以雙鏈DNA為模板的體外誘變：用DpnⅠ選擇突變體實驗
實驗材料 帶 hsdR17 基因型的感受態大腸桿菌菌株試劑、試劑盒 ATP含有四種 dNTF 的混合溶液誘變緩沖液NaOHNaACTE噬菌體 T4DNA 連接酶噬菌體 T4 多核苷酸激酶DpnI 限制性內切酶熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠寡核苷酸引物質粒 DNA儀器、耗材 帶障蔽的自動微量移液器用吸頭微型離心管微量滴定板可調式移液器能設定所需擴墻參數的熱循環儀實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液，緩沖液和試劑的成分請參閱附錄 1。將貯存液稀釋到合適的濃度。ATP(10 mmol/L)含有四種 dNTF 的混合溶液，每一種 dNTP 濃度為 5 mmol/L10X 長 PCR 緩沖液（用于混合的 DNA 聚合酶）500 mmol/L Tris-Cl(室溫下 pH9.0)160 mmol/L 硫酸按25 mmol/L MgCl21.5 mg/ml BSA由廠商提供的緩沖液和熱穩定 DNA 聚合酶緩沖液可替代上述緩沖液。或10x 誘變緩......閱讀全文
以雙鏈－DNA－為模板的體外誘變：用－DpnⅠ選擇突變體實驗
本方案和方案 4 是以變性質粒 DNA 為模板，使用兩條寡核苷酸和高保真聚合酶引導 DNA 合成。本方案中，經多輪熱循環全長雙鏈質粒 DNA 將以線性形式擴增，產生一種 DNA 雙鏈上帶交錯缺口的突變質粒（Hemsleyetal.1989)。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J
以雙鏈－DNA－為模板的體外誘變：用－DpnⅠ選擇突變體實驗
實驗材料 帶 hsdR17 基因型的感受態大腸桿菌菌株試劑、試劑盒 ATP含有四種 dNTF 的混合溶液誘變緩沖液NaOHNaACTE噬菌體 T4DNA 連接酶噬菌體 T4 多核苷酸激酶DpnI 限制性內切酶熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠寡核苷酸引物質粒 DNA儀器、耗材 帶障蔽的自動微量移液器用
以雙鏈－DNA－為模板的體外誘變：用－DpnⅠ選擇
? ? ? ? ? ? 實驗材料 帶 hsdR17 基因型的感受態大腸桿菌菌株 試劑、試劑盒 ATP 含有四種 dNTF 的混合溶液
制備DNA測序模板實驗——雙脫氧測序的雙鏈質粒DNA的堿變性
實驗材料DNA試劑、試劑盒NaOHEDTA乙酸鈉乙醇儀器、耗材離心管離心機搖床實驗步驟1. ?加入約0.5 pmol 重組質粒DNA于0.5 ml 微量離心管中，如果體積大于20 μl 應以乙醇沉淀，重溶于20 μl 水。2. ?如果體積小于20 μl，用水補足20 μl。3. ?加入2 μl 2
大腸桿菌－DNA－－I－Klenow－片段及單鏈－DNA－模板進行雙脫氧實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 dATP 去離子蒸餾水 EDTA 延伸 終止混合液 和示蹤混合液 甲酰胺上樣緩沖液 Tris-Cl
mRNA的S1作圖實驗——雙鏈模板
實驗材料mRNA試劑、試劑盒NaOHEDTA乙酸銨儀器、耗材離心機蒸發器實驗步驟1. ?對于18 μg DNA溶液，加入10×NaOH/EDTA溶液至1×的濃度，在室溫放置5 min。2. ?加入1.5倍體積的1.5 mol/l pH4.5乙酸銨緩沖液中和。3. ?加2.5倍體積乙醇-70℃沉淀15
qpcr設計引物以mrna為模板還是以cdna為模板
當然是cDNA了，mRNA還沒有被剪切就有可能有內含子，如果你的基因沒有內含子的話，DNA，cDNAmRNA都是無所謂的
用－PCR－來制備編碼隨機肽的雙鏈－DNA－文庫實驗
使用合成的寡核苷酸構建文庫時，PCR 有兩個重要的作用。第一，用與特定側翼序列退火的引物來擴增文庫，僅用少量的不同模板，就可以得到大量的 PCR 產物。第二，若要產生文庫 DNA 的復雜互補鏈，PCR 合成法是有效的方法。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒限制
用－PCR－來制備編碼隨機肽的雙鏈－DNA－文庫實驗
試劑、試劑盒?限制性內切酶和緩沖液滅菌雙蒸水Tris-HCl生物素標記的 PCR 引物儀器、耗材?鏈霉抗生物素蛋白磁性珠瓊脂糖凝膠電泳所需的試劑和設備實驗步驟?一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑滅菌雙蒸水（ddH20)10 mmol/LTris-HCl，pH8.02. 酶和酶緩沖液限制性內切酶和緩沖液
用－PCR－來制備編碼隨機肽的雙鏈－DNA－文庫實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 限制性內切酶和緩沖液 滅菌雙蒸水 Tris-HCl 生物素標記的 PCR 引物 儀器、耗材
制備DNA測序模板實驗——制備單鏈M13噬菌體DNA
本實驗包含了用于制備適用于雙脫氧測序的模板及適用于末端標記和化學測序的DNA的實驗方案。所有用于雙脫氧測序的雙鏈模板在與引物退火前必須變性，在一般應用上，堿變性在測序中的效果比熱變性好。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LBTEM13聚乙二醇容易讓頂層瓊脂乙酸鈉乙醇儀器、耗材巴斯德吸管試管離心機實驗步驟1
用大腸桿菌－DNA－聚合酶－I－Klenow－片段及單鏈－DNA－模板進行...
