一、尿沉渣檢查的內容
正常人尿中可有很少量紅細胞,白細胞,上皮細胞,結晶,粘液絲,罕見有透明管型。
但如果有過多的血細胞和異常上皮細胞和管型,以及細菌,滴蟲,腫瘤細胞和病毒包涵體,那就提示有腎臟及泌尿系統的疾病或損傷。
其中,管型可根據橫徑大小分為(1)狹窄型(為1-2個紅細胞直徑大小),(2)中等寬度型(3-4個紅細胞直徑大小),(3)寬型(5個紅細胞直徑大小)。寬型管型提示腎實質有嚴重損害。
二、尿沉渣檢查的指征
1、美國臨床檢驗標準委員會(NCCLS)規定凡有下述情況的應進行顯微鏡檢查:
(1)醫生提出鏡檢要求的,
(2)檢驗科規定的患者(如泌尿科,腎病科,糖尿病,應用免疫抑制劑及妊娠婦女),
(3)任何一項利理學,化學檢驗結果異常的。
2、我國檢驗學會規定凡紅細胞,白細胞,蛋白和亞硝酸鹽四項干化學檢查中有其中任何一項不正常者都應進行顯微鏡檢查,并以顯微鏡檢查報告為準。
那也就是說,只有干化學法檢測尿液紅細胞,白細胞,蛋白和亞硝酸鹽四項檢查均陰性(正常)時,檢驗人員可不做顯微鏡檢查(復查)。
三、尿沉渣檢查的方法
(一)非染色尿沉渣鏡檢
操作
1、取刻度離心管,倒入混合后的新鮮尿液10ml,500r/min離心5min。
2、待離心停止后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2ml沉渣,輕搖離心管, 使尿沉渣有形成分充分混勻。
3、取尿沉渣0.02ml,滴在載玻片上,用18mm′18mm的蓋玻片覆蓋。
結果判斷
尿沉渣鏡檢觀察,用10′10鏡頭,觀察其中有形成分的全貌及管型。用10′40鏡頭觀察鑒定細胞成分和計數,應觀察10個視野所見最低和最高值,記錄結果。管型用高倍鏡鑒定,但計數按低倍鏡觀察20個視野,算出一個視野的平均值,記錄結果。
參考值
1、細胞成分:每高倍鏡視野所見的最低值至最高值:
紅細胞0-3/HP,白細胞0-5/HP。
2、管形(透明):每低倍鏡視野平均值0-1/全片
3、尿結晶和鹽類數量以每一高倍視野+,2+,3+,4+報告
(二)、染色尿沉渣鏡檢
Sternheimer-Malbin(SM)染色液的配制:
溶液I:結晶紫3.0g95%乙醇20.0ml草酸銨0.8g蒸餾水80.0ml
溶液II:沙黃0.25g95%乙醇40.0ml蒸餾水40.0ml
將意識哪個兩種溶液分別置冰箱保存。配制應用染色時,取3份溶液I接97份溶液II,混合過濾,儲存于棕色瓶中,室溫下可保存3個月。
操作
在0.2ml沉渣中加入1滴染色液,混合,覆蓋蓋薄片,3min后鏡檢。
結果判斷
紅細胞染成淡紫色。多形核白細胞的核染成橙紅色,漿內可見顆粒。透明管型染成粉紅色或淡紫色。細胞管型染成深紫色。
(三)、尿沉渣定量檢查
(1)、過篩法
操作
1、留病人新鮮晨尿,混合后直接滴入血細胞計數池內。
2、計數5個大方格中的紅細胞,白細胞,上皮細胞及管型數,結果′2即得出每ml 內的數。
參考值
正常人每ml新鮮尿中紅細胞,白細胞,小圓上皮細胞為0-2/ml 超過2-5/ml為可疑,10/ml為陽性。
(2)、一小時尿沉渣計數
操作
1、標本收集:
患者先排尿棄去,準確收集3h尿液于清潔干燥容器內送檢(標本留取時間為5:30-8:30)。
2、準確測量3h尿量,充分混合。取混勻尿液10ml,置刻度離心管中,1500r/min,離心5min,用吸管吸棄上層清液9ml,留下1ml,充分混勻。吸取混勻尿液1滴,注于血細胞計數板內。細胞共數10個大方格,管型計數20個大方格。
計算
1000 3小時尿總量ml數
1小時細胞數=10個大方格細胞總數×----------× ---------------------------
10 3
20個大方格管型總數 1000 3小時尿總量ml數
1小時管型數= ----------------------------- × --------- × ---------------------------
2 10 3
式中: 1000為 換算成ml數,10為尿液濃縮倍數。
參考值
紅細胞:男性 <3萬/h,女性< 4萬/h。
白細胞:男性 <7萬/h,女性 <14萬/h,
管型: < 3400/h。
四、尿沉渣定量分析板的使用
器材
1、尿沉渣離心管:帶有刻度,可放10ml尿液,管底有一個"凸凸頭"。當傾倒離心后的上清尿液時,"凸凸頭"里的尿沉渣不會流出,大約容量為ml。
2、尿沉渣定量分析板:每塊分析板上有10個均一厚度(0.1mm)計數池,每個計數池內有固定體積(1ml)的計數區(計數區內劃分10個中方格,每個中方格又劃分為9個小方格),
操作
1、取均勻混合尿10ml于離心管中,1500r/min,離心5min,倒去上清尿液。
