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  • 發布時間:2022-11-20 14:03 原文鏈接: 桿狀病毒轉染載體的分類

    用于表達融合型蛋白的轉染質粒

    是一類早期構建的轉染質粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每個載體中,多角體蛋白基因啟動子下游ATG啟始密碼后含有一個單一的BamHⅠ酶切位點,當外源基因和多角體基因的讀碼框架正確時,就可以獲得含1個或幾個多角體蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。

    用于表達單一非融合蛋白的轉染質粒

    由于外加的多角體蛋白或其它的氨基酸可能對外源蛋白的生物活性或細胞定位產生影響,所以用于表達非融合型蛋白的轉移載體被廣泛應用。幾種不同的策略被用于設計高水平表達非融合蛋白的轉移載體:

    (1)如pAcRP[5]系列等,都在多角體基因啟動子啟始密碼ATG上游引入一個單一的限制性多克隆位點;

    (2)如pAcYM1[6]和pEV55及其衍生物中都含有所有的多角體基因上游非翻譯序列(包括啟始密碼子ATG中的A以及其后跟著的單一限制性克隆位點或多克隆位點),這樣就可以避免由于5′端非翻譯前導序列的缺失而影響mRNA的穩定性;

    (3)如pVL941、pVL1392、pVL1393[7]等,是將融合載體pAC311多角體基因啟動子下游啟始密碼ATG改變為ATT。這樣,插入的外源基因必須含有自身的ATG,并從此開始翻譯,而多角體基因啟動子驅動的mRNA轉錄后產物穩定水平不受影響。

    用于表達多個非融合蛋白的轉染載體

    這種載體的主要特征是含有2個或2個以上相同的啟動子,可表達2條或2條以上多肽鏈的蛋白。

    如Emery和Bishop[8]等構建的pAcVC2轉染質粒,含有兩個方向相反的多角體基因啟動子。重組病毒可同時表達多角體蛋白和淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒(LCMV) N蛋白。Takehara[9]等構建了可插入兩種外源基因的雙重表達載體。該類載體也是利用兩個相同的多角體基因啟動子,使獲得的重組病毒同時表達兩種產物。Takehara等因此成功地表達了HBVsAg和HBeAg。


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