使用HPLCMS／MS檢測雞蛋和組織中的二甲硝唑

廣東省獸藥研制與安全評價重點實驗室的研究人員建立了高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS）方法，用于精準檢測二甲硝唑（DMZ）及其代謝物2-羥甲基-1-甲基-5-硝基咪唑（HMMNI）。

中國廣州華南農業大學獸醫學院廣東省獸藥研發與安全評價重點實驗室最近開展的一項研究 (1) 報告了高效液相色譜串聯質譜 (HPLC-MS/MS) 方法的開發，用于精確檢測二甲硝咪唑 (DMZ) 及其代謝物 2-羥甲基-1-甲基-5-硝基咪唑 (HMMNI)。研究結果表明，組織和雞蛋中 DMZ 和 HMMNI 的濃度在 1~100 ng/g 范圍內呈強線性關系。

DMZ 是一種應用廣泛的硝基咪唑類藥物，具有廣譜抗厭氧菌和抗原蟲活性，并具有強效抑制螺旋體的作用，常用于治療組織單胞菌病（黑頭病或傳染性腸炎）。DMZ 也常與其他抗生素在臨床上用于治療厭氧菌和需氧菌混合感染。DMZ 預混劑因其功效、方便和成本效益而被用作飼料添加劑，但先前的動物研究發現，DMZ 的遺傳毒性潛力尚無法判斷，但有致癌性。因此，一些國家已禁止 DMZ 用于食用動物，或僅批準用于治療疾病。

由于目前對食品中 DMZ 或其代謝物殘留安全水平的確定數據有限，目前聯合國糧農組織/世界衛生組織食品添加劑聯合專家委員會（JECFA）要求所有動物食品中不得檢出 DMZ（2），對 DMZ 在食用動物中的使用規程提出了更高的要求。本文作者希望為 DMZ 在家禽養殖中安全合理地應用建立科學依據，開發了 HPLC-MS/MS 方法同時分析肉雞組織和雞蛋中 DMZ 和 HMMNI 的濃度。他們還以三黃雞和海蘭灰蛋雞為試驗對象，研究了 DMZ 在肉雞和蛋雞體內的消除模式，并提出了相應的停藥時間和雞蛋棄置期。

作者指出，目前檢測動物組織中硝基咪唑的主要方法是薄層色譜法 (TLC)、氣相色譜法 (GC)、高效液相色譜法 (HPLC)，但他們采用的 HPLC-MS/MS 方法靈敏度高、分離效果好、節約成本。他們的研究表明，在肉雞組織和雞蛋樣品中，HMMNI 的殘留量始終高于 DMZ。皮脂（一種保護和滋潤皮膚表面的油性物質 [3]）是 DMZ 和 HMMNI 的累積組織，消除速度最慢。在雞蛋中，DMZ 和 HMMNI 的殘留量在停藥后第一天達到峰值，隨后緩慢消除，消除半衰期分別為 0.45 和 0.66 天。

本研究條件下，利用WT1.4軟件測得肉雞停藥時間為262.97 h（10.96 d），蛋雞停藥后棄蛋期為13.45 d。因此，從實際出發，作者建議肉雞停藥時間為11 d，蛋雞停藥后棄蛋期為14 d。

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References

1. Mo, K.; Wei, C.; Bai M.; Long X.; Liu, X.; Ding, H. Elimination Patterns of Dimetridazole in Egg of Laying Hens and Tissues of Broiler After Oral Administration. Frontiers in Veterinary Science, 2024, 11. DOI: 10.3389/fvets.2024.1451904

2. World Health Organization. Residue Evaluation of Certain Veterinary Drugs: Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, 94th Meeting (Virtual), May 16–27, 2022. Food and Agriculture Organization, 2023.

3. What is Sebum? Medical News Today website. https://www.medicalnewstoday.com/articles/sebum#function (accessed 2024-08-07).