肽質量指紋圖譜—MALDITOF法鑒定蛋白質實驗（二）
1. 目標樣本沉積 1 ) 經典干燥液滴法( 1 ) 半飽和氰基-4-羥基肉桂酸（約 5 mg/ml) 的配制：將 α-氰基-4-羥基苯甲酸溶解在 300 μl 1 : 1 乙腈/ TFA 溶 液（超聲 10 min) 。離心幾秒鐘得到上清液。取 200 μl 上清液加到微量離心管中，并加入相同體積（200 μl ) 的 1 : 1 乙腈/TFA 溶液，就能配制成獲得半飽和的 α-氰基-4-羥基肉桂酸。( 2 ) 取 0.8 μl 消化溶液和 0.8 μl 基質加到微量離心管中，快速混合（避免在吸管尖結晶）。取 0.8 μl 混合液滴到 MALDI 標基上，其余的 0.8 μl 混合液可滴在 MALDI 標基的另一個位置。吸管尖頭不要接觸到標基。( 3 ) 讓混合液自然干燥并結晶出來（見注釋 8) 。2 ) 在疏水標基上干燥液滴法（見注釋 9)( 1 ) 準備 α-氰基-4-羥基肉桂酸：稱取 10 mg 的 α......閱讀全文
肽質量指紋圖譜—MALDITOF－法鑒定蛋白質實驗（二）
1. 目標樣本沉積?1 ) 經典干燥液滴法( 1 ) 半飽和氰基-4-羥基肉桂酸（約 5 mg/ml) 的配制：將 α-氰基-4-羥基苯甲酸溶解在 300 μl 1 : 1 乙腈/ TFA 溶 液（超聲 10 min) 。離心幾秒鐘得到上清液。取 200 μl 上清液加到微量離心管中，并加入相同
肽質量指紋圖譜—MALDITOF－法鑒定蛋白質實驗
實驗材料測序級豬胰蛋白酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒碳酸氫銨 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?碳酸氫銨
肽質量指紋圖譜—MALDITOF－法鑒定蛋白質實驗
實驗材料測序級豬胰蛋白酶試劑、試劑盒碳酸氫銨碳酸氫銨緩沖液乙腈 碳酸氫銨緩沖液消化緩沖液儀器、耗材真空離心機烤箱實驗步驟許多凝膠染色方法適用于后續的 MALDI-TOF 肽質量指紋圖譜（PMF ) 分析。在第 14 章已經比較討論了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 膠內消化凝膠消化方法改編自 Je
肽質量指紋圖譜—MALDITOF－法鑒定蛋白質實驗（一）
實驗材料?測序級豬胰蛋白酶試劑、試劑盒?碳酸氫銨碳酸氫銨緩沖液乙腈 碳酸氫銨緩沖液消化緩沖液儀器、耗材?真空離心機烤箱實驗步驟 許多凝膠染色方法適用于后續的 MALDI-TOF 肽質量指紋圖譜（PMF ) 分析。在第 14 章已經比較討論了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 膠內消化凝膠消化方法改編
方案13－利用化學印刷法進行肽質量指紋圖譜分析實驗
實驗材料細胞或所研究的蛋白質試劑、試劑盒ACTH 肽段樣品變性緩沖液直接藍-71等電聚焦平衡緩沖液碘乙酰胺基質緩沖液辛基-吡喃葡萄糖修飾的豬胰蛋白酶三丁基膦儀器、耗材離心機化學打印儀導電膠帶濕盒固定化pH梯度膠條MALDI 板質譜儀NuPAGE離線掃描儀PVDF 膜實驗步驟一、樣品的 2DPAGE
一文了解肽質量指紋圖譜原理
肽質量指紋譜分析也稱肽指紋圖譜，是目前蛋白質組研究中鑒定蛋白較為常用的方法。 由于每種蛋白質的氨基酸序列（一級結構）都不同，蛋白質被酶水解后，產生的肽片段序列也各不相同，其肽混合物質量數亦具特征性，所以稱為指紋譜，可用于蛋白質的鑒定，即用實驗測得的蛋白質酶解肽段質量數在蛋白質數據庫中檢索，尋找
關于肽指紋圖譜測定的相關介紹
質譜技術作為蛋白質組研究的三大支撐技術之一，除了用于多肽，蛋白質的分子量測定外，還廣泛的應用與肽指紋圖譜測定及氨基酸序列測定。 肽指紋圖譜（Peptide Mass Fingerprinting PMF）測定是對蛋白酶解或降解后所得多肽混合物進行質譜分析的方法。質譜分析所得肽斷與多肽蛋白數據庫
