沉淀蛋白質的方法主要有:鹽析、有機溶劑、生物堿試劑、重金屬鹽、加熱凝固。
分析如下:
(1)鹽析破壞蛋白質的水化膜和電荷,采用不同濃度鹽可將不同的蛋白質分段析出,鹽析的蛋白質不變性,鹽析作用是可逆的。(2)有機溶劑可破壞蛋白質的水化膜,若調節pH=pI,則更易沉淀。低溫操作,快速分離溶劑不會使蛋白質變性,而常溫操作,蛋白質易變性。(3)沉淀生物堿試劑:鎢酸、三氯乙酸等的酸根與帶正電荷的蛋白質結合沉淀,會使蛋白質變性。(4)重金屬離子可與帶負電荷的蛋白質結合沉淀,會使蛋白質變性。(5)在等電點加熱蛋白質可形成凝塊沉淀,會使蛋白質變性。