用大腸桿菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段及單鏈 DNA 模板進行雙脫氧測序實驗試劑、試劑盒 dATP去離子蒸餾水EDTA延伸 終止混合液和示蹤混合液甲酰胺上樣緩沖液Tris-Cl酶和緩沖液大腸桿菌 DNA 聚合酶ⅠKienow 片段核酸和寡聚核苷酸寡核苷酸引物單鏈 DNA 模板放射性化合物
雙脫氧鏈終止法測序用變性模板的制備實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙酸銨 氯仿 異戊醇 DMSO 乙醇 NaOH酚 測序反應緩沖液 瓊脂糖凝膠
雙脫氧鏈終止法測序用變性模板的制備實驗
試劑、試劑盒 乙酸銨氯仿異戊醇DMSO乙醇NaOH酚測序反應緩沖液瓊脂糖凝膠寡核苷酸引物閉環雙鏈質粒 DNA儀器、耗材 干冰-乙醇浴65°C 水浴實驗步驟 材料緩沖液和溶液試劑、緩沖液、儲液的組成參見附錄 1, 儲液使用前稀釋到適當濃度。乙酸銨（5mol/L, 非緩沖，pH~7.4)氯仿：異戊醇（2
雙脫氧鏈終止法測序用變性模板的制備實驗
雙脫氧鏈終止法變性模板 分子克隆實驗指南（第三版）下冊 第12章 方案2下面通過堿變性質粒 DNA 的方法應與方案 3 聯合使用，因在此過程中采用測序酶催化雙脫氧測序反應。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒乙酸銨氯仿異戊醇DMSO
制備DNA測序模板實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 LBTEM13聚乙二醇容易讓頂層瓊脂乙酸鈉乙醇儀器、耗材 巴斯德吸管試管離心機實驗步驟 1. ?如果起始用M13復制型DNA或M13單鏈DNA，以0.5 ng 重組M13mp復制型DNA或5~10 ng 單鏈DNA轉化40 μl ?感受態大腸桿菌DH5αF'株
制備DNA測序模板實驗
制備單鏈M13噬菌體DNA 小量裂解物中制備λ噬菌體DNA 雙脫氧測序的雙鏈質粒DNA的堿變性 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌
雙鏈互補DNA的定義
中文名稱雙鏈互補DNA英文名稱double-strand cDNA;dscDNA定 義以雙鏈互補DNA為模板合成的雙鏈DNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
雙鏈DNA的結構特點
中文名稱雙鏈DNA英文名稱double-stranded DNA;dsDNA定 義由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
雙鏈DNA的結構特點
中文名稱雙鏈DNA英文名稱double-stranded DNA;dsDNA定 義由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
DNA雙鏈末端的概念
中文名稱平端英文名稱blunt end定 義DNA雙鏈末端平齊而無突出單鏈。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
用于－PCR－的模板－DNA－制備實驗
酚-氯仿法提取石蠟組織中 DNA 改進的石蠟切片 DNA 提取方法 直接法（DNA 免提法） 冰凍片 含血標本 胸腹水或尿液 ? ? ? ? ? ?
用于－PCR－的模板－DNA－制備實驗
實驗方法原理 實驗步驟 1. 10 mm 厚石蠟切片 10～15 張，置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脫蠟 二甲苯 1200 μl，9000 r/min，8 min×3。3. 脫水無水乙醇 1200 μl，9000 r/min，5 min×3。4. 打開 Eppendor
免疫學實驗抗雙鏈DNA抗體介紹
抗雙鏈DNA抗體介紹： 抗雙鏈DNA抗體(抗ds DNA)是抗DNA抗體中的一種。其反應位點位于DNA脫氧核糖磷酸框架上。抗ds DNA主要出現于SLE患者的血清中，對SLE患者的組織器官損傷有致病作用。在SLE患者血循環中，大分子的DNA濃度顯著高于正常人，DNA還可與多種器官的微血管結構包
什么是模板鏈？
是DNA分子在復制過程中，由雙螺旋結構解旋后解開的兩條單鏈，包含一條模板鏈和一條編碼鏈。
模板鏈的基本結構
1、DNA的堿基互補配對原則：A與T配對，G與C配對。?2、DNA復制：是指以親代DNA分子為模板來合成子代DNA的過程。DNA的復制實質上是遺傳信息的復制。3、解旋：在ATP供能、解旋酶的作用下，DNA分子兩條多脫氧核苷酸鏈配對的堿基從氫鍵處斷裂，于是部分雙螺旋鏈解旋為二條平行雙鏈，解開的兩條單鏈
細胞化學詞匯雙鏈DNA
中文名稱：雙鏈DNA英文名稱：double-stranded DNA;dsDNA定 義：由兩條DNA單鏈通過堿基互補作用而構成的DNA分子。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
雙鏈DNA探針標記法
分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連
快速－PCR－定點突變實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這種 PCR-SDM 方法的要點包括如下幾個方面。1. 使用的模板濃度有所增加，這樣就可以減少循環數，因此減少了非特異產物擴增的可能性。2. 加入了 Taq Extender, 擴增較長的 PCR 產物時產量和可靠性都有
基因表達輪廓（gene－expressed－profile）技術1
基因表達譜或基因表達輪廓（gene expressed profile）技術就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、連接、PCR及分子雜交等分子生物學基礎操作技術，將某一生物材料在某一特定階段表達的基因全部展示出來，通過測序及與數據庫比較或通過目標和對照樣品中所表達基因的比較，可以找出特異表達