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  • 發布時間:2019-12-30 20:10 原文鏈接: 火箭電泳實驗

    火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。

    一、材料

    1. 診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清。

    2. 待檢血清(抗原):人血清。

    3. 參考血清。

    4. pH8.6,離子強度0.05 M 巴比妥緩沖液配制(見對流免疫電泳實驗)。

    5. 其它:瓊脂粉,微量進樣器,打孔器,玻璃板,電泳儀。

    二、方法

    1. 抗體瓊脂板的制備

    同單向擴散法,但注意稀釋液應用pH8.6離子強度0.05 M 的巴比妥緩沖液。

    2. 打孔見下圖。

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    3. 將用緩沖液稀釋的適宜濃度的參考血清及適當稀釋的抗原(人血清)分別加入各孔中,每孔10或20 μl,要求加量準確而不外溢。

    4. 把加完樣的免疫瓊脂板放入電泳槽中進行電泳,電壓4~6 V/cm,電泳時間1~5 h,直到大部分抗原孔前端出現頂端尖窄而完全閉合的火箭狀沉淀線,關閉電源。

    5. 取下瓊脂板,以抗原孔中心為起點,量出各火箭狀沉淀線的高度。同單向瓊脂擴散法繪制標準曲線,查出待檢血清中Ig含量。


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