼用酶制劑的規范化程度也逐步得到了提高，國家相繼對植酸酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶等制定了檢測標準，其它一些沒有統一檢測標準的酶制劑產品行業內研究人員也都根據實際情況制定了各種檢測方法，這些方法的制定為酶制劑產品的質量控制提供了有力的支持。但是酶制劑作為一種生物質產品對外界
什么是酶活性？
酶活力(enzyme activity)也稱酶活性，是指酶催化一定化學反應的能力。酶活力的大小可以用在一定條件下，它所催化的某一化學反應的轉化速率來表示，即酶催化的轉化速率越快，酶的活力就越高; 反之，速率越慢，酶的活力就越低。所以，測定酶的活力就是測定酶促轉化速率。酶轉化速率可以用單位時間內單位體
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L＝K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑．2. 開機預溫達37度．3. 選取測定程序．4. 測試：加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度．以后每隔30秒測定一次．5. 實驗結果：計算ΔA/min求出測定結果．
酶活性測定實驗
實驗方法原理U/L＝K?ΔA/min實驗步驟1. 誘導試劑．2. 開機預溫達37度．3. 選取測定程序．4. 測試：加入試劑準確計的30秒后測定讀取吸光度．以后每隔30秒測定一次．5. 實驗結果：計算ΔA/min求出測定結果．
雙酶切反應酶活性分析
同步雙酶切是一種省時省力的常用方法。選擇能讓兩種酶同時作用的最佳緩沖液是非常重要的一步。NEB每一種酶都隨酶提供相應的最佳NEBuffer，以保證100%的酶活性。NEBuffer的組成及內切酶在不同緩沖液中的活性見《內切酶在不同緩沖液里的活性表》及每支酶的說明書。能在最大程度上保證兩種酶活性的緩沖
酶活性單位檢驗技師
酶活性單位是檢驗技師需要了解的知識，醫學教育網搜索整理如下：1.酶活性單位20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方
RNA酶活性的控制
為了獲得高質量的真核細胞mRNA， 必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法，最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時，避免偶然引入實驗室內其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶法染問題的一些注意事項。大多數有經驗的研究者并不拘泥于這些注
酶活性單位臨床生化
酶活性單位：1．酶活性單位20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位，參考值差別也很大，給臨
酶的活性濃度單位
酶活性濃度以每單位體積所含的酶活性單位數表示。近些年來，我國及世界各國的臨床實驗室幾乎都習慣用U/L來表示體液中酶活性濃度。考慮到各級醫護人員都對katal不太熟悉，如使用katal/L報告酶活性濃度結果時，最好同時注明相應的U/L.在對酶活性濃度單位計算時，可根據所測定的酶所用方法的不同，利用標準
RNA酶活性的控制
為了獲得高質量的真核細胞mRNA， 必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法，最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時，避免偶然引入實驗室內其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶法染問題的一些注意事項。大多數有經驗的研究者并不拘泥于這些注
酶的活性濃度單位
酶活性濃度以每單位體積所含的酶活性單位數表示。近些年來，我國及世界各國的臨床實驗室幾乎都習慣用U/L來表示體液中酶活性濃度。考慮到各級醫護人員都對katal不太熟悉，如使用katal/L報告酶活性濃度結果時，最好同時注明相應的U/L.在對酶活性濃度單位計算時，可根據所測定的酶所用方法的不同，利用標準
酶活性的測定實驗
連續性檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示，或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量
酶活性單位臨床生化
酶活性單位： 1．酶活性單位 20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位，參考值差別也很大
酶活性單位臨床生化
酶活性單位：1．酶活性單位20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位，參考值差別也很大，給臨
