1.正性肌力作用：是一種直接作用，而不是通過神經機制實現的。其正性肌力作用是由于Na -K -ATP酶的抑制，鈉、鉀離子通過心肌細胞膜主動轉運之能量，即由此酶提供（鈉泵）。洋地黃毒毒苷與Na -K -ATP酶在細胞膜上可逆性結合，阻止了ATP的結合，阻抑Na 和K 的主動轉運，鈉泵失活，結果使細胞內Na 增加，K 減少，洋地黃苷類的直接電生理作用及毒性是由此而來的。細胞內Na 增加能刺激Na -Ca2 交換增多，而使細胞對Ca2 的攝入增加，Ca2 在興奮收縮耦聯中起了重要而關鍵的作用，因而細胞內Ca2 的增加可能是洋地黃毒毒苷產生正性肌力作用的基礎。洋地黃毒毒苷對心力衰竭具有有益的血流動力學改變作用，可增加衰竭心臟的心排血量和心臟做功。洋地黃毒毒苷使心肌收縮力增加可導致心氧耗量增加，但同時使心臟收縮期心室腔中排血量增加，殘余血量減少，又能反射性地使心率下降和降低外周血管阻力。心臟容積隨之縮小，室壁張力降低，心臟收縮期縮短，相對地延長舒張期，使因心力衰竭而擴大的心臟縮小和心率減慢。因此，心肌總的耗氧量減少。
2.電生理作用：治療劑量的洋地黃毒毒苷輕度降低竇房結的自律性，使房室結傳導時間和不應期延長，致使房室傳導減慢，心房肌的應激性降低，縮短心房肌的不應期而延長房室結的不應期。這是由于迷走神經張力增高，抗腎上腺素能作用和程度較輕的直接作用引起的。中毒量洋地黃毒毒苷引起的電生理改變為自律性增高，抑制傳導性可導致各種心律失常發生。
3.自主神經系統作用：洋地黃毒毒苷作用于心肌，具有擬迷走和擬交感神經作用。迷走神經常傳導由中樞發放的沖動，對心臟活動發生持續的抑制性影響，使竇性心率減慢，房室傳導延緩，心房不應期縮短。洋地黃毒毒苷的擬交感神經作用增加竇房結的興奮節律；加快心肌和房室束對興奮的傳導；增強心房肌和心室肌的收縮力。大劑量的洋地黃毒毒苷還能興奮中樞神經系統，并可因交感神經興奮增強而誘發異位性心律失常。洋地黃毒毒苷屬于非極性洋地黃毒毒苷的擬交感神經作用較強，具有較強的正性肌力作用，但易誘發或加重異位性心律失常。
4.治療量的洋地黃毒毒苷可引起如下心電圖的改變。一是心電力產上常有ST段魚鉤狀下垂和T波雙向或倒置，T波的變化是洋地黃毒毒苷對心肌代謝影響的標志。洋地黃毒毒苷中毒時，心電圖上一般不出現這種特征性的ST-T改變。二是Q-T間期縮短。三是P-R或P-Q間期延長，這是負性傳導作用的結果，并不表示洋地黃毒毒苷中毒。
5.血管作用：洋地黃毒毒苷的直接興奮血管平滑肌或血管運動中樞作用，可使外周血管阻力增加。
6.腎臟作用：對腎臟本身有輕微的直接和間接的利尿作用。