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  • 發布時間:2022-05-11 15:58 原文鏈接: 蛋白質的提取方法有哪些

    眾所周知,人的生命活動不能缺少蛋白質,很多食物里面都含有蛋白質成分,正常的飲食可以為身體補充蛋白質。實際上,在生物化學研究領域,蛋白質的分離提取技術具有廣泛的應用,想要把蛋白質提取出來非常不容易,需要經過很多工序,并且要找到專業的操作技術,現在有下列這些方法可以提取蛋白質。
    1、超速離心法
    此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內,達到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質有蔗糖、甘油、CsCl等。
    用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時,除個別成分外,極難將某一抗原成分分離出來,故只用于少數大分子抗原的分離,如IgM、C1q,甲狀腺球蛋白等,以及一些比重較輕的抗原物質如載脂蛋白A、B等。多數的中、小分子量蛋白質采用此種方法很難純化。
    2、選擇性沉淀法
    其原理多根據各蛋白質理化特性的差異,采用各種沉淀劑或改變某些條件促使蛋白質抗原成分沉淀,從而達到純化的目的。最常用的方法是鹽析沉淀法。
    鹽析法的原理
    蛋白質在水溶液中的溶解度取決于蛋白質分子表面離子周圍的水分子數目,亦即主要是由蛋白質分子外周親水基團與水形成水化膜的程度以及蛋白質分子帶有電荷的情況決定的。蛋白質溶液中加入中性鹽后,由于中性鹽與水分子的親和力大于蛋白質,致使蛋白質分子周圍的水化層減弱乃至消失。同時,中性鹽加入蛋白質溶液后由于離子強度發生改變,蛋白質表面的電荷大量被中和,更加導致蛋白質溶解度降低,使蛋白質分子之間聚集而沉淀。由于各種蛋白質在不同鹽濃度中的溶解度不同,不同飽和度的鹽溶液沉淀的蛋白質不同,從而使之從其他蛋白分離出來。最常用的鹽溶液是33%~50%飽和度的硫酸銨。鹽析法簡單方便,可用于蛋白質抗原的粗提,丙種球蛋白的提取,蛋白質的濃縮等。鹽析法提純的抗原純度不高,只適用抗原的初步純化。

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