酶活性測定的方式
酶促反應速度的測定可采用兩種方式： 一、測定完成一定量反應所需的時間； 二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法，后者稱為動力學法。 終點法 該方式是在特定條件下，將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物，然后根據反應進行到某一程度（即達到某一指標）所需要的時間長短來估計酶的活力。 其
酶活性的測定方法
一般采用測定酶促反應初速度的方法來測定活力，因為此時干擾因素較少，速度保持恒定。反應速度的單位是濃度/單位時間，可用底物減少或產物增加的量來表示。因為產物濃度從無到有，變化較大，而底物往往過量，其變化不易測準，所以多用產物來測定
酶蛋白的活性特點
酶蛋白與一般蛋白質的不同之處在于酶蛋白具有活性中心。酶蛋白的活性中心是與底物發生催化作用的部位，由酶蛋白的立體構型所決定，一般是三級結構及四級結構才具有活性中心。若這種結構被破壞，活性中心也就破壞，酶就失去活性，這就是當環境變化時，酶喪失活性的原因。 整個酶蛋白，包括活性中心和非活性中心部分，都
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的影響
內切酶星號活性
在非理想的條件下，內切酶切割與識別位點相似但不完全相同的序列，這一現象稱星號活性。有人提出，這種"星號"活性可能是內切酶的一種普遍特性（1），如果提供給相應反應條件，所有內切酶都會出現非特異性切割。NEB已證實下列酶存在星號活性：Apo I（2）、Ase I（2）、BamH I（3）、BssH II
酶的活性中心
酶的活性中心：酶蛋白與其他蛋白質不同之處在于酶蛋白有活性中心。所謂活性中心是指酶蛋白上具有的與催化活性有關的一個特定區域，其中包括催化過程中關鍵的催化基團以及與底物結合有關的結合基團。
酶活性測定方法對比
1.按反應時間分類法：20世紀50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應的平均速度來計算酶的活性，現多已不用。50年代中期開始采用連續監測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應的初速度，其結果遠比固定時間法準確，在高濃度標本尤為明顯，但本法也受到反應時間，反應溫度，試劑等的影
酶的活性調節方式
酶的活性可以通過以下幾種方式進行調節：一、酶活性的別構調節概念：別構酶具有別構效應，即一些小分子化合物與酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特異結合，引起酶蛋白分子構象變化，從而改變酶的活性。調節方式：別構激活：使酶活性增強的效應。通常由底物或底物以外的別構激活劑引起。別構抑制：使酶活性降低的效應。可由
酶活性的測定實驗
酶活性的測定可應用于：（1）酶動力學的研究；（2）酶抑制的研究。實驗方法原理1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示，或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量的量度，取決于指定的條件。SI單位是katal，1 katal = 1 mol /s，更實際
酶的活性指標介紹
酶催化化學反應的能力叫酶活力（或稱酶活性，active unit）。1961年國際酶學會議規定：1個酶活力單位是指在特定條件（25℃，其它為最適條件）下，在1min內能轉化1μmol底物的酶量，或是轉化底物中1μmol的有關基團的酶量。影響因素酶活力可受多種因素的調節控制，從而使生物體能適應外界條件
精氨酸酶的酶活性單位定義
酶活性單位定義：在pH值9.5，37℃、1min內轉換1.0μmol?L-精氨酸成為L-鳥氨酸和尿素的酶量為一個活力單位。在有尿素循環(urea cycle)的人和哺乳動物體內才存在精氨酸酶，它的作用是體內尿素從精氨酸上水解下來，并生成L-鳥氨酸，這反應通常發生在肝臟細胞的胞液中。
亞硝酸還原酶的酶活性測定
NiRs是胞內酶，其氧化還原反應過程中需要供體電子，且大多需要在厭氧條件下進行。因此體外檢測亞硝酸還原酶時需要在密閉無氧且有電子供體的情況下才能進行檢測。電子供體有甲基紫精、連二亞硫酸鈉和硫代硫酸鈉等 。
DNA聚合酶外切酶活性─校對作用
外切酶活性──校對作用：這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA 生長鏈末端的核苷酸。當反應體系中沒有反應底物dNTP時，由于沒有 聚合作用而出現暫時的游離現象，從而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反應體系的溫度可以促進這種作用，這表明