基質輔助激光解吸飛行時間質譜儀的優點
根據MALDI- TOF MS的原理，MALDI-TOF MS具有靈敏度高、準確度高、分辨率高、圖譜簡明、質量范圍廣及速度快等特點，在操作上制樣簡便、可微量化、大規模、并行化和高度自動化處理待檢生物樣品，而且在測定生物大分子和合成高聚物應用方面有特殊的優越性。近年來已成為檢測和鑒定多肽、蛋白質、多糖
基質輔助激光解吸飛行時間質譜儀的優點
根據MALDI -TOF MS的原理，MALDI-TOF MS具有靈敏度高、準確度高、分辨率高、圖譜簡明、質量范圍廣及速度快等特點，在操作上制樣簡便、可微量化、大規模、并行化和高度自動化處理待檢生物樣品，而且在測定生物大分子和合成高聚物應用方面有特殊的優越性。近年來已成為檢測和鑒定多肽、蛋白質、
蛋白鑒定方法之質譜相關技術
質譜已成為連接蛋白質與基因的重要技術，開啟了大規模自動化的蛋白質鑒定之門。 用來分析蛋白質或多肽的質譜有兩個主要的部分，1）樣品入機的離子源，2）測量被介入離子的分子量的裝置。 首先是基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜（MALDI-TOF）為一脈沖式的離子化技術。 它從固相標本中產生離子，并在飛
微生物質譜儀檢測原理
微生物質譜儀檢測原理如下：微生物的質譜鑒定是一種基于細菌全細胞蛋白質組指紋圖譜分析的技術，與Sherlock全自動微生物鑒定系統的細胞脂肪酸成分分析相類似，質譜分析亦需要通過專門的數據分析和專家系統對未知細菌的特殊蛋白圖譜與菌種文庫中收集的菌種蛋白質組指紋圖譜進行比較。由于微生物質譜分析的蛋白質大分
微生物質譜儀檢測原理
微生物質譜儀檢測原理如下：微生物的質譜鑒定是一種基于細菌全細胞蛋白質組指紋圖譜分析的技術，與Sherlock全自動微生物鑒定系統的細胞脂肪酸成分分析相類似，質譜分析亦需要通過專門的數據分析和專家系統對未知細菌的特殊蛋白圖譜與菌種文庫中收集的菌種蛋白質組指紋圖譜進行比較。由于微生物質譜分析的蛋白質大分
DNA指紋圖譜分析（圖）（二）
DNA指紋圖譜法的基本操作：從生物樣品中提取DNA（DNA一般都有部分的降解），可運用PCR技術擴增出高可變位點（如VNTR系統，串聯重復的小衛星DNA等）或者完整的基因組DNA，然后將擴增出的DNA酶切成DNA片斷，經瓊脂糖凝膠電泳，按分子量大小分離后，轉移至尼龍濾膜上，然后將已標記的小衛星DNA
質譜技術在蛋白組研究中的應用（一）
[摘要] 質譜對于現代蛋白質化學研究是一項重要的技術。也可用于蛋白組分析,在同一時間監控上千種蛋白的表達情況。首先蛋白質混合物可以用雙向凝膠電泳分開，再用質譜及隨后的蛋白質數據庫檢索對單個蛋白進行鑒定和分析。最近幾年，質譜領域取得了令人鼓舞的進展，使得全自動、高通量的蛋白檢測成為可能。質譜也
分子指紋圖譜庫讓薰衣草有了“親子鑒定”
風吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客絡繹不絕。游客誰說得清引進薰衣草50年后品種變異了嗎？同樣當過游客的新疆農業大學農學院副教授蘇秀娟團隊說得清。 5月8日，來自該大學的消息稱，蘇秀娟團隊歷時4年，構建了新疆薰衣草主栽品種的分子指紋圖譜庫。利用分子指
分子指紋圖譜庫讓薰衣草有了“親子鑒定”
風吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客絡繹不絕。游客誰說得清引進薰衣草50年后品種變異了嗎？同樣當過游客的新疆農業大學農學院副教授蘇秀娟團隊說得清。圖片來源于網絡 5月8日，來自該大學的消息稱，蘇秀娟團隊歷時4年，構建了新疆薰衣草主栽品種的分子指紋圖
分子指紋圖譜庫讓薰衣草有了“親子鑒定”
科技日報烏魯木齊5月8日電 （何萌 記者朱彤）風吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客絡繹不絕。游客誰說得清引進薰衣草50年后品種變異了嗎？同樣當過游客的新疆農業大學農學院副教授蘇秀娟團隊說得清。 5月8日，來自該大學的消息稱，蘇秀娟團隊歷時4年，構
