異構體照高效液相色譜法(通則0512)測定。
臨用新制。供試品溶液、對照品溶液、系統適用性溶液、靈敏度溶液色譜條件、系統適用性要求與測定法見有關物質項下限度按主成分外標法以峰面積計算,16S-地紅霉素不得過1.0%有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。臨用新制。供試品溶液取本品適量,精密稱定,加乙腈-甲醇(70:30)溶解并定量稀釋制成每1m1中約含10mg的溶液對照品溶液取地紅霉素對照品適量,精密稱定,加乙腈-甲醇(70:30)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。系統適用性溶液取地紅霉素對照品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2.5mg的溶液,室溫放置至少24小時靈敏度溶液精密量取對照品溶液1ml,置10m量瓶中,用乙腈甲醇(70:30)稀釋至刻度,搖勻。
色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6mm250mm,5m或效能相當的色譜柱);以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀1.41g與磷酸氫二鉀6.91g,加水10oml使溶解)乙腈甲醇(37:44:19)為流動相;檢測波長為205mm;進樣體積20。系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,地紅霉素峰的保留時間約為15分鐘,9-(S)-紅霉胺峰的相對保留時間約為0.6,16S-地紅霉素異構體峰的相對保留時間約為1.1;地紅霉素峰與16S-地紅霉素異構體峰間的分離度應大于2.0;地紅霉素峰與其他各雜質峰間的分離度均應符合要求;靈敏度溶液色譜圖中,主成分色譜峰峰高的信噪比應大于10測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,按主成分外標法以峰面積計算,除16S-地紅霉素峰外,9-(S)-紅霉胺不得過1.0%,其他單個雜質不得過1.0%,雜質總量不得過3.0%,小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。殘留溶劑照殘留溶劑測定法(通則0861第二法)測定。供試品溶液取本品約0.2g,精密稱定,置10ml量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺10ml溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取2ml,置頂空瓶中,密封。對照品溶液精密量取甲醇、二氯甲烷、乙醇和乙腈各適量,用N,N-二甲基甲酰胺定量稀釋制成每1ml中約含甲醇0.06mg、二氯甲烷0.012mg、乙醇0.1mg、乙腈0.008mg的混合溶液,精密量取2ml,置頂空瓶中,密封。
色譜條件以聚乙二醇(PEG20M)(或極性相近)為固定液的毛細管柱為色譜柱;起始溫度為40℃,維持15分鐘,以每分鐘30℃的速率升溫至240℃,維持10分鐘;進樣口溫度為200℃;檢測器溫度為250℃。頂空瓶平衡溫度為90℃,平衡時間為20分鐘。系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,各成分峰之間的分離度均應符合要求。測定法取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。限度甲醇、二氯甲烷、乙醇和乙腈的殘留量均應符合規定水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過1.0%。熾灼殘渣取本品1.0g,依法檢查(通則0841),遺留殘渣不得過0.1%重金屬取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(通則0821第二法),含重金屬不得過百萬分之二十
