釀酒酵母培養條件實驗——液體培養基中細胞滴度的檢測
實驗方法原理酵母在瓊脂或液體培養基中的理想培養溫度是30℃,培養皿平板應倒置放入塑料盒中,于孵箱或培養室內進行培養。當孵育時間超過2或3天時,塑料盒可防止平板上的瓊脂干裂。當使用液體培養基培養時,要使用旋轉式或往復式搖床,至少每分鐘200轉,以保證充分通氣;進行大體積液體培養時使用錐形瓶,培養基為瓶容積的1/5到1/3。雖然帶三重擋板的搖瓶比較昂貴,但每瓶有較多培養基時細胞生長良好。5~10ml的小量培養,可以使用玻璃試管或塑料試管,放入固定于揺床平臺上的傾斜支架內,這樣可獲得最好的通氣? 用滅菌的15mm x 100mm的一次性塑料管進行培養,培養基的量最多為2ml; 而用20mm x 150mm帶塑料蓋的玻璃管進行培養,培養基的量最大可到10ml。可用接種環或滅菌的牙簽接種平板或液體培養基,一般使用直徑為2~3mm的鉑或鎳接種環。滅菌扁平牙簽的大頭也可用于酵母細胞的劃線接種,以獲得單菌落。牙簽還可用于重復操作,如多次接種或在......閱讀全文
釀酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效轉化法實驗
轉化材料的制備 高效轉化法 轉化含有質粒的菌株 快速簡便的轉化法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA
釀酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效轉化法實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 TE 緩沖液雙蒸水儀器、耗材 磁力攪拌器玻璃燒杯實驗步驟 一、單鏈載體 DNA 的制備1. 在 100 ml 滅菌 TE 緩沖液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力攪拌器上劇烈攪拌 2~3 個小時以混勻。2. 將載體 DNA 溶液分裝成 9 個 10 ml
關于乳酸克魯維酵母的生長及生命周期
乳酸克魯維酵母能夠利用的碳源非常廣泛,纖維二糖、山梨糖、2,3-丁二醇等其他酵母不易利用的碳源在乳酸克魯維酵母中都可以得到利用。在實驗室的研究過程中,培養乳酸克魯維酵母所巧用的培養條件一般與培養釀酒酵母所使用的培養條件相似。完全培養基成分為1%的酵母提取物(W/V)、2%的蛋白胨(W/V)及實驗
細菌在液體培養基中的生長現象有哪些
細菌在液體培養基中的生長現象有三種:混濁生長、沉淀生長、菌膜生長(表面生長).1、混濁生長:大多數細菌,如大腸埃希菌、志賀菌等.2、沉淀生長:少數鏈狀排列的細菌,如鏈球菌、炭疽芽胞桿菌等.3、菌膜生長(表面生長):專性需氧菌:如枯草芽胞桿菌、結核分枝桿菌和銅綠假單胞菌等.
RPMI1640培養基的配制及細胞培養的條件
一、 培養基的特性——細胞生存的環境與條件1、溫度條件(37±0.5℃) 2、pH條件 (7.2~7.4) 3、氣體條件 4、水的質量(三蒸) 5、滲透壓 6、營養條件 7、無菌條件二、培養基的分類1、平衡鹽液 2、天然培養基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培養基(化學成分清楚)三、R
RPMI1640培養基的配制及細胞培養的條件
一、 培養基的特性——細胞生存的環境與條件1、溫度條件(37±0.5℃) 2、pH條件 (7.2~7.4) 3、氣體條件 4、水的質量(三蒸) 5、滲透壓 6、營養條件 7、無菌條件二、培養基的分類1、平衡鹽液 2、天然培養基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培養基(化學成分清楚)三、R
測定溫度對微生物的影響實驗——法二
實驗方法原理溫度通過影響蛋白質、核酸等生物大分子的結構與功能以及細胞結構如細胞膜的流動性及完整性來影響微生物的生長,繁殖和新陳代謝。過高的環境溫度會導致蛋白質或核酸的變性失活,而過低的溫度會使酶活力受到抑制,細胞的新陳代謝活動減弱。每種微生物只能在一定的溫度范圍內生長,低溫微生物最高生長溫度不超過