微生物鑒定方法代謝指紋法
目前常見的微生物鑒定原理有以下幾種：1. 酸堿反應：細菌代謝碳水化合物，一般產生酸性物質；分解蛋白質或氨基酸，則產生堿性物質，根據不同細菌的理化性質不同，測定細菌的分解底物導致PH值變化而產生的不同顏色，來判斷菌種。2. 酶譜分析：根據細菌生長產生酶的特性，在測定底物中加入基質。使其與細菌生長過程中
微生物鑒定方法——代謝指紋法
目前常見的微生物鑒定原理有以下幾種：1. 酸堿反應：細菌代謝碳水化合物，一般產生酸性物質；分解蛋白質或氨基酸，則產生堿性物質，根據不同細菌的理化性質不同，測定細菌的分解底物導致PH值變化而產生的不同顏色，來判斷菌種。2. 酶譜分析：根據細菌生長產生酶的特性，在測定底物中加入基質。使其與細菌生長過程中
微生物鑒定方法代謝指紋法
目前常見的微生物鑒定原理有以下幾種：1. 酸堿反應：細菌代謝碳水化合物，一般產生酸性物質；分解蛋白質或氨基酸，則產生堿性物質，根據不同細菌的理化性質不同，測定細菌的分解底物導致PH值變化而產生的不同顏色，來判斷菌種。2. 酶譜分析：根據細菌生長產生酶的特性，在測定底物中加入基質。使其與細菌生長過程中
【分享】質譜分析蛋白的原理與方法
質譜技術具有較好的靈敏度、準確度，能準確測定蛋白質。目前質譜主要測定蛋自質一級結構包括分子量、肽鏈氨基酸排序及多肽或二硫鍵數目和位置，在對蛋白質結構分析的研究中占據了重要的地位。[1,2]質譜有進樣器、離子源、質量分析器、離子檢測器、控制電腦及數據分析系統等組成。傳統的質譜僅用于小分子揮發物質
布魯克道爾頓開發出新型微生物快速鑒定系統
歐洲頂級臨床診斷實驗室集團——斯耶萊柏集團(Synlab Group)在2009年12月5日表示，已開發出新的基于蛋白質組的微生物快速鑒定系統——MALDI Biotyper微生物鑒定系統——該系統將從2010年裝備其旗下遍布歐洲的70余家診斷實驗室。該鑒定系統由生命科學和分析儀器領域出色的領導
島津在ASMS發布小型化臺式MALDI8020
2017年6月5日，島津發布了MALDI-8020，這標志著島津又回到了臺式基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MALDI-TOF MS）。儀器通過創新的設計，節省空間的MALDI-8020可實現更大、更昂貴的MALDI-TOF型號的相似性能規格，但占地面積更小。MALDI-8020長度為1.06
蛋白的常用蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。 “滿天星”式的2
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時
蛋白質組鑒定技術
?如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗力，不
蛋白質組鑒定技術簡述
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定。在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達。并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗力，不
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗
幾種常用的蛋白鑒定方法
幾種常用的蛋白鑒定方法 傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的 comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力，不適合高流通量的篩選。 目前，所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。