層析法分類

1.凝膠層析

又稱分子篩過濾或排阻層析等。

固定相是多孔凝膠，各組分的分子大小不同，因而在凝膠上受阻滯的程度（移動速度）也不同。

優點：所用凝膠屬于惰性載體，吸附力弱，操作條件溫和，不需要有機溶劑，對高分子物質有很好的分離效果。

常用的凝膠有Sephadex G（葡聚糖凝膠）系列。

凝膠層析可用于脫鹽、分離提純、測定高分子物質的分子量、高分子溶液的濃縮等。

2.離子交換層析

采用具有離子交換性能的物質作固定相，利用它與流動相中的離子能進行可逆交換的性質來分離離子型化合物的方法。

主要用于分離氨基酸、多肽及蛋白質，也可用于分離核酸、核苷酸及其他帶電荷的生物分子。

3.高效液相層析

在經典液相層析法基礎上，引進氣相層析的理論而發展起來的一項新穎快速的分離技術。

具有分離能力強、測定靈敏度高、可在室溫下進行、應用范圍廣等優點，對分離蛋白質、核酸、氨基酸、生物堿、類固醇和類脂等尤其有利。

根據流動相和固定相相對極性，高效液相色譜分析可分為正相和反相兩種。

4.親和層析

利用待分離物質和它的特異性配體間具有特異的親和力，從而達到分離的目的。

將可親和的一對分子中的一方以共價鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑，當含混合組分的樣品通過此固定相時，只有和固定相分子有特異親和力的物質才能被固定相吸附結合，無關組分隨流動相流出。

親和層析中所用的載體稱為基質，與基質共價連接的化合物稱配基。

具有專一親和力的生物分子對主要有：

抗原與抗體，DNA與互補DNA或RNA，酶與底物，激素與受體，維生素與特異結合蛋白，糖蛋白與植物凝集素等。

親和層析可用于純化生物大分子、稀釋液的濃縮、不穩定蛋白質的貯藏、分離核酸等。