試劑盒組成
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組分 |
50次 |
100次 |
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吸附柱和收集管 |
各50個 |
各100個 |
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裂解液Ⅰ |
12 mL |
24mL |
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裂解液Ⅱ |
12 mL |
24mL |
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析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
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洗滌液 |
9 mL |
18 mL |
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洗脫液 |
6 mL |
12 mL |
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消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
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說明書 |
1份 |
1份 |
產品介紹
BIOG RNA Stool Kit是我公司研發團隊專為從糞便中提取基因組RNA而設計，適用于不同來源的固態或液態糞便樣本。BIOG RNA Stool Kit采用了最新的離子膜技術并反復優化了裂解液和洗脫液配方，提取得到的RNA純度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂類、雜質污染，可以直接應用于Northern 雜交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文庫構建、體外翻譯等各種常規分子生物學實驗。
操作步驟：
請自行準備：無水乙醇、PBS、1.5mL離心管。
取出析出液和洗滌液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL無水乙醇；9mL加入51mL無水乙醇。
b) 洗滌液：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇。
c) 配制好的析出液如出現沉淀，可在37℃溶解，搖勻后使用。
取200mg的糞便于試管中(若糞便樣本為液態，取200μL于試管中)，加入2mL PBS充分振蕩混勻，300g離心5分鐘，收集上清；取收集的上清液1mL于1.5mL離心管中，12000 rpm離心5分鐘，棄上清后沉淀用1mL PBS重懸，振蕩混勻后，12000 rpm離心5分鐘，收集沉淀。
加入200μL裂解液Ⅰ，懸浮沉淀，37℃放置30分鐘。
加入200 μL 裂解液Ⅱ，20μL消化液，充分振蕩混勻，56℃水浴10 分鐘。
加入600μL析出液，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響RNA的提取與后續實驗。
將吸附柱放入收集管內，取上述溶液600μL轉入吸附柱內，靜置2 分鐘，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
將剩余400μL液體轉入上述吸附柱內，重復操作步驟7。
將吸附柱放回收集管內，加500μL洗滌液至吸附柱內，12,000 rpm 4℃離心1 分鐘，棄收集管內廢液。
將吸附柱放回收集管內，12,000 rpm 4℃離心2 分鐘，離去殘留的洗滌液。
取出吸附柱，放入新的1.5 mL 離心管內，加入30-100 μL洗脫液，靜置3分鐘，12,000 rpm 4℃ 離心2分鐘，收集RNA溶液。提取的RNA-70℃保存，或直接用于下一步實驗。
注意事項：
1、析出液、洗滌液含有刺激性化學物質，操作過程請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立
即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。
2、裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現象，置于37℃水浴中溶解即可。
儲存、運輸和有效期
本試劑盒可常溫運輸，室溫（15-25℃）保存，有效期為12個月，消化液請于-20℃存放，避免反復凍融，裂解液Ⅰ請于4℃存放。
質量控制
本產品經嚴格的質量檢驗證明，無生物污染
注意 本產品僅用于科研