ELISA檢測的目的是為實驗提供準確可靠的定量分析實驗依據。為了保證實驗數據的可靠性,在實驗過程中必須堅持全面質量控制和全過程質量控制。在收集標本前都必須有一個完整的計劃。上海勁馬設備有限公司來告訴你。
注意事項:
1.每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,如要做復孔,標本量收集體積=100ul×檢測種類×2 。
2.對于作某一個具體指標來說,先用一系列稀釋度作一批標本測定,得出對實驗有意義的一個稀釋度(即測定劑量反應曲線),然后用一個*適稀釋度測定即可。
3.收集標本前必須清楚要檢測的成分是否夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲藏在4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本標本2 -8 ℃ 可保存48 小時,-20 ℃ 可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
4.血清標本采集時,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以 HRP為標記的 ELISA 測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
5.為了保證尿液檢測結果的準確性,必須正確收集尿液標本和保存。盛尿容器要清潔干燥。使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢測結果。尿液標本必須新鮮,留取后,應及時檢測或保存,以免細菌繁殖。因在室溫中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結晶而干擾檢測。
6.標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性 HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在 ELISA中可使本底加深。
7.凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混合,不要再混合器上強烈振蕩。
8.渾濁或有沉淀的標本應先離心或者過濾,澄清后再檢測。
9.反復凍融會使蛋白效價降低,所以待測標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。也可以加入適當的防腐劑。