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  • 發布時間:2021-06-18 11:07 原文鏈接: 紫外分光光度法的適用條件

    應用范圍:①定量分析,廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機和有機物質的測定。②定性和結構分析,紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應、氫鍵的強度、互變異構、幾何異構現象等。③反應動力學研究,即研究反應物濃度隨時間而變化的函數關系,測定反應速度和反應級數,探討反應機理。④研究溶液平衡,如測定絡合物的組成,穩定常數、酸堿離解常數等。
    對溶劑的要求
      含有雜原子的有機溶劑,通常均具有很強的末端吸收。因此,當作溶劑使用時,它們的使用范圍均不能小于截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm 。另外,當溶劑不純時,也可能增加干擾吸收。因此,在測定供試品前,應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求,即將溶劑置1cm石英吸收池中,以空氣為空白(即空白光路中不置任何物質)測定其吸收度。溶劑和吸收池的吸光度,在220~240nm 范圍內不得超過0.40,在241~250nm范圍內不得超過0.20,在251~300nm范圍內不得超過0.10,在300nm以上時不得超過0.05。
    測定法
      測定時,除另有規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm的石英吸收池,在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度,或由儀器在規定波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確,除另有規定外,吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內,并以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數,以在0.3~0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度會偏低;狹縫寬度的選擇,應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增大為準,由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測定供試品的吸光度后應減去空白讀數,或由儀器自動扣除空白讀數后再計算含量。當溶液的pH值對測定結果有影響時,應將供試品溶液和對照品溶液的pH值調成一致。
      (1) 鑒別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。
      (2) 含量測定 一般有以下幾種。
    對照品比較法
      按各品種項下的方法,分別配制供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100%±10%,所用溶劑也應完全一致,在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后,按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶
      CX=(AX/AR)CR
      式中 CX為供試品溶液的濃度;
      AX為供試品溶液的吸收度;
      AR為對照品溶液的濃度;
      CR為對照品溶液的吸收度。
    吸收系數法
      按各品種項下的方法配制供試品溶液,在規定的波長處測定其吸光度,再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時,吸收系數通常應大于100,并注意儀器的校正和檢定。
    比色法
      供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。
      用比色法測定時,應取數份梯度量的對照品溶液,用溶劑補充至同一體積,顯色后,以相應試劑為空白,在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標繪制標準曲線,再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度,并求出其含量。
      也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作,顯色后,以相應的試劑為空白,在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度,按上述(1)法計算供試品溶液的濃度。
      除另有規定外,比色法所用空白系指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理制得。

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