⑴載板
用以涂布薄層用的載板有玻璃板、鋁箔及塑料板，對薄層板的要求是：需要有一定的機械強度及化學惰性，且厚度均勻、表面平整，因此玻璃板是最常用的。載板可以有不同規格，但最大不得超過20×20，玻璃板在使用前必須洗凈、干燥備用。玻板除另有規定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的規格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。
⑵固定相(吸附劑)或載體
薄層層析硅膠薄層層析硅膠最常用的有硅膠G、硅膠GF〈[254]〉、硅膠H、硅膠HF〈[254]〉，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F〈[254]〉等。其顆粒大小，一般要求直徑為10～40μm。薄層涂布，一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種；前者系將固定相直接涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10～15%煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小時)，混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5～0.7%)適量調成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。也有含一定固定相或緩沖液的薄層。
⑶ 涂布器
應能使固定相或載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。
⑷ 點樣器
定性：內徑為0.5mm管口平整的普通毛細管。
定量：微量注射劑。
點樣直徑不超過4mm，點樣距離一般為1~1.5cm即可。
⑸ 展開室
應使用適合載板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴密的蓋子，除另有規定外，底部應平整光滑，應便于觀察。