酶聯免疫吸附(ELISA)實驗
酶聯免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。(2)研究抗酶抗體的合成。(3)顯現微量的免疫沉淀反應。(4)定量檢測體液中抗原或抗體成份。實驗方法雙抗體夾心法(測抗原)間接法(測抗體)競爭法測抗原實驗方法原理圖1. 雙抗體夾心法測抗原示意圖 本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。 這種方法欲測的抗原必須有兩個可以與抗體結合的部位,因為其一端要包被于固相載體上的抗體作用,而另一端則要與酶標記特異性抗體作用。因此,不能用于分子量小于5000的半抗原之類的抗原測定。我們用在霍亂腸毒素的測定。HbSAg及HbS的測定。實驗材料血清 血漿 體液 試劑、試劑盒碳酸鹽包被緩沖液 抗體球蛋白 ......閱讀全文
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)——酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)
實驗材料血液樣品細胞樣品試劑、試劑盒70%乙醇PBS脫脂奶粉鏈霉親和素檢測抗體包被抗體儀器、耗材PVDF膜96孔培養板硝基纖維素底板免疫斑點板酶標板實驗步驟一、包被96孔板?用70%乙醇浸潤96孔板中的PVDF膜30 s?加入捕獲抗體(PBS稀釋),4℃過夜?倒空板中包被液,輕輕在紙上拍干,用PBS
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)_酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)2
實驗方法原理ELISPOT技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯斑點顯色的方式將其表現出來。實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSPBST乙醇包被抗體封閉液抗體稀釋液檢測抗體酶聯親和素AEC顯色液PHA刺激物U-Cytech無血清培養基儀器、耗材ELISPOT讀數儀超凈工作
酶免疫分析及酶聯免疫吸附實驗
這篇簡短的通訊回顧了了EIA和ELISA的歷史背景,這兩種分析方法是由瑞典斯德哥爾摩大學的Perlmann, Engvall教授以及荷蘭的Schuurs和vanWeemen教授獨立而同時創造完成的。 當今,在全球醫學實驗室里廣泛應用的全自動分析儀每日可以檢測大量的病人標本,其中很多儀器都是運用酶標記
酶聯免疫反應吸附試驗(ELISA)共有幾種類型
(一)雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。(3)加酶標抗體:使固
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)
實驗材料 血液樣品細胞樣品試劑、試劑盒 70%乙醇PBS脫脂奶粉鏈霉親和素檢測抗體包被抗體儀器、耗材 PVDF膜96孔培養板硝基纖維素底板免疫斑點板酶標板實驗步驟 一、包被96孔板?用70%乙醇浸潤96孔板中的PVDF膜30 s?加入捕獲抗體(PBS稀釋),4℃過夜?倒空板中包被液,輕輕在紙上拍干,
什么因素會影響酶聯免疫(ELISA)實驗?
