（ICPMS）測定食用菌中硒元素含量

　　硒既是一種營養元素，又是一種抗氧化劑，具有清除體內自由基及抗衰老的作用。它是人體紅細胞谷胱甘肽過氧化物酶和磷脂過氧化氫谷胱過甘肽過氧化物酶的組成成分，其主要作用是參與酶的合成，保護細胞膜的結構與功能免遭過度氧化和干擾。近年來的研究表明，硒及硒化物（Sodium Selenete）除具有抗氧化作用外，還有抗腫瘤、延長壽命和提高機體免疫功能等作用。機體缺硒將導致一系列疾病的發生，如克山病、大骨節病等。但世界上有40多個國家的土壤缺硒，我國有72%的地區屬于缺硒地區。因此，生產富硒食品成為我國功能性食品的研究熱點之一。
　　目前，食用菌作為富集硒元素的載體，因其栽培面積廣，操作簡便，富集效果顯著，在我國正被廣泛應用。但是食用菌中的硒含量是否屬安全食用量范圍，需要檢測才能判定。常見的測定方法有分光光度法、熒光法、氫化物原子熒光光譜法和電感耦合等離子質譜（ICP-MS）法。分光光度法和熒光法操作繁瑣，所用試劑2，3-二氨基萘（2，3-diaminonap-hthalene，簡稱DAN）有一定毒性且需進口。氫化物原子熒光光譜法和電感耦合等離子質譜（ICP-MS）法相對前2個方法快速、簡便、準確度和精密度要好。電感耦合等離子質譜儀（ICP-MS）雖能同時檢測多種元素，但其價格昂貴，需進口，且對實驗室環境要求較高。由于ICP-MS的載氣是高純氬氣，氬氣和氯化氬的同位素接近硒的同位素而產生很大干擾。因此，ICP-MS無法采用普通的方法進行硒的檢測。然而原子熒光光光度計是國產儀器，自動化程度高，價格合適，除硒元素外，還可用于檢測砷、汞、鉻、鉛等十多元素。目前，原子熒光光度計已是實驗室必備的常用儀器。該文采用氫化物原子熒光光譜法，對平菇、香菇、金針菇、姬菇和雙孢蘑菇5種常見的食用菌中硒元素進行測定，通過標準曲線相關性、精密度與靈敏度試驗、加標回收率試驗和不同品種食用菌硒含量的分析，制訂出食用菌中硒元素含量快速、簡便的檢測方法。
　　1 材料和方法
　　1.1 供試材料
　　食用菌樣品包括平菇（Pleurotus ostreatus）、雙孢蘑菇（又稱白蘑菇）（Agaricus bisporus）、香菇（Lentinus edodes）、姬菇（Plrurotus cornucopiae）、金針菇（Flammulina velutipes），均購自慈溪農貿市場。
　　1.2 試驗儀器
　　北京吉天儀器有限公司AFS-9130型原子熒光光度計；可控溫電熱板；萬分之一電子天平；粉碎機；超純水器。
　　所有器皿在使用前都經過5%硝酸浸泡24 h以上，最后用超純水充分沖洗備用，以消除干擾。
　　1.3 試驗試劑
　　硒標準儲備液（100 μg/mL）：購自中國計量科學研究院；硒標準工作液（1 μg/mL）：吸取100 μg/mL硒標準儲備液1.0 mL，定容至100 mL；混合酸：將硝酸與高氯酸按9∶1體積混合；鹽酸溶液（1+1）；鹽酸溶液（5%）；鐵氰化鉀溶液（100 g/L）；稱取10.00 g鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]溶于100 mL水中，混勻；硼氫化鉀溶液（10 g/L）：稱取10.00 g硼氫化鉀（KBH4），溶于氫氧化鉀溶液（5 g/L），然后定容至1 L，混勻。
　　所用試劑均為優級純，水為用GB/T6682規定的三級水制成的超純水。
　　1.4 樣品制備
　　取食用菌的可食用部分，洗凈后用紗布吸去水滴，用粉碎機打成勻漿后備用。
　　1.5 硒含量的測定
　　稱取1～10 g（精確至0.000 1 g）試樣，置于250 mL三角燒瓶或高腳燒杯中，加10.0 mL混合酸，蓋上彎頸小漏斗或表面皿放置過夜。次日于電熱板上加熱，并及時補加硝酸。當溶液變為清亮無色并伴有白煙時，再繼續加熱至剩余體積2 mL左右，切不可蒸干。冷卻，再加5.0 mL鹽酸溶液（1+1），繼續加熱至溶液變為清亮無色并伴有白煙出現，將Se6+還原成Se4+。冷卻，無損轉移至50 mL容量瓶中，加鹽酸10.0 mL和鐵氰化鉀溶液5.0 mL，混勻待測。同時做空白試驗。計算公式：
　　硒的含量（mg/kg）=(c-c0)×V×Dm×1 000
　　式中，C為試樣測定濃度（μg/L）；C0為試樣空白測定濃度（μg/L）；V為試樣定容體積（mL）；D為分取倍數；m為試樣質量（g）。
　　1.6 硒標準曲線的繪制
　　分別吸取硒標準工作液0、2.50 mL于50 mL容量瓶中，加鹽酸10.0 mL和鐵氰化鉀溶液5.0 mL，混勻待測。AFS-9130型原子熒光光度計具有自動配制標準曲線的功能，可根據配制的50.00 μg/L硒溶液，設定標準曲線的濃度范圍：0、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00、50.00 μg/L[1]。儀器條件：負高壓270 V；燈電流80 mA；載氣流量400 mL/min；屏蔽氣流量800 mL/min；原子化高度8 mm；測量方式為標準曲線法；讀數方式為峰面積；延遲時間1 s；讀數時間8 s[2-3]。
　　2 結果與分析
　　2.1 硒標準曲線的線性范圍
　　將0 μg/L硒標準溶液作為標準空白，把50.00 μg/L硒標準溶液作為最高濃度，利用儀器軟件自動功能繪制的標準曲線如圖1所示。以熒光強度值（I）對硒濃度值（C）進行回歸，得到回歸方程：I=21.947 C+11.543，相關系數R=0.999 8。