尿海藻糖酶的酶活性的測定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI。加上0.1mL 0.25mmol/L的海藻糖,混合后于37℃溫育120min。生成的葡萄糖用POD-GOD方法測定,以每小時每升尿液中釋放多少umol的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度。3. 結果IshiharaR等測定健康組尿海藻糖酶的活性是26.6±14”umol·h-1.gcreatinine-1。......閱讀全文
尿海藻糖酶的酶活性的測定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI
尿海藻糖酶的酶含量的測定
1. 原理利用抗海藻糖酶單克隆抗體的夾心ELISA方法檢測酶蛋白的含量。2. 步驟國外報導用重組海藻糖酶和人工合成的海藻糖酶多肽片段制備出抗人海藻糖酶的單克隆抗體,然后經過包被、封閉等步驟,用夾心ELISA方法測定出酶蛋白的濃度。3. 結果IshiharaR等用ELISA法測定健康組尿海藻糖酶蛋白的
尿海藻糖酶的測定方法
酶活性的測定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標
尿海藻糖酶的測定方法
一、酶活性的測定 1. 原理 利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。 2. 步驟 將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱,以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,將體積調整到1
尿海藻糖酶定量測定的技術要點
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法(HPLC)分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性(反相)和電荷(離子交換)方面的差別來實現樣品的分離
尿海藻糖酶定量測定的技術要點
1. 人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備 國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法(HPLC)分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性(反相)和電荷(離子交換)方面的差別來實現樣
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重組海藻糖酶的制備
國外采用標準9-甲氧羰基熒光素固相合成法合成氨基酸殘基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色譜法(HPLC)分析并提純多肽。HPLC主要是根據分子的親水性(反相)和電荷(離子交換)方面的差別來實現樣品的分離的。反相HPLC的優點是分辨率大。利用分子生物學方法
海藻糖酶的臨床應用
急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說,急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論:急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍,而ELI
海藻糖酶的特性介紹
理化特性 海藻糖酶是一種胞外酶,位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣,國際酶學編號為EC3.2.1.28,屬于水解酶類,它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37,在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物,腎臟中提純,經SDS-
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶,位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣,國際酶學編號為EC3.2.1.28,屬于水解酶類,它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37,在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物,腎臟中提純,經SDS-PAGE電泳顯示
海藻糖酶的理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶,位于哺乳動物腎和小腸上皮細胞膜的刷狀緣,國際酶學編號為EC3.2.1.28,屬于水解酶類,它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖,且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點為4.37,在正常體液pH7.4時帶有大量負電荷。該酶已從哺乳動物,腎臟中提純,經SDS-PAGE電泳顯示
海藻糖酶的臨床應用
急、慢性腎小球疾病慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說,急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論:急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍,而ELI
蔗糖酶的活性怎么測定
LS說的那個是定性分析,只能從程度上大概看出結果,不能得出比較精確的值,一般用比色法,分光光度法,和熒光法測出的較好,不過這個對儀器的要求高了
關于海藻糖酶的臨床應用介紹
急、慢性腎小球疾病 慢性腎小球腎炎、腎病綜合征和慢性腎衰患者的尿海藻糖酶活性均升高。已有報道說,急性腎病綜合征患者尿液NAG活性升高。這些作者得出結論:急性腎病綜合征患者可能有腎小管損害。其他調查也顯示NAG活性升高和腎病綜合征的復發有關。盡管腎小管損害患者尿NAG活性比對照組高1.5-5倍,
海藻糖酶的基本信息
