wb條帶周邊發黑中間白的原因是過高的蛋白上樣量或一抗和二抗濃度過高都會促使底物過快的消耗,導致我們在做化學發光檢測時,發光底物已經消耗殆盡而形成空斑。
要解決條帶中出現整條白色空斑,需要減少蛋白上樣量、稀釋一抗和二抗的濃度。
如果條帶中出現白圈的話,是轉膜時候,膜與膠之間有氣泡,需要在制作“三明治”時,注意趕走氣泡。通常將電轉液倒入一個盤子里,液體高度與第一層濾紙齊平,然后往濾紙上澆一些轉膜液,把電泳膠用清水清洗后平鋪在濾紙上,隨后在確認濾紙與膠之間無氣泡后,再往膠上澆一些電轉液,之后用雙手的拇指和食指輕輕夾住PVDF膜兩側中間,使膜成U型,再將U型底部接觸到膠的中間,慢慢往兩邊放下膜,這樣可以減少氣泡。上層濾紙同樣用U型的放置方法,可以用玻璃棒貼實一下,然后蓋上海綿墊。