絮凝技術在高細胞密度和高產物滴度的細胞培養中的應用
純化工藝精選|解決高細胞密度甜蜜的煩惱—絮凝技術隨著生物制藥技術的發展,高細胞密度和高產物滴度的細胞培養已經成為一種趨勢,這給傳統下游澄清工藝帶來了越來越大的負擔,使得我們傳統深層過濾器載量下降,整體純化效率降低。什么是絮凝技術?絮凝技術,是通過改變pH值或離子環境,誘導小的易堵塞雜質絮凝或沉淀的方
有關釀酒酵母的相關研究
單染色體酵母 2018年8月《自然》雜志在線發表了一篇論文,覃重軍研究團隊與合作者在國際上首次人工創建了單條染色體的真核細胞,中國科學家獨立創造了全新的自然界不存在的生命。? 研究人員歷經4年時間,通過15輪的染色體融合,最終成功創建了只有一條線型染色體的釀酒酵母菌株。經過代謝、生理、繁殖功
關于釀酒酵母的基本介紹
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又稱面包酵母或者出芽酵母。釀酒酵母是與人類關系最廣泛的一種酵母,用于制作面包和饅頭等食品及釀酒。釀酒酵母的細胞為球形或者卵形,直徑5-10μm。其繁殖的方法為出芽生殖。釀酒酵母與同為真核生物的動物和植物細胞具有很多相同的結構,又容易培
釀酒酵母的概念相關介紹
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又叫面包酵母或芽殖酵母。細胞大小為2.5~10x4.5-21um。一般呈球形、卵圓形、橢圓形,有的呈圓柱狀、檸檬形等。釀酒酵母細胞有兩種生活形態:單倍體和二倍體。酵母單倍體的繁殖比較簡單,一般是出芽生殖,當環境生存壓力較大時會死亡。二
微生物液體培養實驗——細菌培養的檢測
實驗材料細菌儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟一、利用計數板檢測?1. ?用一片干凈的蓋玻片蓋住一片干凈的計數玻片或者petraff-Hausser小室,參見下面。?2. ?用含少量培養液的吸管接觸蓋玻片的邊緣。?3. ?在相差顯微鏡400倍下觀察,并且按一個小方塊中所見的每個細菌大約相當于2x
測定pH對微生物的影響實驗1
測定pH對不同的微生物的影響實驗可以用于:(1)測量微生物適宜的生存條件;(2)尋找抑制微生物生長的pH。實驗方法原理pH 對微生物生命活動的影響是通過以下幾方面實現的:一是使蛋白質、核酸等生物大分子所帶電荷發生變化,從而影響其生物活性;二是引起細胞膜電荷變化,導致微生物細胞吸收營養物質能力改變;其
酵母菌的培養實驗1
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒葡萄糖儀器、耗材搖床錐形瓶離心機實驗步驟1. ?在30℃,氧氣充足和以葡萄糖作碳源的條件下,野生型釀酒酵母菌生長得十分良好。當酵母菌在試管中培養時,接種酵母菌貯液后應輕輕振蕩培養液以便菌體細胞分散均勻。2. ?在作大體積液體培養時,酵母菌在錐形瓶中生長較好,使用瓶底具隔板的
酵母菌的培養實驗
實驗材料?酵母菌試劑、試劑盒?葡萄糖儀器、耗材?搖床錐形瓶離心機實驗步驟 1.? 在30℃,氧氣充足和以葡萄糖作碳源的條件下,野生型釀酒酵母菌生長得十分良好。當酵母菌在試管中培養時,接種酵母菌貯液后應輕輕振蕩培養液以便菌體細胞分散均勻。2.? 在作大體積液體培養時,酵母菌在錐形瓶中生長較好,使用瓶底
抗臭氧型細菌大樣檢測液體培養基配方
中文名 抗臭氧型細菌大樣檢測液體培養基配方 英文名 Anti-Ozone Nutrient Broth 用途 適合于殘留氧化型消毒劑的食品、飲料、飲用水及其包裝物等的細菌的抗干擾定性測定用 標準 配方(g/L) (每升)?
抗臭氧型真菌大樣檢測液體培養基配方
中文名抗臭氧型真菌大樣檢測液體培養基(抗臭氧型霉菌液體培養基)配方 英文名Anti-Ozone Mold Liquid Medium用途適合于帶有臭氧的食品、飲料和飲用水等的真菌的抗干擾定性測定用,亦可供一般真菌增菌和培養用標準配方(g/L)配方(每升) 含量蛋白胨? ? ? ? ? ?5.0g 葡
可否使用與原先細胞培養條件不同之培養基?