海藻糖酶(trehalase)是葡萄糖苷酶(glucosidase)的一種,對海藻糖有特異作用,水解后成為2個分子的葡萄糖,EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人,除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外,在血漿α2-球蛋白部分中,也可檢出其活性,特別是在腎臟中活性很強。
海藻糖酶的生物學特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用,有報道,缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉,而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說,尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。
海藻糖酶的生物學特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用,有報道,缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉,而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報道說,尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關。
概述海藻糖酶缺乏的發病機制
嬰兒因為遺傳的因素可有蔗糖酶及異麥芽糖酶缺乏。蔗糖-異麥芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖,而異麥芽糖缺陷是繼發的。有研究顯示該酶在細胞內的處理有缺陷,堆積在內質網內。酶復合物在高爾基復合體內被阻斷,而改變了的酶卻被轉運至細胞表面。由于以上各種因素,這種單基因疾病可呈異質性。該酶基因定位于染色體3q,
海藻糖酶的國內應用前景
近年來的研究發現,腎小管-間質損害是決定腎功能減退的主要因素,而近端腎小管的損害義是腎功能惡化的重要原因。早期發現腎小管損害是錳床診斷和治療的關鍵,而尿海藻糖酶在腎近端小管損害方面具有早期、特異、靈敏的診斷價值,目前國內實驗室尚未開展此項檢測,臨床應用前景很大。當前首要的工作是用分子生物學方法制
海藻糖酶的基本信息介紹
海藻糖酶(trehalase)是葡萄糖苷酶(glucosidase)的一種,對海藻糖有特異作用,水解后成為2個分子的葡萄糖,EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人,除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外,在血漿α2-球蛋白部分中,也可檢出其活性,特別是在腎臟中活性很強。
關于海藻糖酶缺乏的基本介紹
海藻糖酶缺乏,是屬于二糖酶缺乏癥臨床分類之一。本病又稱雙糖不耐受癥,系指各種先天性或后天性疾病,使小腸黏膜刷狀緣雙糖酶缺乏,使雙糖的消化、吸收發生障礙,進食含有雙糖的食物時發生的一系列癥狀和體征。 海藻糖酶缺乏:正常人小腸黏膜內有多種二糖酶,如乳糖酶能將乳糖分解為半乳糖及葡萄糖;麥芽糖酶能將麥
海藻糖酶的基本信息概述
通過抑制內源海藻糖酶水平來修飾海藻糖-6-磷酸水平從而調節代謝。 本發明在細胞代謝碳流調節領域內。已經發現導入細胞內糖類海藻糖-6-磷酸(T-6-P)有效來源的變化會誘導體內細胞、組織和器官的發育和/或組成的變化。這些變化可通過抑制內源海藻糖酶來誘導,該酶能夠將海藻糖水解成兩個葡萄糖組分。
概述海藻糖酶缺乏的發-病機制
嬰兒因為遺傳的因素可有蔗糖酶及異麥芽糖酶缺乏。蔗糖-異麥芽糖吸收不良的缺陷主要在蔗糖,而異麥芽糖缺陷是繼發的。有研究顯示該酶在細胞內的處理有缺陷,堆積在內質網內。酶復合物在高爾基復合體內被阻斷,而改變了的酶卻被轉運至細胞表面。由于以上各種因素,這種單基因疾病可呈異質性。該酶基因定位于染色體3q,
酶活性的測定實驗
連續性檢測 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示,或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量
酶活性測定的方式
酶促反應速度的測定可采用兩種方式: 一、測定完成一定量反應所需的時間; 二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法,后者稱為動力學法。 終點法 該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據反應進行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時間長短來估計酶的活力。 其
酶活性的測定實驗
酶活性的測定可應用于:(1)酶動力學的研究;(2)酶抑制的研究。實驗方法原理1.酶的量或濃度可以用摩爾量表示,或者用酶單位的活性表示。酶活力=每單位時間轉化的底物摩爾數=速率×反應體積。酶活性是存在的活性酶量的量度,取決于指定的條件。SI單位是katal,1 katal = 1 mol /s,更實際
酶活性的測定方法
一般采用測定酶促反應初速度的方法來測定活力,因為此時干擾因素較少,速度保持恒定。反應速度的單位是濃度/單位時間,可用底物減少或產物增加的量來表示。因為產物濃度從無到有,變化較大,而底物往往過量,其變化不易測準,所以多用產物來測定
抗海藻糖酶單克隆抗體的制備
通過腹腔注射加佐劑的重組蛋白或合成的多肽來免疫8周齡的雌性小鼠BALB/c,第一次免疫問隔兩周后,每周連續注射3-4次。最后一次注射后3-4天殺死小鼠,用改良的Kohler和Milstein方法將脾細胞與B細胞瘤株P3-X63-Ag8融合。細胞融合產生8種雜交瘤克隆株:KM2275、KM2276、K
關于海藻糖酶缺乏的發病原因分析
正常人小腸黏膜內有多種二糖酶,如乳糖酶能將乳糖分解為半乳糖及葡萄糖;麥芽糖酶能將麥芽糖分解為葡萄糖及異麥芽糖;異麥芽糖酶能將異麥芽糖分解為兩個分子的葡萄糖;蔗糖酶能分解蔗糖為葡萄糖及果糖;還有海藻糖酶能分解海藻糖為兩個分子的葡萄糖。因為某些原因使二糖酶缺乏,從而二糖的消化吸收發生障礙導致腹瀉。臨
海藻糖酶的基本信息及分布情況
海藻糖酶(trehalase)是葡萄糖苷酶(glucosidase)的一種,對海藻糖有特異作用,水解后成為2個分子的葡萄糖,EC3.2.1.28。廣泛存在于細菌、霉菌、植物和動物中。在人,除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外,在血漿α2-球蛋白部分中,也可檢出其活性,特別是在腎臟中活性很強。