2、取1小滴(15-20ml)尿沉渣沖入定量分析板其中一個計數池中,然后用低倍鏡觀察,高倍鏡計數,計數在1ml計數區內紅細胞,白細胞,上皮細胞和各類管型的數量。
也有國家采用不離心的混合尿,沖入計數池內進行計數。
表1 尿沉渣顯微鏡檢查規范操作比較
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項 目 NCCLS JCCLS 中國
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標本要求 推薦晨尿,放置時間 推薦放置時間不超過2h。 推薦晨尿,放置時間
不超過2h。 不超過1h。
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標本量 10ml,12ml,15ml 10ml 10ml
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離心管 透明的塑料或玻璃的 透明的塑料或玻璃的帶 帶刻度的離心管
帶刻度,有蓋,尖底 10ml,0.2ml刻度的尖
的一次性試管 底試管
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離心機要求 帶自動鎖蓋的恒溫水 水平式離心機
平式離心機
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離心時間 5min 5min 5min
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離心力 400g(其中半徑是指 500g(其中半徑是指離 1500r/min
離心機中軸至離心管 心機中軸至離心管底部
底部的距離) 的距離)
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留取沉渣量 依照廠商的產品而定 0.2ml 0.2ml
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檢查量 依照廠商的產品而定 15ml 15ml
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載玻片和蓋 依照廠商的產品而定 75mm×26mm 18mm×18mm
玻片要求 18mm×18mm
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顯微鏡要求 普通光學顯微鏡 普通光學顯微鏡 普通光學顯微鏡
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鏡檢觀察 推薦采用濕片法 推薦采用濕片法,觀察視野 推薦采用濕片法,細胞
要求 數目20-30個,不少于10個 成分觀察視野數目為20
個高倍視野,管型為10
個低倍鏡視野
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染色要求 推薦活體染色 不必采用染色
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結果報告方式 推薦采用每ml尿 以視野均值報告 細胞成分以每高倍視野
有形成分數量來 最低至最高值范圍報告,
表示 管型以每低倍視野均值
報告
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表2 各種尿沉渣成分的主要臨床意義
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尿沉渣成分 主要臨床意義
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紅細胞 月經,過度運動,各種腎,泌尿系統疾病,如外傷,炎癥
結石,結核,腫瘤,各種原發或繼發急性和慢性腎小球腎
炎或腎病
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白細胞 泌尿系統感染(包括上泌尿道和下泌尿道),各種腎損害
(包括免疫性炎癥和移植腎排斥反應)
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上皮細胞
腎小管上皮細胞 腎實質及腎小管損害(如藥物中毒)
磷狀上皮細胞 正常人或污染
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管型
寬型 嚴重腎實質損害
腎上皮細胞 腎小管退化,變性
顆粒或蠟樣 腎實質損害
透明 酸性尿--含高鹽,多為病理性
