實驗概要
了解各類糖的化學性質與其結構之間的關系;掌握鑒別各類糖的方法。
主要試劑
1. 2%葡萄糖
2. 2%木糖
3. 2%麥芽糖
4. 2%乳糖
5. 2%蔗糖
6. 1%淀粉
7. 本尼地試劑
8. 莫利施試劑
9. 謝里萬諾夫試劑
10. 巴弗試劑
11. 間苯三酚鹽酸溶液
12. 10%氫氧化鈉等
主要設備
1. 常用儀器
2. 恒溫水浴鍋
實驗步驟
1. 莫利施(Molisch)試驗
取5支試管,編號后分別加入2%葡萄糖、果糖、木糖、蔗糖和1%淀粉溶液各lmL,再滴入2滴莫利施試劑,振搖均勻后,將各試管傾斜45°,沿管壁徐徐加入lmL硫酸(勿搖動試管),靜置片刻,觀察上下兩液層界面處的顏色變化。稍加振蕩試管,觀察硫酸層現象。
2. 謝里萬諾夫(Se1iwanoff)試驗
取4支試管,編號后各加入10滴謝里萬諾夫試劑,再各取2滴2%葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖溶液,分別加入上述試管,搖勻后將四支試管同時放入沸水浴中加熱,觀察各試管中的顏色變化,并比較顯色次序。
3. 間苯三酚試驗
取4支試管,編號,各加入1mL間苯三酚鹽酸溶液,再分別加入5滴2%葡萄糖、果糖、木糖和蔗糖溶液,搖勻后將試管放入沸水浴中煮沸1-2分鐘,觀察各試管中的顏色變化,比較結果。
4. 本尼地(Benedict)試驗
取6支試管,編號,各加入1mL本尼地試劑,再分別滴加5滴2%葡萄糖、果糖、木糖、蔗糖、麥芽糖溶液和1%淀粉溶液,搖勻后將各試管同時置沸水浴中加熱3-5分鐘,觀察顏色變化及沉淀的生成。
5.巴弗(Barfoed)試驗
取2%葡萄糖、果糖、麥芽糖和乳糖溶液各lmL,分別加至4支預先編號的試管中,再各加入1mL巴弗試劑,將各試管同時置于沸水中加熱5分鐘,取出試管,觀察比較現象,并做出結論。
6. 成脎反應與鑒定
取6支試管,編號后分別加入2%葡萄糖、果糖、木糖、麥芽糖、乳糖和蔗糖溶液各20滴,再各加入10滴10%苯肼鹽酸鹽溶液和10滴15%醋酸鈉溶液(或20滴苯肼試劑),混合均勻,用棉花塞住管口,再將各試管同時浸入沸水浴中加熱(注意隨加振蕩),記錄各種糖脎形成的時間,30分鐘后,若結晶析出不明顯,可取出試管自然冷卻,并用玻璃棒摩擦管壁以幫助結晶。最后用玻璃棒取糖脎結晶少許于載玻片上,在低倍(80-100倍)顯微鏡下觀察其結晶形狀。
7. 蔗糖的水解與鑒定
取兩支試管,各加入2%蔗糖溶液lmL,在甲試管中加2滴濃鹽酸,在乙試管中加2滴蒸餾水,搖勻,兩支試管同時放入沸水浴中加熱10-15分鐘,取出冷卻,甲管用10%氫氧化鈉溶液中和至紅色石蕊試紙呈堿性反應。向兩支試管中各加入1mL本尼地試劑,搖勻后,同時置沸水浴中加熱2-3分鐘,觀察并分析所發生的現象。
8. 淀粉與碘作用
取1支試管加入1%淀粉溶液5滴和2mL蒸餾水,然后加1滴1%碘液;將試管放入沸水浴中加熱5-l0分鐘,取出試管冷卻。觀察并分析每步操作中所發生的現象。
9. 淀粉的水解
在試管中加入3mL 1%淀粉溶液,再加0.5mL 1:5硫酸,于沸水浴中加熱5分鐘,冷卻后用10%氫氧化鈉溶液中和至中性。取5滴與1mL本尼地試劑作用,在沸水浴中加熱3-5分鐘,觀察現象。
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