應用優勢
■ 從乳品或肉類中快速萃取氨基糖苷類抗生素
■快速LC/MS/MS分析
■直接固相萃取(SPE)凈化
■低ppb檢測限值
沃特世解決方案
ACQUITY UPLC? 系統
ACQUITY? TQD 質譜儀
ACQUITY UPLC HSS PFP 色譜柱
Oasis? HLB 萃取柱
聚丙烯樣品瓶
關鍵詞
氨基糖苷類抗生素、固相萃取、乳品、牛肉、LC/MS/MS
引言
氨基糖苷類抗生素會作為獸藥被用于治療產肉和產乳動物，因此需要一種分析其在這些商品中殘留的有效分析方法。這類抗生素給殘留分析提出了巨大的挑戰。與其他大多數抗生素不同，這些化合物無法使用乙腈或其他有機溶劑從組織或乳品中萃取出來。在研究中，使用含有三氯乙酸(TCA)的水性緩沖液將氨基糖苷類抗生素從肉類組織或乳品中萃取出來。加入TCA能夠使蛋白質沉淀并抑制蛋白與這些分析物結合。進行LC/MS分析前，利用有效的固相萃取(SPE)凈化操作除去殘留的TCA，盡量減少共萃取干擾。通過使用Oasis HLB(高效、水可浸潤性反相吸收劑)，在牛奶和肉中可獲得良好的固相萃取收率和凈化效果。在隨后的分析中，使用ACQUITY UPLC HSS PFP色譜柱，在反相離子對模式下，可獲得出色的UPLC?分離性能。七氟丁酸(HFBA)用作離子配對試劑。該試劑具有揮發性且能與質譜法結合使用。
在全球范圍內，氨基糖苷類抗生素在乳品中的最大殘留限量(MRL)一般范圍是100 ~ 1000 μg/kg，如圖1所示。本應用紀要提供了一種適用于測定牛奶和牛組織中氨基糖苷類抗生素殘留在ppb水平的方法，該方法一部分是由參考文獻1和參考文獻2中的方法發展而來。
實驗
UPLC條件
系統： ACQUITY UPLC
色譜柱： ACQUITY HSS PFP 2.1 x 100 mm，1.8 μm 部件號186005967
進樣量： 30 μL
溫度： 35°C
流動相A： 20 mM HFBA水溶液
流動相B： 20 mM HFBA乙腈溶液
流速： 0.50 mL/min
梯度： 20% B初始條件，7分鐘內線性梯度增至80% B，保持8分鐘，濃度降回至20% B，持續8.1分鐘。重新平衡，保持10分鐘。
質譜條件
質譜儀： ACQUITY TQD
模式： 正離子電噴霧(ESI+)
毛細管電壓：3.0 kV
萃取錐孔電壓：3.0 V
離子源溫度：130 °C
錐孔氣體流速：20 L/h
脫溶劑溫度： 450 °C
脫溶劑氣體流速： 900 L/h
碰撞氣體： 氬氣，流速0.20 mL/min
表1匯總了本研究中使用的錐孔和碰撞參數和多反應監測(MRM)轉換。
