羥化酶亦稱為氫氧化酶，是加氧酶的一種，是催化利用氧分子形成氫氧化物（酚、醇）反應的酶。所謂單（加）氧酶，除底物外，還需要電子供體（NADP-H），AH+O2+NADPH+H+→AOH+NADP++H2O，再從苯丙氨酸合成酪氨酸，（苯丙氨酸羥化酶），從苯胺合成氨基苯酚（芳基-4-羥化酶）。從鯊烯（三十碳六烯squalene）合成類固醇（鯊烯羥化酶）以及進行類固醇的羥基化（各種類固醇羥化酶）等的反應中，都存在著羥化酶。在羥化酶中，多數以 P-450或F-AD等作為組成成分。在多數情況下，它存在于各種臟器微粒體。在副腎皮質的線粒體中也有存在。
