在20世紀初期，就已經發現了酶被其底物所飽和的現象，而這種現象在非酶促反應中，則是不存在的，后來發現底物濃度的改變，對酶反應速度的影響較為復雜，1913年前后Michaelis和Menten作了大量的定量研究，積累了足夠的實驗證據，從酶被底物飽和的現象出發，按照中間產物設想，提出了酶促反應動力學的基本原理，并歸納為一個數學表達式，稱之為米氏方程式：
[E]+[S]?[ES]?P+[E]
v=Vm[s]/(Km+[s])=Vm/(1+Km/[s])
式中，[E]為游離酶濃度；[S]為底物濃度；[ES]為酶與底物結合的中間絡合物濃度；v為酶促反應速度；Vm為酶促反應最大速度；Km為米氏常數，是酶促反應達最大速度（Vm）一半時的底物(S)的濃度