原代培養時,如果上皮細胞和成纖維細胞為分區成片混雜生長,每種細胞都以小片或區域性分布的方式生長在瓶壁上。可采用機械的方法去除不需要的細胞區域而保留需要的細胞區域,其方法如下:
(1)將要純化細胞的培養瓶,在凈化室內放在倒置顯微鏡監視下進行。
(2)用硅橡皮刮子在不需要生長的細胞區域推劃,使細胞懸浮在培養液中,注意不要傷及所需細胞。
(3)推劃后用培養液沖洗振搖兩次倒掉,即可將培養基加入原瓶繼續培養。
(4)數日后如發現不需要的細胞又長出,可再進行上述操作,這樣反復多次可以純化細胞。操作過程中要嚴格無菌操作,防止污染。