1. 將適當稀釋(事先滴定)的診斷血清與予溶化的2%瓊脂在60℃水浴預熱數分鐘后等量混合均勻制成免疫瓊脂板。 2. 在免疫瓊脂板上按一定距離(1.2~1.5厘米)打孔,見圖1。

圖1 單向瓊脂擴散試驗抗原孔位置示意圖 1~5孔加參考血清,6~7孔加待檢血清 3. 向孔內滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀釋的參考血清及1:10稀釋的待檢血清,每孔10微升,此時加入的抗原液面應與瓊脂板一平,不得外溢。 4. 已經加樣的免疫瓊脂板置濕盒中37℃溫箱擴散24小時。
5. 測定各孔形成的沉淀環直徑(mm),用參考血清各稀釋度測定值繪出標準曲線,再由標準曲線查出被檢血清中免疫球蛋白的含量。 展開 |