銀耳提取物抗抑郁活性研究（一）

摘要:目的研究銀耳提取物對大鼠抗抑郁活性的影響·方法采用雄性Wistar大鼠(體重180 - 220 g)建立慢性應激抑郁癥大鼠模型，建模成功大鼠隨機分為4組，分別為模型組(生理鹽水2.0 ml/kg)，銀耳提取物低劑量組((0. 5 g / kg) ,銀耳提取物中劑量組(1.0 g/kg)，銀耳提取物高劑量組(1. 5 g/kg)，取空白未建模大鼠作為空白組，給予等體積的生理鹽水，五組大鼠連續灌胃給藥28 d，觀察大鼠懸尾不動時間和游泳不動時間，并測定大鼠血漿及下丘腦神經遞質多巴胺、去甲腎上腺素(NEB含量。結果1.5 g/kg銀耳提取物可以顯著提高抑郁大鼠體重(P<0.01)，增加大鼠蔗糖偏愛度(P<0.01)，同時1.0一1.5 g/kg銀耳提取物劑量依賴性的減少大鼠懸尾不動時間和游泳不動時間(P < 0. 05)，增加大鼠血漿及下丘腦多巴胺(DAB含量(P < 0. 05) 1. 5 g/kg銀耳提取物顯著提高大鼠血漿及下丘腦去甲腎上腺素(NE)含量(P<0.01)。結論銀耳提取物具有顯著的抗抑郁活性，其作用可能與其增加大鼠血獎及下丘神經遞質含量相關。

關鍵詞:銀耳;慢性應激;抗抑郁;去甲腎上腺素;多巴胺

抑郁癥是一組高患病、高復發、高自殺、易致殘的重性精神障礙資料顯示，我國高中生抑郁癥狀發生率為25 . 8 %，大學生抑郁癥狀檢出率在20 %-60 %，患病率高于國內其他職業人群及國外水平。WHO己將抗抑郁藥列為21世紀最需迫切開發的藥物之一。

抑郁癥的病因目前尚未闡明，普遍接受的是生物胺假說，即抑郁癥患者腦內神經遞質中的生物胺類等水平下降導致抑郁癥發生。臨床使用的抗抑郁西藥多據此開發，這些藥物的療效肯定，同時也存在巨大的副作用，且價格昂貴，藥物依賴性強，巴戟天提取物、姜黃素等中藥均被證明具有很好的抗抑郁活性。銀耳又稱作白木耳、雪耳，研究證明銀耳提取物具有保肝抗腫瘤等活性，但是未見關于銀耳抗抑郁活性的報道。

本研究建立大鼠漫性應激抑郁癥模型，在動物體內中證明銀耳提取物的抗抑郁活性，并考察銀耳的抗抑郁活性是否同其增強單胺類神經遞質分泌相關。

1材料與方法

1.1動物健康成年雄性Wistar大鼠,180 - 220 g購自長春生物制品所，實驗動物生產許可證號為:SCXK(遼)2013一0003，實驗動物使用許可證號為SYXK(吉)2014 - 0004，飼養期間給予大鼠標準顆粒飼料及純凈飲水，飼養條件:室溫23度，濕度52%一58%，保持12 h晝夜節律(白晝時間為7 : 00 -19:00)，自由飲水進食，實驗前大鼠適應性喂養7 d。

1.2實驗試劑Rat DA Elisa kit ，Rat NE Elisa kit，購買自上海源葉生物試劑有限公司。其他試劑均為分析純，購買自國藥集團化學試劑有限公司。

1.3儀器 多功能酶標儀，購買自美國伯騰;恒溫培養箱，購買自黃石市醫療器械廠。恒溫水浴，購買自江蘇金壇醫療儀器廠;RE - 52E旋轉蒸發器，購買自上海雅榮公司。懸尾實驗系統，購買自上海欣軟信息科技有限公司 強迫游泳實驗系統，購買自上海欣軟信息科技有限公司。

1.4實驗方法

1.4. 1銀耳多糖粗提物的制備干燥銀耳100 g按液料比10:1 (ml/g)的比例加入去離子水，80℃水浴提取3h，冷卻至室溫，8 000 r/min離心10 min，收集上清，得銀耳水提液，提取重復一次，合并兩次提取液，凍干，得銀耳提取物，采用苯酚硫酸法測定多糖含量為14. 67 %，備用。

1.4.2大鼠抑郁癥模型的建立實驗采用改性慢性不可預知應激模型(CUMS)建立抑郁癥大鼠模型，空白組大鼠不給予任何刺激;每組16只大鼠，實驗組大鼠單籠飼養，并在實驗周期(8周)內給予模型大鼠7種不同的慢性應激原刺激，慢性應激原包括:①24 h潮濕墊料;②0℃冰水浴強迫游泳5 min ;③懸掛5 min;④夾尾1  min順50 0C烘箱烘烤5 min ; )24 h禁食，12

h禁水;⑦晝夜顛倒。上述刺激，每7d為一周期，順序隨機但同一刺激原不得連續使用，方案見表1

1.4.3大鼠分組及給藥慢性應激四周后，大鼠隨機分為5組，分別為:空白組(Control):空白未建模大鼠，第5 -8周灌胃給予2. 0 ml/kg生理鹽水;模型組:8周慢性不可預知應激，第5 -8周灌胃給予2. 0 ml/kg的生理鹽水;銀耳提取物低劑量組:8周慢性不可預知應激，第5 -8周灌胃給予0. 5 g/kg的生理鹽水;銀耳提取物中劑量組:8周慢性不可預知應激，第5-8周灌胃給予1.0 g/kg的生理鹽水;銀耳提取物高劑量組:8周慢性不可預知應激，第5-8周灌胃給予1.5g/kg的生理鹽水。大鼠連續灌胃給藥28 d，給藥期間繼續給予刺激。實驗期間動物自由取食和飲水。