因抗血清蛋白濃度高，比重較抗原大，所以兩液交界處可形成清晰的界面。此處抗原抗體反應生成的沉淀在一定時間內不下沉。一般在室溫放置10min至數小時，在兩液交界處呈現白色環狀沉淀則為陽性反應。
本技術的敏感度為3～20μg/ml抗原量。環狀試驗中抗原、抗體溶液須澄清。該試驗主要用于鑒定微量抗原，如法醫學中鑒定血跡，流行病學用于檢查媒介昆蟲體內的微量抗原等，亦可用于鑒定細菌多糖抗原。因該技術敏感度低，且不能作兩種以上抗原的分析鑒別，現已少用。
在小口徑試管中先加入已知抗血清，然后將待檢抗原小心地加在血清的表面，成為界面清晰的兩層。數分鐘后，兩界面交界處出現白色沉淀環，為陽性反應。本試驗常用做抗原定性，如炭疽的診斷（Ascoli氏試驗）、鑒別血跡、媒介昆蟲的嗜血性等。
如果無血痕部位的檢材浸液與血痕浸液均呈陽性反應，則表示檢材可能含有雜質。如人血對照管呈陽性反應，其他各管均呈陰性反應，則表示檢材不含人血或可溶性蛋白太少，或被破壞。只有在血痕浸液和人血對照管呈陽性反應，而其他各管均呈陰性反應時，才證實檢材含有人血。
