1.電泳結束后,將凝膠置于盛有試劑 A 的塑料容器中,試劑 A 的量要足夠覆蓋整塊凝膠。例如,一塊典型的 mini 膠(8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 IOOml 的試劑 A。
2.室溫下搖動凝膠 30 min。
3.棄去使用后的試劑 A,加入足夠覆蓋凝膠量的 SYPRORuby 染料,用鋁箔遮蓋好容器,室溫下搖動凝膠 90 mm 至過夜。
未使用過的 SYPRO Ruby 染料僅需染色約 2 h,突光掃描儀(MolecularDynamicsTyphoon8600 或類似產品)就能檢測到 Ing 條帶。若重復使用染料按步驟③染色 2 h,靈敏度將下降,只能檢測到約 Sng 蛋白含量的條帶。
4.棄去 SYPRO Ruby 染料(或者保存起來以備后用,見步驟③的注解)。
5.加人適量的試劑 B,室溫下搖動 30~60 min。
6.將熒光掃描儀設置在 523nm 處對凝膠掃描,或者將凝膠保存在適量的 2% 甘油中。
凝膠在 2% 甘油中可保存 6 個月,而且熒光信號不會減弱。
7.若要長期保存凝膠,應用干膠機或讓凝膠在空氣中干燥。若采用空氣干燥凝膠,需將凝膠放在兩張濕的玻璃紙中間,拉緊玻璃紙,待膠靜置于空氣中變干。空氣干燥后的凝膠可永久保存 展開 |