沒食子酸丙酯(PG),245-三羥基苯乙酮(THBP),叔丁基羥基鄰苯二酚(TBHQ),二氫愈創木酸(NDGA),丁基羥基茴香醚(BHA),二叔丁基羥甲基苯酚(Ionox-100),沒食子酸辛酯(OG),丁羥基甲苯(BHT)十二烷基沒食子酸酯(DG)。
1.1 儀器和試劑
高效液相色譜儀,帶紫外檢測器;
提取器:25 mL具塞玻璃離心管;
液體混勻器;
離心機;
旋轉真空濃縮儀。
乙腈、甲醇:色譜純;
正己烷、異丙醇:分析純,重蒸;
乙酸:分析純;
水:重蒸水;
乙腈飽和正己烷和正己烷飽和乙腈:將乙腈和正己烷搖勻2分鐘,使彼此飽和,分層放置。
純化過程采用飽和溶劑,抗氧化標準為PGIonox-100BHT TBHQ NDGA、OG DG THBP和BHA;
標準儲備液(1.00 mg/ml):制備異丙醇乙腈1+1,v/v冷凍保存。
標準工作液:使用前用異丙醇-乙腈1.1V稀釋至適當濃度
1.2 色譜條件
流動相:A=1.5%v/v醋酸甲醇溶液B=1.5%v/v醋酸水溶液;
色譜柱:RP-C18(5μm,250 mm×4.6mm I)。保護柱:RP-C18 (5 μm,40 mm×4.6 mm i.d.)。
柱溫:40℃;
檢測波長:280 nm;
進樣量:20 μL。
1.3 實驗方法
將1.00 g樣品在萃取器中稱重,并添加5 ml乙腈飽和正己烷。油樣在液體混合器上搖晃片刻以充分溶解。將10ml正己烷飽和乙腈添加到液體混合器中。將乙腈層快速混合1分鐘,離心3 000 r/min,將乙腈層轉移至50 ml濃度瓶中。正己烷層用乙腈層萃取兩次,每次10ml,用乙腈層濃縮。在瓶子里。在40℃水浴中,將濃縮液在旋轉真空中濃縮至1mL左右,將濃縮液轉移到5mL校準管中,用少量異丙醇清洗濃縮瓶,將洗液組合在校準管中,將異丙醇的體積固定在2mL,用0.45μm濾膜過濾,用高效液相色譜法(HPLC)進行分析,并采用外標法進行定量分析。