用檢測和驅動DNA探針進行差異雜交實驗
試劑、試劑盒 洗滌緩沖液 SDS SSC Blocking 溶液 經過剪切的鮭魚精 DNA探針 儀器、耗材 沸水浴 雜交爐 實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑高嚴格性洗滌緩沖液（0.2XSSC，5 g/LSDS），預熱到 68°C(可選，見第 9 步）低嚴格性洗滌緩沖液（2XSSC，5 g/LSDS)，預熱到 68°C(可選，見第 9 步）SDS，5 g/L(可選，見第 9 步）SSC，20X（1......閱讀全文
electrophoresis－of－DNA
Agarose?Gel?Electroporesis?of?DNA Making?the?gel: 1.? Place?casting?platform?with?well?former?sideways?in?gel?stand?where?you?wish?to? pour?
DNA測序
? ? ? ? ? ? ? ? 自動測序法 雙脫氧鏈末端終止法 非同位素銀染 鳥槍法 Maxam-Gilbert化學修飾法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法
DNA－Laddering
I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace
DNA測序
DNA測序（主要內容如下）·?????????Sequencing Gel Preparation·?????????Preparation of Templates?·?????????DNA Sequencing by the Dideoxy Method·?????????DNA Sequen
DNA凝膠電泳（DNA－agarose－gel－electrophoresis）
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物的方法，這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物，利用DNA分子在泳動時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中向陽極移動。在一定的電場強度下，DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應，即分
DNA指紋圖譜分析[DNA－Fingerprinting－]
一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術，學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度，并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的
可以DNA結合的酶DNA連接酶
DNA連接酶：是能夠使用來自ATP或NAD的化學能將先前切割或斷裂的DNA鏈聚集在一起的酶。連接酶在DNA滯后鏈復制中特別重要，因為它們將岡崎碎片組合成DNA鏈。連接酶在DNA修復和基因重組中也發揮重要作用。
Quick－Yeast－DNA－Prep:－Isolation－of－Total－DNA－(genomic－and－plasmid)
Grow a 5 ml YPD O/N culture inoculated with a single yeast colony at 30 deg.Transfer culture to a small 13 x 100 glass tube. Spin down cells 2 min. in
高變區DNA與DNA指紋的關系
人的衛星DNA?或稱隨體DNA?是由一些短的DNA 片段（10bp 左右）多次重復所構成的。重復片段的組成和拷貝數在不同的個體及基因組的不同位置上不一樣。提取不同個體的基因組DNA 后，用其切點能識別序列為4 個堿基而又不切割該重復片段的限制性內切酶在重復片段的兩側切割基因組DNA ，然后將樣品進行
循環腫瘤DNA比循環正常DNA矮半截
如今，人們開始利用液體活檢技術來診斷癌癥，以及監測治療效果，不過靈敏度是個問題。美國猶他州大學和華盛頓大學的研究人員近日在《PLOS Genetics》上發表文章，稱來源于腫瘤的DNA片段比來源于正常細胞的片段要短，這個特征可用于改善液體活檢。 猶他州大學的Hunter Underhill及其
DNA的酶切與連接——DNA片段連接
實驗方法原理核酸片段可以通過連接酶的作用連接起來而獲得重組分子。實驗材料λDNA EcoT14I：由11條DNA片段組成試劑、試劑盒T4 DNA連接酶及其配套的10×連接緩沖液 0.5×TBE電泳緩沖液 6×Loading Buffer Goldview 瓊脂糖儀器、耗材電泳儀 水浴鍋 移液器 微波
A型DNA與B型DNA的結構差異
A型DNA與B型DNA是在兩種環境下同種物質不同的形式。B型DNA：92%RH，鈉鹽，溶液和細胞中天然狀態中的DNA多以此狀態存在A型DNA：75%RH，鈉鹽A型DNA也是由反向的兩條多核苷酸鏈組成的雙螺旋，為右手螺旋，但螺旋體較寬而短，堿基與中心軸之傾角也不同，呈19度。
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序，手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今dna序列分析的主流。美國peabi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀，其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種型
DNA測序儀
DNA序列測定分手工測序和自動測序，手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今 dna序列分析的主流。美國pe abi公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等dna測序儀，其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
DNA－Cell－Cycle
Solutions70% ethanolribonuclease (100 μg/ml DNase free, Sigma)propidium iodide ( 50 μg/ml in PBS)ProcedureHarvest cells. Spin at 1200 rpm for 5 minute
Cosmid－DNA－Isolation
實驗概要Isolation of high yields of highly pure cosmid DNA using PureLink? HiPure Plasmid Purification Kits.實驗原理The ?PureLink? HiPure Plasmid Purification
DNA－methyltransferase－Assay
Methylated CpG island Amplification?Protocol written by Minoru Toyota2. Materials2.1. MCARestriction enzymes SmaI, XmaIT4 DNA ligaseTaq DNA polymerase
Lambda－DNA－Preparation
Lambda DNA PreparationThis is a plate method that gives very good yield for cloning. I have combined the Promega and Maniatis protocols.Solutions?T-TY
DNA純化實驗
PCR清潔試劑盒純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油
DNA作圖實驗
多種酶消化 限制酶部分消化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。
DEPHOSPHORYLATION－OF－LINEARIZED－DNA
DEPHOSPHORYLATION OF LINEARIZED DNAALKALINE PHOSPATASE(CIP) DIGESTIONDigestion of protruding 5'-ends1. Precipitate digested DNA and resuspend in a
DNA點雜交
DNA點雜交l????????DNA斑點印跡的制備預備1．冰浴中以70W左右的超聲波處理基因組DNA 1min，用瓊脂糖凝膠電泳檢測片段大小，這些片段大小均應為7～10kb。2．用TE緩沖液將DNA稀釋至0.5μg/μl。?斑點印跡的制備1．加熱5μg DNA（在10μl TE緩沖液中）至95℃?1
Chromosomal－DNA－Isolation
Chromosomal DNA IsolationMETHOD:Grow cells in 2-5 ml broth to late log phase.Pellet 1-2 ml cells in microfuge.Resuspend cells in 400 μl TES (50 mM Tri
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次，用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，
重組DNA轉化
目的：在體外連接組裝而成的重組DNA分子只能轉入合適的受體細胞，才能大量地進行復制、增殖和表達。通過實驗學會重組DNA轉化的最基本的操作以及如何提高轉化效率的基本思路。?原理：帶有外源DNA片段的重組體分子在體外構建成后，需要導入適當的宿主細胞內進行繁殖或表達出具有一定生物活性的蛋白。能夠作為重組體
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
Yeast－DNA－Prep
Protocolgrow up yeast culture to appropriate density (near saturation)spin 1.5 mls of culture for 1 min in microfuge and aspirate off supernatantresus
DNA抽提
DNA抽提（主要內容如下）·???Working with DNA·???DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms·???DNA Extraction from Cell and Tissue·???Mitochondria DNA Isola
DNA的定量
一、 實驗原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟環和嘧啶環的共軛雙鍵，在260 nm波長處有特異的紫外吸收峰，其吸收強度與核酸的濃度成正比，這個物理特性為測定核酸溶液濃度提供了基礎。1 OD260相當于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以