不能更換培養基。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活。
霉菌液體培養基配方
中文名霉菌液體培養基配方 英文名Mold Liquid Medium用途霉菌液體培養基用于霉菌、酵母的增菌和培養。標準配方(g/L)?? 胨? 5g??葡萄糖 10g??磷酸二氫鉀 1g??硫酸鎂 0.5g??氯霉素 0.1g??最終pH 5.6±0.2原理胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族維生素;
細菌液體培養基配方
(1)肉湯液體培養基(固體培養基成分,不加瓊脂就是液體的了):1、成分:牛肉膏0.5g,蛋白胨1.0g,氯化鈉0.5g,蒸餾水100mL,pH7.2~7.5。2、制法:加熱溶解,調pH值,分裝于三角瓶中121℃,20min高壓滅菌。(2),LB培養基的配方如下:?蛋白胨(Tryptone) 10g/
液體培養基的配制原則介紹
根據培養目的需要選擇適宜的營養物質 由于微生物營養類型復雜,不同微生物有不同的營養要求。因此,要根據不同微生物的營養需求選擇適宜的營養物質,配制針對性強的培養基。 自養微生物有較強的合成能力,能以簡單的無機物如co2和無機鹽合成復雜的細胞物質。因此,培養自養微生物的培養基應由簡單的無機物組成
釀酒酵母的電穿孔轉化法實驗_材料的準備
實驗材料高分子量 DNA試劑、試劑盒TE 緩沖液儀器、耗材微量離心管實驗步驟一、單鏈載體 DNA 的制備1. 在 100 ml TE 緩沖液中溶解 1 g 高分子量 DNA,用磁力攪拌器于 4℃ 攪拌過夜。2. 用大直徑探頭以最大功率超聲處理 30 秒;應將探頭在溶液中持續移動,以保證超聲處理的均一
釀酒酵母的電穿孔轉化法實驗_材料的準備
實驗材料高分子量 DNA試劑、試劑盒TE 緩沖液儀器、耗材微量離心管實驗步驟一、單鏈載體 DNA 的制備1. 在 100 ml TE 緩沖液中溶解 1 g 高分子量 DNA,用磁力攪拌器于 4℃ 攪拌過夜。2. 用大直徑探頭以最大功率超聲處理 30 秒;應將探頭在溶液中持續移動,以保證超聲處理的均一
細菌在固體培養基、液體培養基和半固體培養基上的生...
細菌在固體培養基、液體培養基和半固體培養基上的生長特性 1.固體培養基 標本或液體培養物劃線接種到固體培養基表面后,單個細菌經分裂繁殖可形成一個肉眼可見的細菌集團,稱為菌落(colony)。 (1)菌落的形態特征: 大小、形狀(露滴狀、圓形、菜花樣、不規則等)、突起或扁平、凹陷、邊緣
生化實驗滴加液體石蠟原因
1、防止培養基成分揮發氰化鉀實驗:氰化鉀是劇毒藥物,使用時需加小心以免中毒。因此在做氰化鉀實驗時,需在實驗管和對照管同時滴加液體石蠟,滴加目的其一是為防止氰化鉀揮發,以免造成操作者中毒;第二是防止氰化鉀揮發后,致使藥物濃度降低,細菌生長,出現假陽性。2、創造厭氧環境(1)氨基酸脫羧酶實驗:進行氨基酸
生化實驗滴加液體石蠟原因
1、防止培養基成分揮發氰化鉀實驗:氰化鉀是劇毒藥物,使用時需加小心以免中毒。因此在做氰化鉀實驗時,需在實驗管和對照管同時滴加液體石蠟,滴加目的其一是為防止氰化鉀揮發,以免造成操作者中毒;第二是防止氰化鉀揮發后,致使藥物濃度降低,細菌生長,出現假陽性。2、創造厭氧環境(1)氨基酸脫羧酶實驗:進行氨基酸
牛血清在細胞培養基中的實驗步驟(二)
牛血清的質量要求隨著科學技術的發展和生活水平的不斷提高對生物醫藥產品的質量要求也越來越高,所以對制備工藝中所涉及到的各種原材料的質量標準要求也越來越高,特別是對用于細胞培養基中的主要天然成份――牛血清的質量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。(一)、WHO公布的《用動物細胞體外
牛血清在細胞培養基中的實驗步驟(一)
牛血清在細胞培養基中的實驗步驟?取HeLa細胞和Mel細胞(本來應該取正常的二倍體細胞和不太好養的腫瘤細胞,但是實驗室條件有限,本組做HeLa細胞),胰酶消化后,用無血清培養基(事先加雙抗)吹打成細胞懸液(避免以前血清的干擾)。計數。2.取4000個左右的HeLa細胞加入到每行的孔(在加之前要震蕩培
酵母細胞中質粒的加工實驗
定位突變質粒缺口修復技術和等位基因修復技術實驗材料酵母菌株試劑、試劑盒帶選擇標記的YRp或YCp質粒適當的限制性內切核酸酶相應選擇標記突變的酵母菌質粒標記的選擇培養基平板儀器、耗材培養皿實驗步驟1)將目的基因亞克隆到帶恰當的選擇標記的YRp或YCp質粒上。2) 在基因內部的兩個限制酶酶切位點上切割以
酵母細胞中質粒的加工實驗
實驗方法原理 在非選擇性生長條件下,大多數大腸桿菌/酵母菌穿梭載體的丟失頻率大約1%。 在本方案中含質粒的酵母菌株接種于非選擇性平板上以分離質粒并可得到單菌落。然后通過影印到選擇性平板上可以鑒別丟失了質粒的菌株實驗材料 含質粒的酵母菌株試劑、試劑盒 YPD或其他非選擇性液體培養基及平板CM缺失成分