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  • 發布時間:2022-10-30 16:02 原文鏈接: 簡述包含體的形成

      是無定形的蛋白質的聚集,不被任何膜所包圍。細胞破碎后,包涵體呈顆粒狀,致密,低速離心就可以沉淀。包涵體難溶于水中,在變性劑溶液(如鹽酸胍、脲)中才能溶解。在這些溶液中,溶解的蛋白質呈變性狀態,即所有的氫鍵、疏水鍵全被破壞,疏水側鏈完全暴露,但一級結構和共價鍵不被破壞。因此當除去變性劑時,一部分蛋白質可以自動折疊成具有活性的正確構型,這一折疊過程稱為蛋白質的復性。

      包含體主要由蛋白質構成,其中大多是基因表達產物。這些基因表達產物沒有生物活性。為此,欲獲得天然活性態的目標產物,必需分離包涵體后,溶解包含體并使其中的目標蛋白恢復應有的天然活性。所以,包含體的出現不僅增加了生化工程師生物分離設計的難度,也為生物化學家的蛋白質折疊(protein folding)機理研究提出了新的課題。

      重組DNA技術為大規模生產目標蛋白質提供了嶄新的途徑,開辟了現代生物技術發展的新紀元。但是,人們在分離純化基因工程表達產物時遇到了意想不到的困難,很多利用大腸桿菌為宿主細胞的外源基因表達產物(如尿激酶、人胰島素、人生長激素、白細胞介素-6、人γ-干擾素等)不僅不能分泌到細胞外、而且在細胞內凝聚成沒有生物活性的固體顆粒-包涵體(inclusion bodies IBs)。

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