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細菌 泌尿系統感染
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脂肪體(卵圓小體) 腎病綜合癥
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表3 四種常見尿沉渣檢查法CV%值比較
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方 法 白細胞 紅細胞
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普通載玻片不加玻片法 15.0 17.0
載玻片加蓋玻片法 12.0 15.0
改良Neubauer計數池法 10.2 9.9
Fast-Read-10R定量板法 9.3 7.0
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血尿的鑒別診斷
一,血尿的概念
1, 以傳統的尿離心沉渣玻片鏡檢,在高倍鏡(40′,即放大400倍)下檢查10個視野后,如每高倍視野中見到紅細胞超過3-5個,則定為鏡下血尿。
2,但是不同作者對正常尿液中紅細胞數量的觀察不完全一致,如
(1) 以高倍鏡下紅細胞數表達者有:
0-2/Hp, 3-5/Hp, 1-8/Hp。
(2) 以12h尿紅細胞數表達者有:
Addis(1926年)< 425000/12h,
其他作者 < 600000/12h(相當 2/Hp或5000/ml尿)。
(3) 以24h尿紅細胞數表達者有:
< 1.2′106/24h尿, < 1.2′106/24h尿。
(4) 以每ml尿中紅細胞數表達者有:
< 8000/ml(8/ml <5000/ml 500-5000/ml <14000/ml
二,尿中紅細胞形態
1,腎性血尿--紅細胞有形態改變--至少有兩種以上紅細胞形態
(1) 大小改變,(2)形態異常,(3)紅細胞內血紅蛋白分布及含量變化。
見表4。
2,非腎性血尿--紅細胞大小形態一致--以單一正常形態紅細胞為主
三,尿中異形紅細胞形成的機制
1,紅細胞通過有病理改變的腎小球濾膜,受到積壓損傷。
2,紅細胞受到不同pH和滲透壓持續變化的腎小管濾液的影響。
(1) 堿性尿(pH>9.0),紅細胞膜脂質外層面積增加,出現鋸齒形和棘形紅細胞。
(2)酸性尿(pH<4.0),紅細胞膜脂質內層面積增加,出現可逆口形或細胞腫脹,溶解。
(3)滲透壓較低(如400mOsm)出現面包圈樣,戒形紅細胞。
(4)滲透壓偏高(如900 mOsm)且pH增高時,則形成鋸齒形,棘形紅細胞。
四,鑒別尿液中紅細胞形態的方法:
1,普通顯微鏡
非染色法,由于缺乏色澤對比和立體感,不易鑒別。
染色法(甲基綠染色,結晶紫-沙黃染色,瑞氏染色),可增加形態鑒別特征。
2,相差顯微鏡
紅細胞立體感強,易于鑒別。
3,血液分析儀
可通過測定紅細胞的MCV和RDW進行鑒別。腎性血尿以小紅細胞為主,MCV小于血中紅細胞的MCV。非腎性血尿以大紅細胞為主,MCV大于血中紅細胞的MCV。腎性血尿RDW增大,非腎性血尿RDW正常。
4,尿液有形成分分析儀
如日本Sysmex UF-100,可將尿液中成分作熒光染色后識別,如腎性血尿,紅細胞散射光分布在圖象左側,而非腎性血尿,紅細胞散射光分布在圖象右側。
5,掃描電鏡
檢測敏感,但價格昂貴,難于普及。
以上方法中以相差顯微鏡檢查為首選。
表4 尿液各種紅細胞形態的分類定義
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紅細胞 形態簡圖 形態描述 臨床意義
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圓盤形 中央雙凹圓盤狀 非腎小球來源,
見于出血,外傷
感染,腫瘤,結
石,結核等。
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異形紅細胞>75%為腎性血尿,<20%為非腎性血尿
棘形 環樣紅細胞膜, 腎小球來源,見于
有向膜外或膜內 腎小球腎炎
數量不等,大小 正常人和非腎性血
不一囊狀突起 尿 <2%,而腎性血
尿>75%
鋸齒形 紅細胞表面有短
(皺縮形) 的突起,但大小高
低,但大小高低基
本一致,均勻分布
環形 細胞,膜呈致密雙
(面包圈形) 圈形平坦狀
影形 細胞膜極薄,整個
細胞呈淡影狀(胞
內血紅蛋白丟失)
口形 單一凹陷呈碗狀
靶形 目靶狀或鈴狀
裂形 半圓盤狀,帶有2-3
個尖端突起,呈極小
不規則碎片