素質因素實驗室人員的素質主要包括五個方面:思想素質、文化素質、技術素質、心理素質、身體素質。首先應具備一個良好的思想素質,因為我們的服務對象是人,我們的道德水平直接關系到人們的健康和生命安危,如果馬馬虎虎。三心二意,難免會有差錯事故發生,我們應該熱愛專業,耐心細致。在工作中如標本混淆、張冠李戴、報告
酶聯免疫斑點試驗的實驗目的
中文名稱酶聯免疫斑點試驗英文名稱enzyme-linked immunospot assay;ELISPOT assay定 義一種酶聯免疫技術。用于測定分泌特異性抗體或細胞因子的單個細胞對特異性抗原的應答能力,及產生應答的細胞數量。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷
什么是酶聯免疫
酶聯免疫法,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。步驟其實很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清(這是有些網友不理解為什么醫院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控
酶聯免疫法簡介
酶聯免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,用血清來進行檢測。 酶聯免疫法是利用抗體與酶復合物結合顯色的原理,并保持抗體免疫活性,其已成為分析化學領域中的前沿課題。
什么是酶聯免疫
酶聯免疫法簡介 酶聯免疫吸附劑測定法,簡稱酶聯免疫法,或者ELISA法。 它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。步驟 ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范
酶聯免疫分析缺點
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗
概述酶聯免疫法實驗的注意事項
⒈正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 ⒉在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括: ⑴固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚
酶聯免疫吸附實驗
實驗方法原理 利用標記技術將酶標記到抗體(抗原)上,使待檢物中相應的抗原(抗體)與酶標記抗體(抗原)發生特異性反應。在遇到相應的酶底物時,酶能高效、專一催化、分解底物,生成有顏色的產物。根據顏色的深、淺、可以判斷待檢物中有無特異的抗原(抗體)以及量的大小。該方法可對待檢樣品進行定性和定量分析;同時具
酶聯免疫吸附實驗
實驗方法原理利用標記技術將酶標記到抗體(抗原)上,使待檢物中相應的抗原(抗體)與酶標記抗體(抗原)發生特異性反應。在遇到相應的酶底物時,酶能高效、專一催化、分解底物,生成有顏色的產物。根據顏色的深、淺、可以判斷待檢物中有無特異的抗原(抗體)以及量的大小。該方法可對待檢樣品進行定性和定量分析;同時具有
酶聯免疫吸附實驗
間接細胞ELISA法檢測抗細胞表面抗原的特異性抗體實驗步驟本檢測方法可用來篩選細胞表面抗原的特異性抗體(圖 I.L 6)。注意:所有步驟必須在 4°C 、含 有 NaN3 的生理緩沖液中進行。附 加 材 料(其他材料見基本方案,帶 V 項 目 見 附 錄 1)未混合的細胞樣品堿性磷酸酶標記抗體或 F
酶聯免疫吸附實驗
1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結合到
酶聯免疫吸附實驗
酶聯免疫吸附(ELISA)可以:免疫酶染色各種細胞內成份的定位研究抗酶抗體的合成顯現微量的免疫沉淀反應定量檢測體液中抗原或抗體成份01實驗方法原理雙抗體夾心法(常用于測定抗原)? ? ?用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特
酶聯免疫吸附實驗
利用標記技術將酶標記到抗體(抗原)上,使待檢物中相應的抗原(抗體)與酶標記抗體(抗原)發生特異性反應。(來源:免疫學實習指導——北京大學醫學部基礎醫學院免疫學系)實驗方法原理利用標記技術將酶標記到抗體(抗原)上,使待檢物中相應的抗原(抗體)與酶標記抗體(抗原)發生特異性反應。在遇到相應的酶底物時,酶
人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析
人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中ATP酶(ATPase)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人ATP酶(ATPase)水平。用純化的人ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板,
什么是酶聯免疫法?
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。 1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Lin
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
人(DHT)酶聯免疫分析
人(DHT)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中雙氫睪酮(DHT)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人雙氫睪酮(DHT)水平。用純化的人雙氫睪酮(DHT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加
人酶聯免疫分析(ELISA)
人酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)水平。用純化的人鄰氨基苯甲酸合成酶(ASA)抗體包被微孔板,
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
人Apelin酶聯免疫分析
人Apelin酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中Apelin的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人Apelin水平。用純化的人Apelin抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
人Neuritin酶聯免疫分析
人Neuritin酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中Neuritin的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人Neuritin水平。用純化的Neuritin抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
鴨(T)酶聯免疫分析
鴨(T)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定鴨血清,糞便及相關液體樣本中**(T)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鴨**(T)水平。用純化的鴨**(T)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入**(T),再與HR
人(TotalT)酶聯免疫分析
人(TotalT)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中總**(TotalT)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人總**(TotalT)水平。用純化的人總**(TotalT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,
豬酶聯免疫分析(ELISA)
? 豬酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關液體樣本中胰島素(Insulin)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰島素(Insulin)水平。用純化的豬胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固