實用哺乳動物細胞培養手冊(下)
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒 清洗 在組織細胞培養中,體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物,上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質,均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗,且要根據器皿的組成材料不同,選擇不同 的清洗方法。 玻璃器皿的清洗 組織細胞培養中,使用量最大的是玻璃器皿,故工作最最大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求干凈透明無油跡,而且不能殘留任何物質。 (1)浸泡:初次使用和培養使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附著物軟化或被 溶液掉。新的初次使用的玻璃器皿,在生產及運輸過程中,玻璃表面帶有大量的干固的灰塵,且玻璃表面常呈堿性及帶有一些對細胞有害的物質等。新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗,然后用稀鹽酸液浸泡過夜,以中和其中的堿性物質。再次使用的玻璃器皿......閱讀全文
實用哺乳動物細胞培養手冊(下)
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒 清洗 在組織細胞培養中,體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物,上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質,均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗,且要根據器皿的組成材料不同,選擇不同 的清
實用哺乳動物細胞培養手冊(下)
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細胞培養中,體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物,上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質,均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗,且要根據器皿的組成材料不同,選擇不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
實用哺乳動物細胞培養手冊(五)
細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結 構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。細胞培養目的與用途1、科學研究:藥物研究開發與基礎研究 藥物研究與開發(1) 新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定
實用哺乳動物細胞培養手冊(四)
細胞培養無菌操作基本技術無菌操作技術分為三個部分:工作環境及表面的處理,細胞培養所用玻璃及塑料制品的處理及培養液與培養細胞的處理。工作環境的處理 使用層流超凈工作臺是最經濟有效的手段。超凈工作臺正常工作時,向下的氣流可阻擋外界空氣污染物進入超凈臺。(1)實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射 30-
實用哺乳動物細胞培養手冊(上)
細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結 構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。細胞培養目的與用途1、科學研究:藥物研究開發與基礎研究 藥物研究與開發(1) 新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定
實用哺乳動物細胞培養手冊(中)
細胞培養環境 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響, 要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側,常規操作
實用哺乳動物細胞培養手冊(中)
細胞培養環境1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響, 要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于
實用哺乳動物細胞培養手冊(一)
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細胞培養中,體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物,上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質,均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器 皿和重新使用的培養器皿都要嚴格徹底的清洗,且要根據器皿的組成材料不同,選擇不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
實用哺乳動物細胞培養手冊(三)
細胞培養環境1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響, 要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側,常規操作
實用哺乳動物細胞培養手冊(中)
細胞培養環境1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響, 要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側,常規
實用哺乳動物細胞培養手冊(二)
消化液:分離組織和分散細胞。常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二鈉 (EDTA) 兩種溶液。可以 單獨使用,也可以混合使用。(1)胰蛋白酶溶液胰蛋白酶(簡稱胰酶)是一種黃白色粉末,易潮解,應放置冷暗干燥處保存。目前應用的胰蛋白酶主要來自牛或豬的胰腺。胰酶的主要作用是使細胞間的蛋白質水解,使細胞相
實用哺乳動物細胞培養手冊(六)
緩沖系統大多數細胞所需 pH 在 7.2 - 7.4。但是,細胞培養最適 pH 值隨培養的細胞種類不同而 不同。成纖維細胞喜歡較高 pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸 pH (7.0 - 7.4)。 由于多數培養液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與 CO2 體系進行緩沖,因
