血液形態學觀察實驗

實驗步驟                                                         1. 染色：瑞特氏（Wright’s）法

刺破耳垂或指尖，取血一滴，置玻片上，用另一玻片以30度角將血液推成厚薄均勻之涂片。干燥后，用瑞特氏染液數滴加于涂片上，再加蒸餾水，然后水洗至粉紅色，干后即可觀察。瑞氏染液用美藍和伊紅混合配制而成，其中部分美藍氧化成為天青。染色后，對堿性染料美藍有親和力的部位呈藍色；對酸性染料伊紅有親和力者呈鮮紅色；對天青有親和力者呈紫紅色；對酸性染科和堿性染科都沒有較強親和力者則著色輕微，呈淡紅色或淡紫色。

2. 肉眼觀察：

標準的血涂片呈一很薄的“血膜”，一端平直（后端），另一端呈圓弧形（前端），故整體呈舌形。由于血涂片封片后易于退色，故一般未加蓋玻片。注意仔細觀察辨認血涂片的正反面，將有血膜面朝上置于低倍鏡下觀察。

3. 低倍鏡觀察：

大部分是紅色無核的紅細胞，其中散布少量白細胞，核染成藍色。選擇細胞分布均勻且白細胞較多的部位，涂片一般后半部較好。

4. 高倍鏡觀察：

通過微調節器確認低倍鏡下看到的細胞（以白細胞為佳），以保證血涂片的血膜面朝

上。

5. 油鏡觀察

辨認紅細胞、各種白細胞及血小板。注意參看教材所附的彩圖。

（1） 紅細胞：圓形，無核，呈紅色，中央著色較邊緣淺（何故?）

（2）中性粒細胞：圓形，比紅細胞大，胞質呈淡紅色，內含淡紫紅色的細小顆粒，分布均勻。核分葉，2~5葉不等，大多為2~3葉。葉間有染色質絲相連，染成藍色，也有不分葉的桿狀核。

（3）嗜酸性粒細胞：數量較少，較中性粒細胞大，胞質呈淡紅色，內含大量粗大的桔紅色顆粒，分布均勻而密集。核多為2葉，染成藍色。

（4）嗜堿性粒細胞：數量極少，很難找到。胞質內含大小不等的藍色顆粒，分布不均，常遮蓋核。核分葉、S形或不規則形，著色淺。

（5）淋巴細胞：大小不一，以小淋巴細胞居多，其直徑似紅細胞。核呈圓形，占細胞的大部，一側稍有凹陷。染色質致密呈塊狀，染成深藍色。胞質少，呈一窄帶圍繞核，染成蔚藍色，有時含少量紫紅色的嗜天青顆粒。大的淋巴細胞胞質較多，核染色淺。

（6）單核細胞：體積最大，數量較少。核呈腎形與馬蹄鐵形，染色質顆粒細而松散，故染色較淺；胞質較多，染成灰藍色，內含較多細小的嗜天青顆粒。

（7）血小板：體積最小，直徑約為紅細胞的1/3，成群分布在血細胞之間，呈不規則形，胞質染成淺藍色，中央含紫色的顆粒。

白細胞分類計數：在熟悉各種血細胞形態的基礎上，用高倍鏡或油鏡進行白細胞分類計數。為了避免重復計數，可按圖5所示的順序推移玻片，觀察50~100白細胞，分別記錄其種類，并將結果核算成百分數。