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  • 說明

    使用二種酶同時進行DNA切斷反應 (Double Digestion) 時,為了節省反應時間,通常希望在同一反應體系內進行。TaKaRa采用Universal Buffer表示系統,并對每種酶表示了在各Universal Buffer中的相對活性。盡管如此,在進行Double Digestion時,有時還會難以找到合適的Universal Buffer。

    本表以在pUC系列載體的多克隆位點處的各限制酶為核心,顯示了在Double Digestion可使用的最佳Universal Buffer條件。在本表中,各Universal Buffer之前表示的 [數字×] 是指各Universal Buffer的反應體系中的最終濃度。TaKaRa銷售產品中添附的Universal Buffer全為10倍濃度的緩沖液。終濃度為0.5×時反應體系中的緩沖液則稀釋至20倍,1×時稀釋至10倍,2×時稀釋至5倍進行使用。

    ■ 注意

    ◇ 1 μg DNA中添加10 U的限制酶,在50 μl的反應體系中,37℃下反應1小時可以完全降解DNA。

    ◇ 為防止Star活性的產生,請將反應體系中的甘油含量,盡量控制在10%以下。

    ◇ 根據DNA的種類,各DNA的立體結構的差別,或當限制酶識別位點鄰接時,有時會發生Double Digestion不能順利進行的可能。

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