超實用原代細胞培養小知識
很多老師在設計科研實驗的時候都會很迷茫,到底用什么細胞好? 越來越多的老師開始傾向于原代細胞的科研實驗,在設計實驗中,原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢?原代細胞的定義:原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有細胞的基
哺乳動物細胞的細胞培養
實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于一室,而洗刷消毒
哺乳動物細胞培養過程--培養條件
哺乳動物細胞培養過程 & 培養條件導語:哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。如下對各
哺乳動物細胞培養過程--培養條件
哺乳動物細胞培養過程哺乳動物細胞在培養過程中會經過組織提取,原代培養,傳代培養等過程。傳代培養會根據具體情況分為細胞株培養和細胞系培養。如下對各個過程進行簡述:原代培養:從動物機體取出組織后切碎,經過各種酶(常用胰蛋白酶),螯合劑(常用EDTA)結合機械方法(吸液管反復吸吹)處理,分散成單細胞,置于
哺乳動物細胞的細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度;不同種類的細胞對培養溫度要求也不同。人體細胞培養的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡。培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細胞代謝與溫度成正比;人體細胞在39-40℃1小時,即能
實用!手機“咔嚓”一下知食物熱量
減肥的時候總靠自己的意識力去抗衡美食的誘惑?讓智能神器來幫你吧! 據悉,日前,谷歌推出一款能夠根據食物照片計算食物的卡路里的手機App。當你要吃某種食物的時候,可以先拍一張照片用該App識別一下,就能知道你要吃的這一餐熱量有多高了。而“智能餐盤”SmartPlate則可以直接檢測食物的熱量和營
成都山地所7項技術入選《地震災后應急實用技術手冊》
四川省蘆山“4·20”7.0級強烈地震發生后,科技部通過科技部網站對外公布了《地震災后應急實用技術手冊》,中科院水利部成都山地災害與環境研究所7項技術入選該手冊。 成都山地所入選的技術包括:“泥石流綜合防治技術”、“滑坡(含崩塌)災害綜合防治技術”、“干旱地區不同巖土組成坡地植被恢復技術”
科技部發布《南方地區雨雪冰凍災后重建實用技術手冊》
為充分發揮科學技術在抗災救災與災后重建中的支撐作用,減少冰雪災害對我國南方地區造成的影響與損失,推動災區科學有效地進行恢復生產與重建,中國科技部1月9日發布了《南方地區雨雪冰凍災后重建實用技術手冊》。?據介紹,科技部會同國土資源部、交通部、農業部、水利部、教育部、林業局、氣象局、中國科學院等有關部門
關于征集《環境監測儀器實用手冊》內容的通知
各相關單位: 中國儀器儀表學會正在編撰系列叢書《環境監測儀器實用手冊》。該書是一部由我國儀器儀表界和環境監測界的專家們聯袂編撰的大型工具書,由我國著名科學家、兩院院士王大珩題名、作序,多位院士題詞。該書將比較系統和全面地介紹國內外用于環境監測的各種儀器設備的工作原理、結構特征、性能指
哺乳動物細胞培養有沒有厭氧的
哪有厭氧的哺乳動物啊開放培養時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中,此濃度的CO2與培養液PH緩沖體系中的NaHCO3濃度相平衡,二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞生長繁殖所需成分,它在細胞培養中的主要作用在于維持培養基的pH值
哺乳動物原代細胞培養的β半乳糖苷酶(熒光測定)
β半乳糖苷酶:β半乳糖苷酶由大腸桿菌lacZ基因編碼,可催化半乳糖苷水解。最大優勢是易于用免疫組織化學法觀測其原位表達,是最常用的監測轉染率的報道基因之一。以鄰—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)為底物可用標準的比色法檢測酶活性,其檢測動力學范圍為6個數量級。氯酚紅—β—D—半乳吡喃糖苷(CP
什么情況下需要更改實驗室手冊和程序文件?
盡管保持實驗室質量管理體系的基本穩定是其持續、有效運行的基礎,但是隨著內外環境的變化,各質量要素以及體系標準對要素的要求會發生變化,質量體系文件的更改(換版或修訂)也就不可避免。質量手冊作為實驗室質量管理方面綱領性的文件,更改不應過于頻繁。如果不考慮個別文字的修改和斟誤的話,文件有必要進行實質性修訂
哺乳動物原代細胞培養的β半乳糖苷酶(分光光度測定)
試劑和器材:?1.反應緩沖液:5g/L聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、0.05mol/L檸檬酸鈉-磷酸鹽緩沖液,pH4.3;2.終止液:0.25%甘氨酸-NaOH,pH10;3.底物:6mmol/L對硝基苯基-β-半乳呋喃糖苷溶于緩沖溶液中;4.微量離心機,帶1.5—2.0ml小管;
細胞培養室的滅菌與消毒了解一下!
1、甲醛熏蒸甲醛是一種高效能化學滅菌劑。不易燃、不爆炸、不腐蝕金屬。它能與蛋白質中的氨基酸結合而使蛋白變性,使酶的活性消失。故有強大的殺菌作用。一般稱作為“大消”,用來對細胞間進行徹底的消毒殺菌。但是甲醛是一種對人體有害的物質,并且細胞培養實驗室一般空氣流通都很差,甲醛的排出也很慢,至少要一周以上。
PCR佐劑手冊
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit
PEI轉染手冊
使用方法1. 接種細胞:用膠原酶消化細胞并計數(不建議用胰酶)。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板,以便在轉染時,貼壁細胞的密度大約在 80%左右。注:培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物1)轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面,以轉染 24
物位計的實用
微波物位計使用的微波頻率有三個頻段:C波段(5.8~6.3GHz)、X波段(9~10.5GHz)、K波段(24~26GHz)。制造商根據自己的技術及國家批準的頻率來設計產品。 物位測量中的微波一般是定向發射的,通常用波束角來定量表示微波發射和接收的方向性。波束角和天線類型有關,也和使用的微波頻
物位計的實用
物位測量中的微波一般是定向發射的,通常用波束角來定量表示微波發射和接收的方向性。波束角和天線類型有關,也和使用的微波頻率(波長)有關。 對于常用的圓錐形喇叭天線來說,微波的頻率越高,波束的聚焦性能越好,即波束角小,在實際使用中這是十分重要的,低頻微波物位計有較寬的波束,如果安裝不得當,將會